One hundred and sixty nine Escherichia (E.) coli strains isolated from fecal samples of aquatic birds in Geumho river basin and Dalseong park were tested by agar dilution method to determine their susceptibility patterns to 14 antimicrobial agents. The distribution of tetracycline resistance determinants (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) were also examined by PCR in 76 tetracycline-resistant ($TC^r$) E. coli isolates. The high resistance was observed in tetracycline, cephalothin and ampicillin (45.0~36.7%). Resistance of E. coli isolates derived from Dalseong park to tetracycline, cephalothin, ampicillin and streptomycin (65.7~44.8%) were significantly higher than those isolated from Geumho river basin (31.4~14.7%). About seventy percent (70.4%) of the strains isolated were resistant to one or more drugs tested. Thirty (39.5%) of 76 $TC^r$ E. coli isolates which were resistant to one or more drugs transferred all or a part of their resistance patterns to the recipient strain of E.coli J53 by conjugation. All of $TC^r$ E. coli isolates contained at least one or more of 5 tet genes examined. The most common genes found in these isolates were tetA (60.6%) and followed by tetB (7.9%) and tetC (1.3%). However, tetD and tetE were not found in any of the isolates tested. Twenty one (27.6%) of $TC^r$ E. coli isolates had two determinants, tetA/tetB (20 strains), tetA/tetC (1 strain). And two strains (2.6%) contained three determinants (tetA/tetB/tetC).
Mergulhao;Filipe J.M.;Gabriel A. Monteiro;Joaquim M.S. Cabral;M. Angela Taipa
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권1호
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pp.1-14
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2004
More than twenty years have passed since the approval of the first recombinant DNA product for therapeutic use (recombinant human insulin, 1982). However, the biotechnology industry is still facing a shortage of manufacturing capacity due to the increasing demand of therapeutic proteins. This demand has prompted the search for a growing number of biological production systems but, nevertheless, the Gram-negative bacterium Escherichia coli remains one of the most attractive production hosts. This review highlights the most important features and developments of plasmid vector design, emphasizing the different reported strategies for improving the expression and secretion of heterologous proteins using the cellular machinery of E. coli.
무화과의 성숙정도에 따른 항균활성을 검색하고자 메탄올과 용매계통분획물에 대하여 8종의 식중독균(Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Escherichia coli O157:H7, Yersinia enterocolitica, Salmonella enteritidis, Vibrio parahaemolyticus, Salmonella typhimurium, Escherichia coli)에 대한 성장억제 효과를 검색하였다. 미숙, I, II기 및 성숙 무화과의 메탄올추출물은 10mg/mLshd도에서 L. monocytogenes, V. parahaemolyticus, E. coli O157:H7과 E. coli에 대해 강한 저해활성을 나타내었다. (중략)
An ozone-sensitive mutant of Escherichia coli strain B, MQ 1844 is described. Its properties, including high sensitivity to ozone and radiation, inducible filamentation, extensive DNA degradation and impaired DNA synthesis following ozonation, are attributable to a mutation in ozrB, a gene which is cotransducible with malB. Based on differences in phenotypic expression as well as on the particular location of this gene on the bacterial chromosome, ozrB appears as distinct from the other ozone-or radiation-sensitivity genes previously described.
재조합 E. coli를 이용한 MCL-PHA의 생산에서 fatty acid pathway로부터 PHA 생합성 전구체 물질들이 만들어진다는 사실과 함께 이에 관여하는 enzymes이 밝혀지고 있다. 본 논문에서는 protein homology search로부터 탐색된 paaG와 ydbU genes의 PHA 생합성에서의 역할을 확인하기 위하여 paaG와 ydbU gene이 각각 knock-out된 mutant E. coli strains 를 제작하였다. 제작된 mutant E. coli들은 모균주들보다 낮은 PHA 농도와 함량을 가졌으며, 이러한 결과들로부터 paaG와 ydbU는 fatty acid pathway에서 PHA synthesis의 전구체 물질들을 공급한다는 사실을 확인하였다. 또한, 새로운 FadB homologous enzyme YgfG를 탐색하였으며, ygfG gene이 overexpression된 균주와 ygfG mutant를 제작하여 PHA 합성을 실험한 결과 ygfG도 paaG와 ydbU와 유사한 역할을 한다는 사실을 밝혔다. 이러한 연구결과들은 E. coli에서의 MCL-PHA 단량체들의 합성 경로를 확인하여 효과적인 PHA 생산 균주를 제작할 수 있게 할 것이다.
The present study was carried out to investigate the biochemical characteristics, antibiotic susceptibility and toxin(ST, LT, VT1.2 type) production test of 60 Escherichia coli isolated from diseased domestic animals in southern area of Kyungbuk province from April to December 1997. 1. The biochemical and cultural reaction were consistent with the classification criteria of Edwards and Ewing. 2. In antibiotic susceptibility test, 60 E coli showed highly susceptible to CL(96.7%), XNL(86.7%), AN(81.7%), SXT(61.7%), Lin(55%), GM(53.3%), KM(41.7%), N(41.7%), ENR(40%), AM(40%), CF(30%), 5(13.3%) and Te(11.7%), in order. 3. Sixty E coli isolates were multiful resistant to seven or more antibiotics incombination. 4. Three strains for 60 E coli were detected heat-labile enterotoxin(LT) and that's titers were 2, 8 and 16, respectively.
포항 선형 가속기로부터 얻은 ultrasoft X-선이 대장균의 돌연변이 유도와 plasmid DNA 변이에 주는 영향을 알아보았다. 빔을 조사함에 따라 supercoil 형태의 plasmid DNA가 relaxed 형태로 변하고, 그후 선형으로 변해 감을 확인하였다. 빔을 조사한 plasmid DNA를 E. coli에 형질전환하여 $\beta$-galactosidase의 돌연변이 균을 분리하였고, 빔을 직접 조한 E. coli균으로부터도 $\beta$-galactosidase의 돌연변이 균을 얻었다. 변이된 plasmid DNA와 변이 대장균들의 plasmid DNA의 염기 부분을 변화를 확인하였으며 이 빔에 의해 주로 변이가 일어나는 부분이 있음을 알았다.
Secretion of Serratia marcescens nuclease by E. coli harboring pNUC4 was investigated. 29.2, 54.2 and 16.6% of total nuclease were observed in culture medium, periplasm, and cytoplasm of E. coli, respectively. To investigate the secretion mechanism of Serratia nuclease by E. coli, secretion kinetics of nuclease was examined in the presences of sodium azide, and energy metabolism inhibitor; procaine, an exoprotein processing inhibitor; and chloramphenicol, a protein synthesis inhibitor. In the presence of sodium azide, periplasmic unclease was gradually decreased and the extracellular nyclease was linearly increased according to the incubation time. Similar results were obtained in presences of procaine and chloramphenicol. From these results, we concluded that two transport processes are involved in nuclease secretion: secretion of nuclease through the inner membrane is occurred by an energy-dependent process and probably requiring precusor processing: secretion of nuclease through outer membrane does not require energy, de novo protein synthesis, and precursor processing.
The actinidin (EC 3.4.22. 14) found in kiwifruit is a cysteine protease. In order to obtain the actinidin gene from the Chinese wild kiwifruit, primers were designed on the basis of the actinidin gene of Actinidia deliciosa, the New Zealand kiwifruit. The 1.2 kb DNA fragment was acquired from the total RNAs of Chinese wild kiwifruit via reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and its DNA sequence was analyzed. Its sequence was determined to share 98.4% homology with the actinidin gene of A. deliciosa. In order to verity the actinidin gene isolated from the Chinese wild kiwifruit in Escherichia coli, the mature gene was amplified via PCR and expressed in E. coli under the control of the T7lac promoter. The actinidin was expressed in E. coli as inclusion bodies, which were solubilized with urea and refolded. The protease activity of the refolded protein was approximately twice as high as that of E. coli BL2l (DE3).
This study was aimed to investigate occurrence and the antimicrobial resistance of Escherichia coli isolates obtained from the feces of wild birds in Daegu. In total, 98 E. coli isolates (17.9%) were obtained from 547 fecal samples of wild birds. The E. coli carried by the birds showed a relatively high rate of antimicrobial resistance to tetracycline (27.6%) and ampicillin (21.4%). Drug resistance of the isolates to the others (penicillins, cephems, carbapenems, aminoglycosides, quinolones, sulfonamides and phenicols) resulted in the rates less than 20%, and all isolates were susceptible to imipenem, ciprofloxacin, cefotetan, and amikacin. Approximately, 45% E. coli among the isolates were resistant to one or more drugs tested. The higher rate of tetracycline resistance led us to determine the prevalence of the tet genes (tetA, tetB, tetC, tetD and tetE) in the tetracycline-resistant E. coli isolates by using PCR. All isolates of the tetracycline-resistant E. coli contained at least one or more of these tet genes examined. The most prevalent one was tetA (59.3%), and followed by tetB (7.4%) when tested with the selected 5 tet genes. Except tetA and tetB, however, the remaining tet genes (tetC, tetD, and tetE) tested were not found in this study. Nine isolates among the tetracycline-resistant E. coli contained the two (tetA and tetB) determinants of tetracycline resistance, simultaneously.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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