The aim of this study was to explore the role of IL-6-miR-210 in the regulation of Tregs function and atrial fibrosis in atrial fibrillation (AF). The levels of interleukin (IL)-6 and IL-10 in AF patients were detected by using ELISA. Proportions of Treg cells were detected by fluorescence activated cell sorting analysis in AF patients. The expression of Foxp3, α-SMA, collagen I and collagen III were determined by western blot. The atrial mechanocytes were authenticated by vimentin immunostaining. The expression of miR-210 was performed by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). TargetScan was used to predict potential targets of miR-210. The cardiomyocyte transverse sections in AF model group were observed by H&E staining. The myocardial filaments were observed by masson staining. The level of IL-6 was highly increased while the level of IL-10 (Tregs) was significantly decreased in AF patients as compared to normal control subjects, and IL-6 suppressed Tregs function and promoted the expression of α-SMA, collagen I and collagen III. Furthermore, miR-210 regulated Tregs function by targeting Foxp3, and IL-6 promoted expression of miR-210 via regulating hypoxia inducible factor-1α (HIF-1α). IL-6-miR-210 suppresses regulatory T cell function and promotes atrial fibrosis by targeting Foxp3.
Sarcopenia is an age-related, progressive skeletal muscle disorder involving the loss of muscle mass and strength. Previous studies have shown that γ-aminobutyric acid (GABA) from fermented oysters aids in regulatory T cells (Tregs) cell expansion and function by enhancing autophagy, and concomitantly mediate muscle regeneration by modulating muscle inflammation and satellite cell function. The fermentation process of oysters not only increases the GABA content but also enhances the content of branched amino acids and free amino acids that aid the level of protein absorption and muscle strength, mass, and repair. In this study, the effect of GABA-enriched fermented sarco oyster extract (FSO) on reduced muscle mass and functions via Treg modulation and enhanced autophagy in aged mice was investigated. Results showed that FSO enhanced the expression of autophagy markers (autophagy-related gene 5 [ATG5] and GABA receptor-associated protein [GABARAP]), forkhead box protein 3 (FoxP3) expression, and levels of anti-inflammatory cytokines (interleukin [IL]-10 and transforming growth factor [TGF]-β) secreted by Tregs while reducing pro-inflammatory cytokine levels (IL-17A and interferon [IFN]-γ). Furthermore, FSO increased the expression of IL-33 and its receptor IL-1 receptor-like 1 (ST2); well-known signaling pathways that increase amphiregulin (Areg) secretion and expression of myogenesis markers (myogenic factor 5, myoblast determination protein 1, and myogenin). Muscle mass and function were also enhanced via FSO. Overall, the current study suggests that FSO increased autophagy, which enhanced Treg accumulation and function, decreased muscle inflammation, and increased satellite cell function for muscle regeneration and therefore could decrease the loss of muscle mass and function with aging.
The purpose of this research is to investigate the influence of demographic and housing life-style variables on evaluation or choice criteria to the decision making for purchasing house. The results of this research were as follows ; 1) In analysis on housing life-style according to demographic variables, it showed that the age group had significant difference in decoration pursuits ; the educational group had significant difference in self-expression ; the income group had significant difference in self-expression and interior function. 2) In analysis on evaluation or choice criteria of decision making for purchasing house according to demographic variables, it showed that : the age group had significant difference in surrounding environment ; the educational group had significant difference in interior environment, interior or exterior facilty, apartment management, economics and surrounding environment ; the income group had significant difference in avail of approach, convenience facilities, apartment management, economics and surrounding environment. 3) In analysis the influence of demographic and housing life-style variables on evaluation or choice criteria to decision making for purchasing house, it was effected on educational level, decoration pursuit, practicality and ostentation in interior environment ; decoration pursuit, self-expression, interior function and practicality in interior or exterior facility ; decoration pursuit, practicality and ostentation in avail ability of approach and convenience facilities ; self-expression, practicality and ostentation in apartment management and economics ; age level, income level, decoration pursuit, self-expression, practicality and ostentation in surrounding environment.
In vertebrates, Fgf signaling is essential for the development of pharyngeal pouches, which controls facial skeletal development. Genetically, fgf3 and fgf8 are required for pouch formation in mice and zebrafish. However, loss-of-function phenotypes of fgf3 and fgf8 are milder than expected in mice and zebrafish, which suggests that an additional fgf gene(s) would be involved in pouch formation. Here, we analyzed the expression, regulation, and function of three fgfs, fgf4, fgf24, and fgf17, during pouch development in zebrafish. We find that they are expressed in the distinct regions of pharyngeal endoderm in pouch formation, with fgf4 and fgf17 also being expressed in the adjacent mesoderm, in addition to previously reported endodermal fgf3 and mesodermal fgf8 expression. The endodermal expression of fgf4, fgf24, and fgf17 and the mesodermal expression of fgf4 and fgf17 are positively regulated by Tbx1 but not by Fgf3, in pouch formation. Fgf8 is required to express the endodermal expression of fgf4 and fgf24. Interestingly, however, single mutant, all double mutant combinations, and triple mutant for fgf4, fgf24, and fgf17 do not show any defects in pouches and facial skeletons. Considering a high degree of genetic redundancy in the Fgf signaling components in craniofacial development in zebrafish, our result suggests that fgf4, fgf24, and fgf17 have a potential role for pouch formation, with a redundancy with other fgf gene(s).
Objective: To examine the regulatory effects of exercise on myokine expression in horse skeletal muscle cells, we compared the expression of several myokine genes (interleukin 6 [IL-6], IL-8, chemokine [C-X-C motif] ligand 2 [CXCL2], and chemokine [C-C motif] ligand 4 [CCL4]) after a single bout of exercise in horses. Furthermore, to establish in vitro systems for the validation of exercise effects, we cultured horse skeletal muscle cells and confirmed the expression of these genes after treatment with hydrogen peroxide. Methods: The mRNA expression of IL-6, IL-8, CXCL2, and CCL4 after exercise in skeletal muscle tissue was confirmed using quantitative-reverse transcriptase polymerase chain reactions (qRT-PCR). We then extracted horse muscle cells from the skeletal muscle tissue of a neonatal Thoroughbred. Myokine expression after hydrogen peroxide treatments was confirmed using qRT-PCR in horse skeletal muscle cells. Results: IL-6, IL-8, CXCL2, and CCL4 expression in Thoroughbred and Jeju horse skeletal muscles significantly increased after exercise. We stably maintained horse skeletal muscle cells in culture and confirmed the expression of the myogenic marker, myoblast determination protein (MyoD). Moreover, myokine expression was validated using hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-treated horse skeletal muscle cells. The patterns of myokine expression in muscle cells were found to be similar to those observed in skeletal muscle tissue. Conclusion: We confirmed that several myokines involved in inflammation were induced by exercise in horse skeletal muscle tissue. In addition, we successfully cultured horse skeletal muscle cells and established an in vitro system to validate associated gene expression and function. This study will provide a valuable system for studying the function of exercise-related genes in the future.
This study aimed to investigate whether the antidiabetic drugs dipeptidyl peptidase 4 (DPP4) inhibitors such as evogliptin and sitagliptin affect the membrane DPP4 (mDPP4) enzymatic activity and immune function of T helper1 (Th1) cells in terms of cytokine expression and cell profiles. The mDPP4 enzymatic activity, cytokine expression, and cell profiles, including cell counts, cell viability, DNA synthesis, and apoptosis, were measured in pokeweed mitogen (PWM)-activated CD4+CD26+ H9 Th1 cells with or without the DPP4 inhibitors, evogliptin and sitagliptin. PWM treatment alone strongly stimulated the expression of mDPP4 and cytokines such as interleukin (IL)-2, IL-10, tumor necrosis factor-alpha, interferon-gamma, IL-13, and granulocyte-macrophage colony stimulating factor in the CD4+CD26+ H9 Th1 cells. Evogliptin or sitagliptin treatment potently inhibited mDPP4 activity in a dose-dependent manner but did not affect either the cytokine profile or cell viability in PWM-activated CD4+CD26+ H9 Th1 cells. These results suggest that, following immune stimulation, Th1 cell signaling pathways for cytokine expression function normally after treatment with evogliptin or sitagliptin, which efficiently inhibit mDPP4 enzymatic activity in Th1 cells.
Human cytochromes P450 (GYP) 2A6 and 2E1 are of great interest because of their important roles in the oxidation of numerous drugs and carcinogens. Bacterial expression systems, especially Escherichia coli cells, have been widely used for the production of various GYP enzymes in order to obtain high yield of proteins. The expression methods usually employ longer culture time (30-72 h) at lower temperature (usually under $30^{\circ}C$). Expression levels of GYPs 2A6 and 2E1 at $37^{\circ}C$ were compared to those at $28^{\circ}C$, which is a usual temperature used in most bacterial expression systems for human GYP expression. Within 18 h the expression levels of GYPs 2A6 and 2E1 reached up to 360 and 560 nmol per liter culture at $37^{\circ}C$, respectively, which are compatible with those of 36 h culture at $28^{\circ}C$. The activities of GYPs expressed at $37^{\circ}C$ were also comparable to those expressed at $28^{\circ}C$. The present over-expression system can be useful for rapid production of large amounts of active human GYPs 2A6 and 2E1 in E. coli.
Park, Yoon-Jong;Ryu, Jae-Min;Na, Han-Heom;Jung, Hyun-Suk;Kim, Bokhye;Park, Jin-Sung;Ahn, Byung-Soo;Kim, Keun-Cheol
대한약침학회지
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제24권2호
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pp.68-75
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2021
Objectives: The hair follicle is composed of more than 20 kinds of cells, and mesoderm derived dermal papilla cells and keratinocytes cooperatively contribute hair growth via Wnt/β-catenin signaling pathway. We are to investigate β-catenin expression and regulatory mechanism by CBD in alopecia hair tissues and dermal papilla cells. Methods: We performed structural and anatomical analyses on alopecia patients derived hair tissues using microscopes. Pharmacological effect of CBD was evaluated by β-catenin expression using RT-PCR and immunostaining experiment. Results: Morphological deformation and loss of cell numbers in hair shaft were observed in alopecia hair tissues. IHC experiment showed that loss of β-catenin expression was shown in inner shaft of the alopecia hair tissues, indicating that β-catenin expression is a key regulatory function during alopecia progression. Consistently, β-catenin expression was decreased in testosterone or PMA treated dermal papilla cells, suggesting that those treatments are referred as a model on molecular mechanism of alopecia using dermal papilla cells. RT-PCR and immunostaining experiments showed that β-catenin expression was decreased in RNA level, as well as decreased β-catenin protein might be resulted from ubiquitination. However, CBD treatment has no changes in gene expression including β-catenin, but the decreased β-catenin expression by testosterone or PMA was restored by CBD pretreatment, suggesting that potential regulatory effect on alopecia induction of testosterone and PMA. Conclusion: CBD might have a modulating function on alopecia caused by hormonal or excess of signaling pathway, and be a promising application for on alopecia treatment.
Petri nets have been introduced as a powerful analyzing and design tool for the discrete systems such as sequential control systems. However, one of the important problems in its applications is that the model can be analyzed hardly when we deal with large scale systems because of increase of the number of Petri net components. To overcome this problem, some methods for dividing or reducing of Petri net have been suggested. In this paper, an approach for hierarchical expression of Petri net based on Sequential function Chart(SFC) and Bottom Up oriented Mehodology(BUM) is proposed. Especially, some definitions and rules are defined in order to divide and compose sub Petri nets. A measuring tank system will be described as a typical kind of discrete systems and modeled by some sub Petri nets based on the SFC and BUM by the proposed method in this paper.
Polydnavirus genome is segmented and dispersed on host wasp chromosome. After replication, the segments form double- stranded circular DNAs and embedded in viral coat proteins. These viral particles are delivered into a parasitized host along with parasitoid eggs. A serine-rich protein (SRP) is predicted in a polydnavirus, Cotesia plutellae bracovirus (CpBV), genome in its segment no. 33 (CpBV-S33), creating CpBV-SRP1. This study explored its expression and physiological function in the diamondback moth, Plutella xylostella, larvae parasitized by C. plutellae. CpBV-SRP1 encodes 122 amino acids with 26 serines and several predicted phosphorylation sites. It is persistently expressed in all tested tissues of parasitized P. xylostella including hemocyte, fat body, and gut. Its physiological function was analyzed by injecting CpBV-S33 and inducing its expression in nonparasitized P. xylostella by a technique called SERI (segment expression and RNA interference). The expression of CpBV-SRP1 significantly impaired the spreading behavior and total cell count of hemocytes of treated larvae. Subsequent RNA interference of CpBV-SRP1 rescued the immunosuppressive response. This study reports the persistent expression of CpBV-SRP1 in a parasitized host and its parasitic role in suppressing the host immune response by altering hemocyte behavior and survival.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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