To investigate the effects of sulfite on the chloroplast development, etiolated barley seedlings were treated with 100 mM sulfite solution every 3 hour by spraying during 96 hours greening Period. The effects were determined by chlorophyll a, b and carotenoids contents, photosynthetic electron transport activity, chlorophyll fluorescence yield and fluorescence quenching parameters. The contents of chlorophyll a and carotenoids were decreased than that of control by treatment of salfite over 48 hours greening. PS II Is more sensitive to sulfite than PS I Is. And by the addition of DPC to the chloroplasts of the barley seedling treated with sulfite, the photoreduction of DCPIP was not recovered. In greening with suite treated barley leaves, Fo, Fv and Nlh ratio were decreased with little difference from that of control. But qP, qNP and qR were lowed in comparison with those of controls whereas qE was markedly higher than that of control. Especially, It is Interesting that qR was decreased markedly compared to that of control. The results in the change of PS I activity, Nf and qP suggest that the strate of Inhibition by suite Is carbon dioxide reduction cycle.
In this work, a green and simple one-pot route was developed for the synthesis of highly fluorescent aminofunctionalized graphene quantum dots (a-GQDs) via hydrothermal process without any further modification or surface passivation. We synthesized the a-GQDs using glucose as the carbon source and ammonium as a functionalizing agent without the use of a strong acid, oxidant, or other toxic chemical reagent. The as-obtained aGQDs have a uniform size of 3-4 nm, high contents of amino groups, and show a bright green emission with high quantum yield of 32.8%. Furthermore, the a-GQDs show effective fluorescence quenching for $Cu^{2+}$ ions which can serve as effective fluorescent probe for the detection of $Cu^{2+}$. The fluorescent probe using the obtained aGQDs exhibits high sensitivity and selectivity toward $Cu^{2+}$ with the limit of detection as low as 5.6 nM. The mechanism of the $Cu^{2+}$ induced fluorescence quenching of a-GQDs can be attributed to the electron transfer by the formation of metal complex between $Cu^{2+}$ and the amino groups on the surface of a-GQDs. These results suggest great potential for the simple and green synthesis of functionalized GQDs and a practical sensing platform for $Cu^{2+}$ detection in environmental and biological applications.
To examine the microenvironmental effect of DNA on the photosensitized reaction, the electron-donor-connecting porphyrin, meso-(9-phenanthryl)-tris(N-methyl-p-pyridinio) porphyrin (Phen-TMPyP), was synthesized. Phen-TMPyP can bind to oligonucleotides with two binding modes, depending on the DNA concentration. The fluorescence lifetime measurement of Phen-TMPyP shows a shorter component than that of the reference porphyrin without the phenanthryl moiety. However, the observed value is much longer than those of previously reported similar types of electron-donor-connecting porphyrins, suggesting that electron-transfer quenching by the phenanthryl moiety is not sufficient. The fluorescence quantum yield of Phen-TMPyP ($5{\mu}M$) decreased with an increase in DNA concentration of up to $5{\mu}M$ base pair (bp), possibly due to self-quenching through an aggregation along the DNA strand, increased with an increase in DNA concentration of more than $5{\mu}M$ bp and reached a plateau. The fluorescence quantum yield of Phen-TMPyP with a sufficient concentration of DNA was larger than that of the reference porphyrin. The singlet oxygen ($^1O_2$) generating activity of Phen-TMPyP was confirmed by the near-infrared emission spectrum measurement. The quantum yield of $^1O_2$ generation was decreased by a relatively small concentration of DNA, possibly due to the aggregation of Phen-TMPyP, and recovered with a sufficient concentration of DNA. The recovered quantum yield was rather smaller than that without DNA, indicating the quenching of $^1O_2$ by DNA. These results show that a DNA strand can stabilize the photoexcited state of a photosensitizer and, in a certain case, suppresses the $^1O_2$ generation.
The effect of ultraviolet-B (UV-B) radiation on photosynthesis was studied by the simultaneous measurements of $O_2$ evolution and chlorophyll (Chl) fluorescence in tobacco leaves. When the tobacco leaves were teated with UV-B (1 $W{\cdot}m^{-2}$), the maximal photosynthetic $O_2$, evolution (Pmax; 4.60 ${\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$) at 200 ${\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$) was decreased with increasing time of UV-B treatment showing 80% decline after 4 h treatment. Chl fluorescence parameters were also affected by ultraviolet-B. Fo was increased while both Fm and Fv were decreased, resulted in the decreased of photochemical efficiency of PSII (Fv/Fm). Non-radiative dissipation of absorbed light as heat as estimated as NPQ (Fm/Fm' - 1) was also decreased with increasing time of UV-B treatment while the extent of photochemical quenching (qP) was not changed. Thus, the ratio of (1-qP)/NPQ parameter was also increased with increasing time of UV-B treatment indicating PSII is under the threat of photoinhibition. The result indicate that UV-B primarily decreases the capacity to dissipate excitation energy by trans-thylakoid pH, which in turn inhibits PSII activity.
Plants possess the ability to dissipate the excitation energy for the protection of photosynthetic apparatus from absorbed excess light. Heat dissipation is regulated by xanthophyll cycle in thylakoid membranes of chloroplasts. We investigated the mechanistic aspects of xanthophyll cycle-dependent photoprotection against low-temperature photoinhibition in plants. Using barley and rice as chilling-resistant species and sensitive ones, respectively, chilling-induced chlorophyll fluorescence quenching, composition of xanthophyll cycle pigments and mRNA expression of the zeaxanthin epoxidase were examined. Chilled barley plants exhibited little changes in chlorophyll fluorescence quenching either of photochemical or non-photochemical nature and in the photosynthetic electron transport, indicating low reduction state of PS II primary electron acceptor. In contrast to the barley, chilled rice showed a marked decline in those parameters mentioned above, indicating the increased reduction state of PS II primary electron acceptor. In addition, barley plants were shown to have a higher capacity to elevate the pool size of xanthophyll cycle pigments in response to cold stress compared to rice plants. Such species-dependent regulation of xanthophyll cycle activity was correlated with the gene expression level of cold-induced zeaxanthin epoxidase. Chilled rice plants depressed the gene expression of zeaxanthin epoxidase, whereas barley increased its expression in response to cold stress. We suggest that chilling-induced alterations in the pool size of xanthophyll cycle pigments related to its capacity would play an important role in regulating plant's sensitivity to chilling stress.
Correlative changes between photosynthetic O2 exchange rates and room temperature Chl fluorescence were investigated in wheat (Triticum aestivum L.) chloroplasts treated with high temperature for 5 min. With increasing treatment temperature, photosynthetic O2 evolution rate mediated by PSII was decreased, showing 50% inhibition at 38$^{\circ}C$ (I50). But PSI activity measured by O2 uptake rates was stimulated as a function of increasing temperature. Dark level fluorescence (Fo)-temperature (T) analysis showed that fluorescence rising temperature (Tr), critical temperature (Tc), and peak temperature (Tp) was 38, 43, and 52$^{\circ}C$, respectively. Quenching analysis of Chl fluorescence showed that both the oxidized fraction of plastoquinone (qQ) and degree of thylakoid membrane energization (qNP) increased up to 4$0^{\circ}C$ and then declined dramatically. These results suggest that Tr is correlated with temperature showing a 50% of inhibition of photosynthesis and under mild high temperature stress, qNP is worth regarding as indicator for heat-induced damage of photosynthesis.
In order to investigate the oligomerization state of the plasma membrane proteolipid apoprotein purified from the bovine kidney, fluorescence polarization experiment was carried out in the two different solvent systems, i.e., water and organic solvent(chloroform-methanol). The molecular volumes of the proteins estimated from the Perrin equation, were to be 45,258$A^3$ and 17,608$A^3$ in water and organic solvent, respectively. These values indicate that a trimerization is possibly occurring in the aqueous environment. As an auxiliary experiment for the calculation of the molecular volume using Perrin equation, fluorescence quenching constants ($K_q$) with the quencher acrylamide and fluorescence lifetimes (${\tau}_F$) of the intrinsic fluorophore tryptophan residue were estimated in the two different solvent systems. $K_q$ in water was 18.21$M^{-1}$ and it was 46.24$M^{-1}$ in organic solvent. Fluorescence lifetimes of tryptophan residue were calculated to be 2.80 nsec. in water and 3.81 nsec. in organic solvent, respectively.
Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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제3권1호
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pp.11-21
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1999
The effect of sulfite on barley seedlings was investigated through Chl content, the electron transport activity of the photosystem, and Chl fluorescence. Barley leaves were harvested every 12 hrs during greening periods, and were then treated with a sulfite solution in either light or dark conditions. In both cases, the Chl content decreased in comparison with the control at any greening period. After sulfite treatment in the light, the activity of PS I decreased slightly, yet that of PSII showed a decrease of about 15%. The values of Fv, qP and qE decreased, however, the value of ql increased compared with the control. In addition, the value of qE decreased in leaves greened more than 12 hrs compared with that of the control. This indicates that the photosynthetic complex involved in energy dependent fluorescence quenching is undeveloped in a 12 hrs greened leaf, accordingly, it was a hardly affected by sulfite. After sulfite treatment in the dark, the activities of PSII and PSI decreased slightly, there was a small change in the value of Fv, qP decreased, and qE and the ratio of qNP/q increased in comparison with the control. As a result, PSII and PSI were not inhibited, however, the redox of QA was inhibited, and the excited energy was lost through the nonphotochemical pathway. The effects of sulfite in light or dark conditions were not considerably different with the Chl fluorescence quenching analysis method. In both light and dark conditions, the value of qP significantly decreased with sulfite compared to that of the control. This implies that the redox of QA was inhibited by sulfite in both light and dark contions.
Bovine angiogenin (bAng) is a potent blood vessel inducing protein purified from cow In ilk. fluorescence spectroscopy has been used to study the interaction of bAng with actin in 50 mM Tris-HCl pH 7.5, and 1 mM $CaCl_2$ at $25^{\circ}C$. Actin contains four tryptophans but bAng contains no tryptophans. A 50% decrease in intrinsic fluorescence accompanied formation of the bAng/actin complex. By contrast, the interaction of RNase A, a homologous protein to bAng, with actin results in about 10% quenching of the fluorescence. Fluorescence titration experiments were performed by adding increasing concentrations of bAng (0~1.0 ${\mu}M$) to a constant concentration of actin (0.1 ${\mu}M$), and the dissociation constant $K_d$ for the bAng/actin complex and the stoichiometry n were measured as $20{\pm}1$ nM and $1.0{\pm}0.1$ respectively. These results suggest that the interaction between bAng with actin is specific and that quenching of actin fluorescence has occurred in the bAng/actin complex. The bAng binding sites of actin are discussed in the results of this study, and we propose that Trp-80 in the small domain of bovine actin is responsible for the bAng/actin binding.
In this study, we synthesized a new fluorescent polypyridyl dye 2 containing a 2,2'-bipyridine in the center and two 2,2':6',2"-terpyridines at both ends. When exposed to various metal ions, the dye 2 showed selective fluorescence responses. In the presence of $Cu^{2+}$ and $Ni^{2+}$, it exhibited a highly effective fluorescence quenching, leading to large $K_{sv}$ values of up to $10^5$. In response to most other metal ions including $Al^{3+}$, in contrast, its fluorescence changes little, showing a small Ksv value at $10^2$. Meanwhile, the compound 2 revealed a differentiated fluorescence response to $Zn^{2+}$, which is evidenced by a large red shift of > 100 nm. Such a red shift from the ion binding is attributed to the planarization of the bipyridyl unit extending the effective conjugation length in conjunction. A polypyridyl compound will find important usefulness in chemosensor application due to its selective binding to metal ions. Subsequent research concerned with modified derivatives is currently going on, as a way to provide high solubility even after metal-complexing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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