In this study, the metabolic activities of five strains of Pediococcus spp., in terms of the quantities they produced of lactic acid, hydrogen peroxide, exopolysaccharides, and proteolytic activity, were determined. Lactic acid levels produced by these strains were found to be in the range of 2.5-5.6 mg/ml. All strains produced hydrogen peroxide. The P. pentosaceus Z13P strain produced the maximum amount (0.25 mg/ml) of proteolytic activity. Exopolysaccharide (EPS) production by the Pediococcus strains during growth in MRS (de Man, Rogosa, and Sharpe) medium was in the range 25-64 mg/l. The susceptibility of 10 different antibiotics against these strains was also tested. All strains were found to be resistant to amoxicillin, gentamicin, and vancomycin. Antimicrobial effects of the Pediococcus spp. on pathogens were also determined by an agar diffusion method. All of the strains were able to inhibit L. monocytogenes. The tolerance of the strains to low pH, their resistance to bile salts of strains, and their abilities to autoaggregate and coaggregate with L. monocytogenes were also evaluated.
Chung, In-Young;Choi, Kelly B.;Heo, Yun-Jeong;Cho, You-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.7
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pp.1227-1234
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2008
Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic human pathogen that produces and secretes exopolysaccharides (EPS), in which cells are embedded to form a highly organized community structure called biofilm. Here, we characterized the role of cyclic diguanylate (c-di-GMP) and EPS (PEL) overproduction in the wspF mutant phenotypes of P. aeruginosa PA14 (wrinkly appearance, hyperadherence, impaired motilities, and reduced virulence in acute infections). We confirmed that the elevated c-di-GMP level plays a key role in all the wspF mutant phenotypes listed above, as assessed by ectopic expression of a c-di-GMP-degrading phophodiesterase (PvrR) in the wspF mutant. In contrast, PEL EPS, which is overproduced in the wspF mutant, was necessary for wrinkly appearance and hyperadherence, but not for the impaired flagellar motilities and the attenuated virulence of the wspF mutant. These results suggest that c-di-GMP affects flagellar motility and virulence, independently of EPS production and surface adherence of this bacterium.
Inflammation is a biodefense mechanism that provides protection against painful conditions such as inflammatory bowel disease, other gastrointestinal problems, and irritable bowel syndrome. Paraprobiotics have probiotic characteristics of intestinal modulation along with merits of safety and stability. In this study, heat-killed Lactiplantibacillus plantarum KU15122 (KU15122) was investigated for its anti-inflammatory properties. KU15122 was subjected to heat-killed treatment for enhancement of its safety, and its concentration was set at 8 log CFU/mL for conducting different experiments. Nitric oxide production was most remarkably reduced in the KU15122 group, whereas it was increased in the LPS-treated group. In RAW 264.7 cells, KU15122 inhibited the expression of inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, interleukin (IL)-1β, IL-6, and tumor necrosis factor-α. ELISA revealed that among the tested strains, KU15122 exhibited the most significant reduction in PGE2, IL-1β, and IL-6. Moreover, KU15122 inhibited various factors involved in the nuclear factor-kappa B, activator protein-1, and mitogen-activated protein kinase pathways. In addition, KU15122 reduced the generation of reactive oxygen species. The anti-inflammatory effect of KU15122 was likely attributable to the bacterial exopolysaccharides. Conclusively, KU15122 exhibits anti-inflammatory potential against inflammatory diseases.
Objective: The aim of this study was to characterize the exopolysaccharides (EPS)-producing lactic acid bacteria from Taiwanese ropy fermented milk (TRFM) for developing a clean label low-fat fermented milk. Methods: Potential isolates from TRFM were selected based on the Gram staining test and observation of turbid suspension in the culture broth. Random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction, 16S rRNA gene sequencing, and API CHL 50 test were used for strain identification. After evaluation of EPS concentration, target strains were introduced to low-fat milk fermentation for 24 h. Fermentation characters were checked: pH value, acidity, viable count, syneresis, and viscosity. Sensory evaluation of fermented products was carried out by 30 volunteers, while the storage test was performed for 21 days at 4℃. Results: Two EPS-producing strains (APL15 and APL16) were isolated from TRFM and identified as Lactococcus (Lc.) lactis subsp. cremoris. Their EPS concentrations in glucose and lactose media were higher than other published strains of Lc. lactis subsp. cremoris. Low-fat fermented milk separately prepared with APL15 and APL16 reached pH 4.3 and acidity 0.8% with a viable count of 9 log colony-forming units/mL. The physical properties of both products were superior to the control yogurt, showing significant improvements in syneresis and viscosity (p<0.05). Our low-fat products had appropriate sensory scores in appearance and texture according to sensory evaluation. Although decreasing viable cells of strains during the 21-day storage test, low-fat fermented milk made by APL15 exhibited stable physicochemical properties, including pH value, acidity, syneresis and sufficient viable cells throughout the storage period. Conclusion: This study demonstrated that Lc. lactis subsp. cremoris APL15 isolated from TRFM had good fermentation abilities to produce low-fat fermented milk. These data indicate that EPS-producing lactic acid bacteria have great potential to act as natural food stabilizers for low-fat fermented milk.
Bramhachari P.V.;Kishor P.B. Kavi;Ramadevi R.;Kumar Ranadheer;Rao, B. Rama;Dubey Santosh Kumar
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.1
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pp.44-51
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2007
Marine bacterial strains were isolated trom coastal regions of Goa and screened for the strains that produce the highest amount of mucous expolysaccharide (EPS). Our screening resulted in the identification of the strain Vibrio furnissii VB0S3 (hereafter called VB0S3), as it produced the highest EPS in batch cultures during the late logarithmic growth phase. The isolate was identified as VB0S3 based on morphological and biochemical properties. Growth and EPS production were studied in mineral salts medium supplemented with NaCl (1.5%) and glucose (0.2%). The exopolymer was recovered from the culture supernatant by using three volumes of cold ethanol precipitation and dialysis procedure. Chemical analyses of EPS revealed that it is primarily composed of neutral sugars, uronic acids, and proteins. Fourier-transform infrared (FT-IR) spectroscopy revealed the presence of carboxyl, hydroxyl, and amide groups, which correspond to a typical heteropolymeric polysaccharide, and the EPS also possessed good emulsification activity. The gas chromatographic analysis of an alditol-acetate derivatized sample of EPS revealed that it was mainly composed of galactose and glucose. Minor components found were mannose, rhamnose, fucose, ribose, arabinose, and xylose. EPS was readily isolated from culture supernatants, which suggests that the EPS was a slime-like exopolysaccharide. This is the first report of exopolysaccharide characterization that describes the isolation and characterization of an EPS expressed by Vibrio surnissii strain VB0S3. The results of the study contribute significantly and go a long way towards an understanding of the correlation between growth and EPS production, chemical composition, and industrial applications of the exopolysaccharide in environmental biotechnology and bioremediation.
Background: Biofilms, such as those from Staphylococcus epidermidis, are generally insensitive to traditional antimicrobial agents, making it difficult to inhibit their formation. Although quercetin has excellent antibiofilm effects, its clinical applications are limited by the lack of sustained and targeted release at the site of S. epidermidis infection. Objectives: Polyethylene glycol-quercetin nanoparticles (PQ-NPs)-loaded gelatin-N,O-carboxymethyl chitosan (N,O-CMCS) composite nanogels were prepared and assessed for the on-demand release potential for reducing S. epidermidis biofilm formation. Methods: The formation mechanism, physicochemical characterization, and antibiofilm activity of PQ-nanogels against S. epidermidis were studied. Results: Physicochemical characterization confirmed that PQ-nanogels had been prepared by the electrostatic interactions between gelatin and N,O-CMCS with sodium tripolyphosphate. The PQ-nanogels exhibited obvious pH and gelatinase-responsive to achieve on-demand release in the micro-environment (pH 5.5 and gelatinase) of S. epidermidis. In addition, PQ-nanogels had excellent antibiofilm activity, and the potential antibiofilm mechanism may enhance its antibiofilm activity by reducing its relative biofilm formation, surface hydrophobicity, exopolysaccharides production, and eDNA production. Conclusions: This study will guide the development of the dual responsiveness (pH and gelatinase) of nanogels to achieve on-demand release for reducing S. epidermidis biofilm formation.
The polysaccharide isolated from Phellinus species has been known as a folk remedy, including antitumor and immune-stimulating activities. However, there are lacks of knowledge about mycelial growth and exopolysaccharide (EH) production in its submerged culture. We investigated the optimal conditions on mycelial growth and EPS production in Phellinus baumii. The optimal temperature and initial pH for mycelial growth and EPS production in shake flask culture of P. baumii were proved to be 3$0^{\circ}C$ and pH 5.0, respectively. In case of carbon source, cellobiose and maltose were highly efficient for mycelial growth and fructose and mannitol were also relatively favorable for EPS production. Yeast extract was the most suitable nitrogen source for mycelial growth and EPS production. The composition of optimal culture medium was determined to be fructose 20 g/L, yeast extract 20 g/L, and $CaCl_2$ 0.55 g/L, respectively. Under the optimal culture condition, the maximum mycelial biomass and EPS achieved in a 5-L stirred-tank fermenter were 17.43 g/L and 3.6 g/L, respectively. It was found that the EPS was a glycoprotein onsisted of mainly arginine (14.1%) and glycine (12.0 %) in protein moiety and mainly mannose (48.7%) and arabinose (38.4%) in carbohydrate moiety.
The production of GABA was optimized by co-cultivation of immobilized Lactobacillus plantarum K154 (ILK) with Ceriporia lacerata cultures. The mycelial culture of C. lacerata was performed in a defined medium containing 3% glucose, 3% soybean flour, and 0.15% $MgSO_4$ in a submerged condition for 7 days at $25^{\circ}C$, resulting in the production of 29.7 g/L mycelia, 3.1 g/L exopolysaccharides, 2% (w/w) ${\beta}$-glucan, 68.96 unit/mL protease, and 10.37 unit/mL ${\alpha}$-amylase. ILK in C. lacerata culture showed viable cell counts of $3.13{\time}10^9CFU/mL$ for immobilized cells and $1.48{\time}10^8CFU/mL$ for free cells after 1 day. GABA production in the free and immobilized cells was 9.96 mg/mL and 6.30 mg/mL, respectively, after 7 days. A recycling test of ILK in the co-fermentation was consequently performed five times at $30^{\circ}C$ for 15 days, resulting in the highest production of GABA. GABA could also be efficiently overproduced by co-cultivation with the produced polysaccharides, ${\beta}$-glucan, peptides, and probiotics.
Lee, Youngsuk;Seol, Jeongman;Jeong, Deokyeol;Kim, Soo Rin
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.44
no.3
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pp.229-235
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2016
Korea has a long history of brewing traditional rice wine using a authentic starter culture called nuruk, which contains natural microbial flora. Because rice wine is consumed fresh without filtration, its viable cells contribute to the biological activities of the wine. In numerous studies, microbial strains isolated from rice wine have been screened for their functionalities, which were mainly probiotic properties and antimicrobial activities. Indeed, some lactic acid bacteria (LAB) were confirmed to have strong probiotic activities as well as other health-promoting effects. Moreover, some of the isolated probiotic strains produced functional compounds, such as exopolysaccharides and γ-aminobutyric acid. For antimicrobial activities, some LAB and yeast strains were identified to produce bacteriocins and killer toxins, respectively, with significantly broad spectrum of antimicrobial activity. These functional strains originating from traditional rice wine and their metabolites can be used directly for the production of value-added food products.
Harmful algal blooms (HABs or red tides), caused by uncontrolled proliferation of marine phytoplankton, impose a severe environmental problem and occasionally threaten even public health. We sequenced the genome of an EPS-producing marine bacterium Hahella chejuensis that produces a red pigment with the lytic activity against red-tide dinoflagellates at parts per billion level. H. chejuensis is the first sequenced species among algicidal bacteria as well as in the order Oceanospirillales. Sequence analysis indicated a distant relationship to the Pseudomonas group. Its 7.2-megabase genome encodes basic metabolic functions and a large number of proteins involved in regulation or transport. One of the prominent features of the H. chejuensis genome is a multitude of genes of functional equivalence or of possible foreign origin. A significant proportion (${\sim}23%$) of the genome appears to be of foreign origin, i.e. genomic islands, which encode genes for biosynthesis of exopolysaccharides, toxins, polyketides or non-ribosomal peptides, iron utilization, motility, type III protein secretion and pigment production. Molecular structure of the algicidal pigment was determined to be prodigiosin by LC-ESI-MS/MS and NMR analyses. The genomics-based research on H. chejuensis opens a new possibility for controlling algal blooms by exploiting biotic interactions in the natural environment and provides a model in marine bioprospecting through genome research.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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