Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.98.2-99
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2003
Bacterial canker of sweet cherry (Prunus cerasus L.) was observed in farmers' orchard in Goesan, Chungbuk in 2003. Typical canker symptom occurred on the branches or twigs of sweet cherry in early spring and bacterial exudates oozed out of the cracked barks of diseased trees. Watersoaked brown symptom appeared on the leaves and severe infection caused thorough defoliation on the branches or twigs of sweet cherry. When cut the severely infected branches or twigs, irregular and rusty-colored symptoms in sapwood and heartwood were clearly found, indicating that they could serve as specific symptoms of bacterial canker of sweet cherry. The gram negative, aerobic bacterium isolated from the lesion produced fluorescent pigments on King's B agar medium but did not grow at 37$^{\circ}C$ The bacterium formed Levan-type colonies, and showed negative reactions in oxidase reaction, arginine dihydrolysis test, and pectolytic activity Based on the biochemical and pathological characteristics, the causal organism was identified as Pseudomonas syringae pv. morsprunorum. This is the first report on bacterial canker of sweet cherry in Korea.
In this study, the chromosome-encoded pcuRCAXB genes that are required for p-cresol degradation have been identified by using a newly constructed green fluorescent protein (GFP)-based promoter probe transposon in the long-chain alkylphenol degrader Pseudomonas alkylphenolia. The deduced amino acid sequences of the genes showed the highest identities at the levels of 65-93% compared with those in the databases. The transposon was identified to be inserted in the pcuA gene, with the promoterless gfp gene being under the control of the pcu catabolic gene promoter. The expression of GFP was positively induced by p-cresol and was about 10 times higher by cells grown on agar than those in liquid culture. In addition, p-hydroxybenzoic acid was detected during p-cresol degradation. These results indicate that P. alkylphenolia additionally possesses a protocatechuate ortho-cleavage route for p-cresol degradation that is dominantly expressed in colonies.
This study was performed to compare medium characteristics during the composting stage for medium turning performed using an excavator agitator and a prototype medium turner in button mushroom cultivation. The changes in temperature in the medium did not significantly differ between the treatments until the 3rd turn performed using the excavator agitator. However, during the 4th and 5th turns, the temperature increased during turning with the prototype medium turner. During outdoor composting, various types of microorganisms such as thermophilic bacteria (Bacillus spp.), Actinomycetes, fluorescent Pseudomonas spp., and filamentous fungi were found to be distributed in the medium. The counts of aerobic bacteria and fluorescent Pseudomonas spp. did not significantly differ between treatments, and the counts of thermophilic bacteria and thermophilic actinomycetes were slightly higher during turning with the prototype medium turner. The rice straw was slightly shorter and water content lower for the prototype medium turner. There was no significant difference between pH and EC treatments. The L, a, and b values tended to increase on turning with the prototype medium turner.
To develop indicators for soil health evaluation, biological characteristics of native soils from the different parent materials were studied. Survival rate of fluorescent Pseudomonas in soils was the lowest as 0.1% while those of thermophilic Bacillus and alkaliphilic bacteria were over the 90% by the soil drying stress. There was positive relationship between soil microbial biomass and organic carbon exudated from the microbial biomass by the treatment. The average air-drying effect of soils was 39.7% with ranges of 9.7~95.0%. The propagules of mesophilic Bacillus and Gram negative bacteria were increased by the re-wetting of dried soils. Soil pH affected positively to the recovering rate of microbial number. Average recovering rate of microbes was 65.3%, and there was positive relationship between microbial biomass recovery and fluorescent Pseudomonas population.
Number of bacterial isolates were collected from high mountainous areas at various locations in the whole country to select promising biocontrol agents. Most of selected isolates belonged to fluorescent pseudomonads. Population densities of fluorescent pseudomonads were examined by DLF method. Alll selected isolates rapidly multiplied on spermosphere after seed inoculation upto 24, and then the population abruptly declined. When seeds were germinated fully, bacteria moved to newly emerging radicle. The good root colonizing isolates, B16 and V13 proliferated on the growing root and moved down to the root tip and lateral roots. but the poor root colonizing isolates, MC07 and X01 moved much slower. Scanning electron microscopic observations showed that the cells of the good colonizing isolates were arranged linearly on the growing root and parallel to growing root axis and continuously existed on the root tip, Whereas the cells of poorly colonizing isolates were gathered and scattered randomly on the root surface.
Infection structures were observed using a fluorescence microscope at the penetration sites on the leaves of potato plants pre-inoculated with the bacterial strains Pseudomonas putida TRL2-3, Micrococcus luteus TRK2-2, and Flexibacteraceae bacterium MRL412, which mediated an induced systemic resistance on potato plants against late blight disease caused by Phytophthora infestans. In order to compare the infection structures on the leaves expressing systemic acquired resistance, the leaves of potato plants pre-treated with DL-3-amino butyric acid (BABA) were also observed after challenge inoculation with the same pathogen. The infection structures were investigated. The total number of germination and appressorium formation of P. infestans were counted. Furthermore, the frequencies of fluorescent epidermal cells at the penetration sites, which indicate a defense response of plant cell, were estimated. There were no differences on the germination rates of the fungal cysts among the untreated control, BABA pre-treated, and bacterial strains pre-inoculated plants. However, appressorium formation was slightly decreased on the leaves of BABA pre-treated plants compared to those of untreated as well as bacterial strains pre-inoculated plants. Furthermore, the frequencies of fluorescent cells of BABA pre-treated and bacterial strains pre-inoculated were higher than that of untreated plants, indicating an active defense reaction of the host cells against the fungal attack. On the other hand, the pre-treatment with BABA caused a stronger fluorescent of epidermal cells at the penetration sites compared to the pre-inoculation with the bacterial strains. Interestingly, the frequency of fluorescent cells by BABA, however, was lower than that by the bacterial strains. Based on the results it is suggested that the infection structures showing resistance reaction on the leaves of potato plants were different between by pre-inoculation with bacterial strains and by pre-treatment with BABA against the late blight pathogen.
Plant leaf surface is an important niche for diverse epiphytic microbes, including bacteria and fungi. Plant leaf surface plays a critical frontline defense against pathogen infections. The objective of our study was to evaluate the effectiveness of a starch-based super-absorbent polymer(SAP) combination, which enhances water potential and nutrient availability to plant leaves. We evaluated the effect of SAP on the maintenance of bacterial populations. In order to monitor bacterial populations in situ, a SAP mixture containing Pseudomonas syringae pv. tabaci that expressed recombinant green fluorescent protein(GFPuv) was spray-challenged onto whole leaves of Nicotiana benthamiana. The SAP combination treatment enhanced bacterial robustness, as indicated by disease severity and incidence. Unexpectedly, bacterial numbers were not significantly different between leaves treated with the SAP combination and those treated with water alone. Furthermore, young leaves treated with the SAP combination had more severe symptoms and a greater number of bacterial spots caused by primary and secondary infections compared to young leaves treated with the water control. In contrast, bacterial cell numbers did not statistically differ between the two groups, which indicated that measurement of viable GFP-based bacterial spots may provide a more sensitive methodology for assessing virulence of bacterial pathogens than methods that require dilution plating following maceration of bacterial-inoculated leaf tissue. Our study suggests that the SAP combination successfully increased bacterial aggressiveness, which could either be used to promote the ability of biological agents to control weedy plants or increase the robustness of saprophytic epiphytes against competition from potentially harmful microbes.
Antagonistic rhizobacteria, more specifically fluorescent pseudomonads and certain species of Bacillus, are known as biocontrol agents of fungal root diseases of agronomic crops. In this study, 144 bacteria were isolated from cucumber rhizosphere and screened as potential biological control agents against Phytophthora drechsleri, the causal agent of cucumber root rot, in vitro condition. Non-volatile compounds of 23 isolates showed noticeable inhibition zone (> 30%) against P. drechsleri, whereas volatile compounds of 7 isolates could prevent more than 30% of the mycelial growth of the fungus. All promising isolates, except of Pseudomonas flourescens V69, promoted significantly plant growth under in vitro condition. P. flourescens CV69 and V11 exhibited the highest colonization on the root. Results of the greenhouse studies showed that a reduction in disease incidence by use of some strains, and particularly use of strains CV6 and V11 as a soil treatment, exhibited a reduction in disease incidence so that suppressed disease by 85.71 and 69.39% respectively. Pseudomonas flourescens CV6 significantly suppressed disease in comparison to Ridomil fungicide. The use of mixture bacterial strains in the soil inoculated by the fungus resulting in falling down the most of the plants which didn't show significant difference with infected control soils without bacteria.
Chan-Jung Lee;Hye-Sung Park;Seong-Yeon Jo;Gi-Hong An;Ja-Yun Kim;Kang-Hyo Lee
Journal of Mushroom
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v.22
no.2
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pp.37-47
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2024
Fluorescent bacteria were isolated from sporocarps that browned into various mushrooms during survey at places of the production in Korea. We examined the pathogenicity, biodiversity, and genetic characteristics of the 19 strains identified as Pseudomonas tolaasii by sequence analysis of 16S rRNA and White Line Assay. The results emphasize the importance of rpoB gene system, fatty acid profiles, specific and sensitive PCR assays, and lipopeptide detection for the identification of P. tolaasii. As a result of these various analyses, 17 strains (CHM03~CHM19) were identified as P. tolaasii. The phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene showed that all strains were clustered closest to P. tolaasii lineage, two strains (CHM01, CHM02) were not identified as P. tolaasii and have completely different genetic characteristics as a result of fatty acids profile, specific and sensitive PCR, lipopetide detection, rpoB sequence and REP-PCR analysis. Pathogenicity tests showed 17 strains produce severe brown discolouration symptoms to button mushrooms and watersoaking of sporophore tissue within three days after inoculation. But two strains did not produce discolouration symptoms. Therefore, these two strains will be further investigated for correct species identification by different biological and molecular characteristics.
Bae, Yeoung-Seuk;Guy R. Kundsen;Louise-Marie C. Dandurand
The Plant Pathology Journal
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v.18
no.1
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pp.30-35
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2002
The hyphal growth and biocontrol efficacy of Trichodemo harzianum in soil may depend on its interactions with biotic components of the soil environment. The effect of soil microbial biomass on growth and biocontrol efficacy of T. hanianum isolate ThzIDl-M3 (green fluorescent protein transformant) was investigated using artificially prepared different levels of soil microbial biomass (153,328, or 517ug biomass carbon per g of dry soil; BC). The hyphal growth of T. harzanum was significantly inhibited in the soil with 328 or 517 $\mu$g BC compared with 153 ug BC. When ThzIDl-M3 was added to the soils as an alginate pellet formulation, the recoverable population of ThzIDl-M3 varied, but the highest population occurred in 517ug BC. Addition of alginate pellets of ThzIDl-M3 to the soils (10 per 50 g) resulted in increased indigenous microbial populations (total fungi, bacterial fluorescent Pseudomonas app., and actinomycetes). Furthermore, colonizing ability of ThzIDl-M3 on sclerotia of Sclerotinia sclerotiorum was significantly reduced in the soil with high revel of BC. These results suggest that increased soil microbial biomass contributes to increased interactions between introduced T. harzianum and soil microorganisms, consequently reducing the biocontrol efficacy of 1T. harzianum.
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