Fusarium oxysporum f. sp. fragariae is a fungal pathogen causing wilt disease on strawberry. The RAPD and RFLP of IGS region of rDNA were used to identify genetic affinity among 22 isolates of F. oxysporum f. sp. fagariae obtained from various location of major strawberry cultivating areas in Korea. Approximately 2.6kb DNA fragment was amplified with primer CNS1 and CNL12, and polymorphisms were observed with Avail and HinfI. A dendrogram was constructed using the UPGMA for cluster analysis. Eight distinct groups were clustered based on the banding pattern obtained from RAPD and rDNA RFLP. There was high level genetic variation among Korean isolates of Fusarium of sporum f. sp. fragariae.
유기물, 석회질소, 요소 병행처리가 딸기 시들음병의 친환경적 방제인 태양열소독의 효과 증진여부를 밝히고자 논산딸기시험장의 비닐하우스에서 2006년과 2008년에 분석하였다. 딸기에서 분리한 Fusarium oxysporum f. sp. fragariae 7개 균주의 100% 치사시간은 $45^{\circ}C$에서 6.6일, $50^{\circ}C$에서는 5.1일이 소요되었고 100% 치사온도는 $46.7{\pm}0.1^{\circ}C$로 나타났다. 태양열 소독에 의해 유기물 처리구는 처리전보다 토양내 유기물 함량이 증가하였고, 석회질소 처리구는 산도, 유기물, 칼슘 함량이 증가하였으나 요소처리구는 차이가 없었다. 태양열 소독시 지온은 처리간에 차이를 나타냈으며 7월 30일부터 8월 10일까지가 가장 높았고($48.4\sim54.8^{\circ}C$) 유기물+석회질소 처리구가 다른 처리구보다 $3\sim4^{\circ}C$ 높게 유지되었다. 또한 토양내 시들음병균은 각 처리구 모두에서 사멸되었다. 시들음병 이병주율은 무처리는 2006년 20%, 2008년 13.3%의 발병율을 나타낸 반면 태양열 소독 처리구 모두에서는 시들음병 발생이 없었으며 처리간 유의성이 있었다. 따라서 딸기 시들음병 방제를 위한 유기물+석회질소를 병행한 태양열 소독 방법은 기존의 태양열소독방법을 보완하여 처리기간을 줄이면서도 효과적인 방법이 될 것이다.
The biological control effect of Trichoderma harzianum on the Fusarium wilt of strawberry and several factors affecting on its efficacy were examined through pot experiments. T. harzianum grown on wheat barn, rice straw, rice hull, sawdust or barley straw was respectively incorporated into the pathogen-infected soil, and significantly suppressed the strawberry wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. fragariae. The wheat bran or rice straw culture of T. harzianum suppressed the disease incidence more effectively than other substrates for culture, decreasing it to 68% of the untreated control. The conidial suspension of T. harzianum alone or the suspension mixed with crab shell also effectively reduced the disease incidence. The control effectiveness of T. harzianum was high in acid soil (pH 3.5~5.5). In sandy loam soil, the disease incidences and population densities of the pathogen were decreased by the treatment of T. harzianum, while there was no significant effect of T. harzianum on the pathogen in loam soil.
Jong Hyup, Park;Min Geun, Song;Sang Woo, Lee;Sung Hwan, Choi;Jeum Kyu, Hong
The Plant Pathology Journal
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제38권6호
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pp.673-678
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2022
Vapours from origanum oil (O) and thyme oil (T) were applied to the four soil-borne strawberry pathogens Fusarium oxysporum f. sp. fragariae, Colletotrichum fructicola, Lasiodiplodia theobromae, and Phytophthora cactorum, causing Fusarium wilt, anthracnose, dieback, and Phytophthora rot, respectively. Increasing T vapour doses in the presence of O vapour strongly inhibited mycelial growths of the four pathogens and vice versa. When mycelia of F. oxysporum f. sp. fragariae and P. cactorum exposed to the combined O + T vapours were transferred to the fresh media, mycelial growth was restored, indicating fungistasis by vapours. However, the mycelial growth of C. fructicola and L. theobromae exposed to the combined O + T vapours have been slightly retarded in the fresh media. Prolonged exposure of strawberry pathogens to O + T vapours in soil environments may be suggested as an alternative method for eco-friendly disease management.
The intergenic spacer(IGS) sequence of Fusarium oxysporum have been reported to provide reliable information concerning intraspecific variation and phylogeny of fungal species. The eleven strains of Fusarium oxysporum and its formae speciales belonging to section Elegans were compared with sequencing analysis. The direct sequencing of partial IGS was carried out using PCR with primer NIGS1(5'-CTTCGCCTCGATTTCCCCAA-3')/NIGS2(5'-TCGTCGCCGACAGTTTTCTG-3') and internal primer NIGS3(5'-TCGAGGATCGATTCGAGG-3')/NIGS4(5'-CCTCGAATCGATCCTCGA-3'). A single PCR product was found for each strain. The PCR fragments were sequenced and revealed a few within species polymorphisms at the sequence level. The size of partial IGS sequencing of F. oxysporum was divided into three groups; $526{\sim}527$ bp including F. o. f. sp. chrysanthemi, cucumerinum, cyclaminis, lycopersici, and fragariae; $514{\sim}516$ bp including F. o. f. sp. lilii, conglutinans, and raphani; 435 bp for F. o. f. sp. cucumerinum from Korea. Sequence analysis of PCR products showed that transitions were more frequent than transversions as well as the average numbers of substitution per site were range 0.41% to 3.54%.
Hong, Sung Won;Kim, Da-Ran;Kim, Ji Su;Cho, Gyeongjun;Jeon, Chang Wook;Kwak, Youn-Sig
The Plant Pathology Journal
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제34권3호
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pp.163-170
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2018
Strawberry Fusarium wilt disease, caused by Fusarium oxysporum f. sp. fragariae, is the most devastating disease in strawberry production. The pathogen produces chlamydospores which tolerate against harsh environment, fungicide and survive for decades in soil. Development of detection and quantification techniques are regarded significantly in many soilborne pathogens to prevent damage from diseases. In this study, we improved specific-quantitative primers for F. oxysporum f. sp. fragariae to reveal correlation between the pathogen density and the disease severity. Standard curve $r^2$ value of the specific-quantitative primers for qRT-PCR and meting curve were over 0.99 and $80.5^{\circ}C$, respectively. Over pathogen $10^5cfu/g$ of soil was required to cause the disease in both lab and field conditions. With the minimum density to develop the wilt disease, the pathogen affected near 60% in nursery plantation. A biological control microbe agent and soil solarization reduced the pathogen population 2-fold and 1.5-fold in soil, respectively. The developed F. oxysporum f. sp. fragariae specific qRT-PCR protocol may contribute to evaluating soil healthiness and appropriate decision making to control the disease.
Fusarium oxysporum f. sp. fragariae (Fof) 에 의한 딸기 시들음병은 국내 딸기재배에서 가장 중요한 병해 중 하나이다. 국내 발생하는 Fof의 특성을 분석하고자 시들음병균의 유전적 다양성, 병원성과 살균제 반응을 조사하였다. 분리균은 Fo080701를 제외한 모든 균주에서 Fof 특이적 primer에 증폭되었다. 분리균의 nuclear ribosomal intergenic spacer region과 EF-1α sequences 분석 결과 3개의 lineage를 형성하였다. 대부분의 분리균은 lineage 1에 속하였으며 lineage 3에 3개 균주와 lineage 2에 1개 균주가 포함되었다. 분리된 모든 균주는 설향품종에 병원성을 보였다. Prochloraz는 DNA lineage 2에 속하는 Fo080701균주를 제외하곤 시들음병균의 EC50값이 0.02-0.1 ㎍/ml로 낮은 농도에서 효과적으로 균사 생장을 억제하였다. Metconazole의 EC50값도 0.04-0.22 ㎍/ml로 prochloraz와 비슷한 억제 효과를 보였다. Pyraclostrobin의 EC50값은 0.23-168.01 ㎍/ml로 균주에 따라 차이가 컸다. 딸기 재배포장에서 boscalid+fludioxonil, fluxapyroxad+pyraclostrobin, prochloraz manganese이 딸기 시들음병 방제에 효과적이었다.
우리나라 여러 딸기 재배지에서 전형적인 시들음 증상을 나타내는 이병식물에서 분리한 32개의 Fusarium oxysporum 균주들을 vegetative compatibility와 전기영동에 의한 동위효소상의 차이에 의해 분류하고 이들과 병원성과의 관계를 알아보았다. Nitrate nonutilizing(nit) mutant를 이용하여 vegetative compatibility group으로 분류해 본 결과 크게 A, B, C, D의 4개 그룹으로 나눌 수 있었으며 A그룹에는 15개 균주, B그룹에는 7개 균주, C와 D그룹에는 각각 2개 균주, 그리고 single VCG인 6개 균주가 존재하였다. 전기영동에 의한 esterase, catalase, acid phosphatase, leucin-aminopeptidase(LAP)의 동위효소상을 비교하여 본 결과 I, II, III, IV의 4개 그룹으로 나눌 수 있었으 I 그룹에는 18개 균주, II그룹에는 2개 균주, III그룹에는 6개 균주, IV그룹에는 6개 균주로 분류할 수 있었다. 또한, VCG의 A와 D그룹에 속하는 모든 균주들의 동위효소상의 I 그룹에 속하였으며 VCG B그룹의 7개 균주들 중에서 5개 균주가 동위효소상의 IV그룹, 7개 균주들 중에서 5개 균주가 동위효소상의 IV그룹, 나머지 2개 균주는 I 그룹과 III 그룹에 속하였으며 C그룹의 균주는 III과 IV 그룹에 속하였고, single VCGs들은 III 그룹에 4개 균주, II 그룹에 2개 균주가 속하므로 VCG와 동위효소상 간에는 밀접한 관계가 있음을 알 수 있었다. 4개 딸기 품종에 대해 병원성을 비교하여 본 결과 VCG A에서 선발된 2개 균주들은 보교조생에 대해 가장 병원성이 강하였으며 정보나 여홍에 대해서도 강한 병원성을 가지고 있었다. 반면에 B 그룹에서 선발된 2개 균주들은 4개 품종에 대해 병원성이 약하거나 거의 없었으며 C 그룹에서 선발된 1개 균주는 여홍에 대해 상대적으로 가장 강한 병원성을 가지고 있었다.
Kim, Min-Jeong;Shim, Chang-Ki;Ko, Byong-Gu;Kim, Ju
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권5호
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pp.708-716
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2020
The purpose of this study was to identify strawberry wilt pathogens and evaluate the efficacy of Chlorella fusca CHK0059 for improving plant growth and suppressing Fusarium wilt. We identified 10 isolates of wilt pathogens of non-pesticide Seolhyang strawberry plant, including Fusarium oxysporum f. sp. fragariae, using morphological and molecular analysis. On the 15th day after 0.4% CHK0059 treatment, the plant height of the untreated control strawberry plants was significantly greater than that of the CHK0059-treated strawberry plants. After 85 days, both treatments showed a similar tendency regarding the height of the strawberry plants. However, the thickness of strawberry leaves treated with the CHK0059 was found to be 1 mm thicker than that of the untreated control. The flowering percentage of the CHK0059 plants was also 40.2% higher on average than that of the untreated control. The chlorophyll content of strawberry leaves treated with the CHK0059 was also, on average, 6.63% higher than that of the untreated control. After 90 days of the CHK0059 treatment, the incidence of Fusarium wilt in the CHK0059-treated plants had reduced by 9.8% on average compared to the untreated control. The population density of F. oxysporum f. sp. fragariae was also reduced by approximately 86.8% in the CHK0059-treated plants by comparison to the untreated control at 70 days after treatment. The results indicate that the microalga C. fusca CHK0059 is an efficient biological agent for improving strawberry plant growth and suppressing Fusarium wilt disease in organic strawberries.
Do, Yu Jin;Kim, Do Hyeon;Jo, Myung Sung;Kang, Dong Gi;Lee, Sang Woo;Kim, Jin-Won;Hong, Jeum Kyu
한국균학회지
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제47권3호
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pp.219-232
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2019
Chemicals related to hydrogen peroxide ($H_2O_2$) and nitric oxide (NO) generations were exogenously applied to Fusarium oxysporum f. sp. fragariae (Fof) causing Fusarium wilt disease in strawberry plants, and regulations of in vitro conidial germination and mycelial growth of the fungus by the chemical treatments were evaluated. $H_2O_2$ drastically reduced the conidial germination of Fof in a dose-dependent manner, and treatment with 3-amino-1,2,4-triazole (3-AT) catalase inhibitor also led to dose-dependent inhibition of conidial germination but relatively moderately. Gradual decreases in mycelial growth of Fof were found by high concentrations of $H_2O_2$, whilst exogenous 3-AT slightly increased the mycelial growth. Increasing sodium nitroprusside (SNP) NO donor, $N^G$-nitro-l-arginine methyl ester (L-NAME) NO synthase (NOS)-inhibitor and tungstate nitrate reductase (NR) inhibitor led to dose-dependent reductions in conidial germination of Fof in quite different levels. SNP conversely increased the mycelial growth but increasing L-NAME moderately decreased the mycelial growth. Tungstate strongly enhanced mycelial growth. Differentially regulated in vitro mycelial growths of Fof were demonstrated by SNP, L-NAME and tungstate with or without $H_2O_2$ supplement. Superoxide anion production was also regulated during the mycelial growth of Fof by nitric oxide. These results show that $H_2O_2$ and NO-associated enzymes can be suggested as fungal growth regulators of Fof as well as eco-friendly disease-managing agents in strawberry production fields.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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