• 제목/요약/키워드: Enterobacter sp. S45

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Enterobacter sp. S45에 의한 Inulin fructotransferase의 생산 (Production of Inulin Fructotransferase (Depolymerizing) from Enterobacter sp. S45)

  • 강수일;김수일
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제21권1호
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    • pp.36-40
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    • 1993
  • 토양에서 inulin으로부터 di-D-fructofuranose dianhydride(DFA)를 생산하는 inulin fructotransferase를 생산하는 균주로 Enterobacter sp. S45를 선발, 분리하였다. 본 효소에 의하여 생산되는 DFA는 $^13C-nmr$과 HPLC로 분석한 결과 fructose 두 분자가 $\beta$ 1,2': $\alpha$ 2,3' 결합을 한 DFA III로 동정되었다. 본 균주는 탄소원으로 inulin, 유기질소원으로 corn step liquor, 무기질소원으로 $NH_4H_2P0_4$를 사용할 때 효소생산이 가장 많았으며 이 조건하에서 72시간 배양으로 최대 효소생산을 보였다. 균 배양중 배양액내에 DFA III가 생성되었다가 소멸되는 것으로 보아 균체내에 DFAIII를 분해, 이용하는 효소가 존재한다고 추정되었다.

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Enterobacter sp. S45 생산 inulin fructotransferase의 정제 및 특성 (Purification and properties of inulin fructotransferase (Depolymerizing) from Enterobacter sp. S45)

  • 강수일;김수일
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제36권2호
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    • pp.105-110
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    • 1993
  • Enterobacter sp. S45로부터 inulin fructotransferase를 생산, 정제하고 효소적 특성을 조사하였다. 배양상징액의 $0.4{\sim}0.8$ 포화$(NH_4)_2SO_4$ 침전물인 조효소는 DEAE-cellulose column chromatography 및 fast protein liquid chromatography로 정제하였으며 효소의 회수율은 0.9%였고 약 148배의 정제도를 보였다. 정제된 효소는 전기영동상으로 단일 band였으며 분자량은 SDS-PAGE에 의해 42,800으로 나타났다. 이 효소의 최적 pH는 5.5, 최적 온도는 $50^{\circ}C$였으며 $Mg^{2+}$이온은 효소활성을 30% 증가시키나 $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$$Fe^{3+}$이온들은 활성을 강력히 저해하였다. Inulin에 대한 km 값은 1.4 mM, Vmax 값은 $0.196\;{\mu}mole/min$이었다. 본 효소는 inulin을 fructose 말단으로부터 fructose 두 분자씩 절단, 환상형인 DFA를 생성하며, 그 결과 inulin 분해산물인 GF, $GF_2$, $GF_3$, $GF_4$ 등도 검출되었다. 중합도에 따른 효소활성을 조사해 본 결과 이 효소는 중합도 $4(GF_3)$ 이상의 fructo 올리고당에만 작용하여 $GF_3$는 DFA III와 GF로, $GF_4$는 DFA III와 $GF_2$로 변환시켰다. 또한 본 효소는 sucrose, raffinose 및 melezitose를 기질로서 이용하지 못하므로 invertase 및 ${\alpha}-glucosidase$ 활성이 없는 것으로 나타났다.

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Production of Hydrogen and Volatile Fatty Acid by Enterobacter sp. T4384 Using Organic Waste Materials

  • Kim, Byung-Chun;Deshpande, Tushar R.;Chun, Jongsik;Yi, Sung Chul;Kim, Hyunook;Um, Youngsoon;Sang, Byoung-In
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제23권2호
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    • pp.189-194
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    • 2013
  • In a study of hydrogen-producing bacteria, strain T4384 was isolated from rice field samples in the Republic of Korea. The isolate was identified as Enterobacter sp. T4384 by phylogenetic analysis of 16S rRNA and rpoB gene sequences. Enterobacter sp. T4384 grew at a temperature range of $10-45^{\circ}C$ and at an initial pH range of 4.5-9.5. Strain T4384 produced hydrogen at 0-6% NaCl by using glucose, fructose, and mannose. In serum bottle cultures using a complete medium, Enterobacter sp. T4384 produced 1,098 ml/l $H_2$, 4.0 g/l ethanol, and 1.0 g/l acetic acid. In a pH-regulated jar fermenter culture with the biogas removed, 2,202 ml/l $H_2$, 6.2 g/l ethanol, and 1.0 g/l acetic acid were produced, and the lag-phase time was 4.8 h. Strain T4384 metabolized the hydrolysate of organic waste for the production of hydrogen and volatile fatty acid. The strain T4384 produced 947 ml/l $H_2$, 3.2 g/l ethanol, and 0.2 g/l acetic acid from 6% (w/v) food waste hydrolysate; 738 ml/l $H_2$, 4.2 g/l ethanol, and 0.8 g/l acetic acid from Miscanthus sinensis hydrolysate; and 805 ml/l $H_2$, 5.0 g/l ethanol, and 0.7 g/l acetic acid from Sorghum bicolor hydrolysate.

Sediment에서의 전기활성 박테리아 분포 특성 (Distribution of Electrochemically Active Bacteria in the Sediment)

  • 손형식;손희종;김미아;이상준
    • 대한환경공학회지
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    • 제32권12호
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    • pp.1094-1101
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    • 2010
  • 낙동강, 회동 및 기장에서 채집한 sediment의 미생물 군집을 FISH 분석을 통하여 조사한 결과, ${\alpha}$ 그룹, Acidobacter 그룹 및 Cyanobacter 그룹의 분포비율이 가장 높았으며 전체적으로 서로 유사한 분포 특성을 나타내었다. 각각의 sediment를 접종한 MFC 농화배양 이후의 coulombic yield는 낙동강, 회동 및 기장의 경우 각각 0.64 C, 0.50 C, 0.61 C로 나타났으며, 농화배양 완료 후의 미생물 군집분포는 ${\beta}$-Proteobacteria, ${\gamma}$-Proteobacteria, Acidobacter 그룹 및 Firmicutes 그룹이 농화배양 전보다 각각 45~90%, 50~90%, 40~80% 및 45~125% 정도 생체량이 증가한 것으로 나타났다. 농화배양이 끝난 후 16S rDNA를 이용한 미생물 동정결과에서, 낙동강 sediment를 주입한 MFC의 경우는 ${\alpha}$-Proteobacteria의 속하는 Roseomonas sp., Azospillum sp.와 ${\gamma}$-Proteobacteria의 Frateuria sp., Dyella sp., Enterobacter sp.와 Deinococci 그룹의 Deinococcus sp.가 동정되었고, 기장 sediment는 ${\alpha}$-Proteobacteria의 Azospillum sp.와 ${\beta}$-Proteobacteria의 Delftia sp., Ralstonia sp.와 ${\gamma}$-Proteobacteria의 Klebsiella sp. 와 Deinococci 그룹의 Deinococcus sp.가 동정되었으며, 회동 sediment는 ${\gamma}$-Proteobacteria의 Pseudomonas sp., Klebsiella sp.와 Deinococci 그룹의 Deinococci sp.와 Actinobacteria 그룹의 Leifsonia sp.와 Bacilli 그룹의 Bacillus sp.가 동정되었다.

Enterobacter sp. YB-46의 myo-Inositol dehydrogenase 유전자 클로닝과 특성분석 (Molecular Cloning and Characterization of myo-Inositol Dehydrogenase from Enterobacter sp. YB-46)

  • 박찬영;김광규;윤기홍
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제46권2호
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    • pp.102-110
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    • 2018
  • myo-Inositol (MI)을 대사하여 다른 물질로 전환하는 미생물을 과수원 토양으로부터 분리하였다. 분리균 YB-46은 유일한 탄소원으로 MI이 첨가된 배지에서 성장하였고 16S rDNA 염기서열에 따라 Enterobacter 속의 균주로 추정되었다. Fosmid pCC1FOS 벡터를 사용하여 제조된 거대 유전체 은행으로부터 MI을 미지의 대사 물질로 전환하는 Escherichia coli 형질전환주를 선발하였다. 이로부터 플라스미드를 분리하고 삽입된 유전자의 일부 염기서열을 결정한 결과 336 아미노 잔기로 구성된 myo-inositol dehytrogenase (IolG)를 암호화하는 iolG 유전자가 발견되었다. 분리균 YB-46의 IolG는 E. aerogenes와 Bacillus subtilis의 IolG와 약 50% 수준의 상동성을 보였다. 카르복실 말단에 hexahistidine이 연결되도록 제조한 His-tagged IoG (HtIolG)의 유전자를 재조합 대장균에서 발현하여 균체 파쇄액으로부터 HtIolG를 정제하였다. 정제된 HtIolG는 $45^{\circ}C$와 pH 10.5에서 최대 활성을 보였고 MI과 D-glucose에 대한 활성이 가장 높았으며 D-chiro-inositol, D-mannitol 및 D-xylose에도 90% 이상의 활성을 보였다. 최적 반응조건에서 MI을 기질로 하여 반응 동력학적 계수를 측정한 결과 $K_m$$V_{max}$가 1.83 mM과 $0.724{\mu}mol/min/mg$로 확인되었다. HtIolG의 활성은 $Zn^{2+}$에 의해 1.7배 증가하였으며, $Co^{2+}$와 SDS에 의해서는 크게 감소하였다.

DGGE 방법과 배양법을 이용한 강원지역 전통 발효 청국장에서 미생물의 다양성 분석 (Denaturing Gradient Gel Electrophoresis and Culture-based Analysis of the Bacterial Community in Cheonggukjang, a Korean Traditional Fermented Soybean Food from Gangwon Province)

  • 홍성욱;임인규;김용우;신승미;정건섭
    • 한국식품과학회지
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    • 제45권4호
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    • pp.515-520
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    • 2013
  • 전통적인 방법으로 제조한 청국장과 볏짚시료로부터 배양방법과 비배양방법인 DGGE를 이용한 청국장의 발효미생물 군집을 분석하였다. 배양방법에서는 미륵산농원의 볏짚과 청국장 시료에서 P. agglomerans (65%)와 B. subtilis (60%)가 우점미생물로 나타내었고, 흥업토속 청국장의 볏짚과 청국장 시료에서는 B. amyloliquefaciens (57%와 52%)가 우점미생물로 확인하였다. DGGE 분석에서는 미륵산농원의 볏짚과 청국장 시료에서 P. agglomerans (Band intensity 20.6%)와 B. subtilis (Band intensity 25.7%)가 우점미생물로 나타내었고 흥업토속 청국장의 볏짚과 청국장 시료에서는 B. amyloliquefaciens (Band intensity 27.3%, 26.4%)가 우점미생물로 확인하였다. 그 외에도 볏짚에서는 Pantoea sp. Enterococcus durans, Enterobacter sp, P. ananatis, Bacillus sp., Rhodococcus sp. Pseudomonas fulva, Acinetobacter sp., B. licheniformis, B. amyloliquefaciens 등의 미생물을 확인하였고 청국장에서는 B. licheniformis, B. subtilis, Bacillus sp., B. circulans, Acinetobacter sp. 등의 미생물을 확인이 되었으며, 비배양 방법을 이용한 청국장 발효미생물 균총 조사는 배양이 불가능한 미생물을 확인할 수 있었다.

음식물 쓰레기 분해에 대한 고온성 미생물의 영향 (Effect of Thermophilic Bacteria on Degradation of Food Wastes)

  • 이외수;정지현;박유미;설경조;김사열
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.363-367
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    • 2006
  • Food wastes were decomposed into the Mugri (Isung Engineering, Korea), a food waste reduction machine, with adding sawdust of cryptomeria. Degradation effects were better when the machine worked at over 45$^{\circ}C$ than those at the lower temperature. Thermophilic bacteria were isolated from cryptomeria sawdust and the food waste products degraded by the machine. The isolates from cryptomeria sawdust were classified into 3 genera (Acinetobacter baumannii, Enterobacter sp. and Erwinia cypripedii) and almost all the isolates from the degraded products were partially identified as Bacillus sp. by 16S rDNA sequence analysis. The isolated thermophilic bacteria showed degradative enzyme activities. In the case of addition of the 30 thermophilic bacteria into the machine, degradation rate of food wastes was almost twice as high with increasing process temperature up to 6$^{\circ}C$.

우리나라에 시판(市販)되고 있는 각종가축사료(各種家畜飼料)에 대(對)한 위생학적(衛生學的) 연구(硏究) -제1보(第一報) 유독(有毒)곰팡이에 의(衣)한 피해(被害) 및 분포상황(分布狀況) 조사(調査)- (Hygienic Studies on the Various Commercial Feedstuffs in Korea -Part 1 Survey on Injury by Toxic Fungi and their Microflora-)

  • 이계호;박성오
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제25권3호
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    • pp.189-196
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    • 1982
  • 우리나라에 유통(流通)되고 있는 시판사료(市販飼料)(수집시료(蒐集試料) 72종(種)) 중(中) 미생물분포(微生物分布)와 수분함량(水分含量) 그리고 곰팡이 독소생성(毒素生成)에 대(對은)하여 검토(檢討)하고 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 시판사료(市販飼料) 72종(種)의 수분함량(水分合量) $11.2{\sim}l5%$ 범위이었다. 총세균수(總細菌數)는 1g 당(當) $1.8{\times}10^2{\sim}2.4{\times}10^6$개(個)이었다. 대장균군수(大腸菌群數)는 1g당(當) $9{\sim}6.3{\times}20^5$개(個)이었고 주(主)로 토양유래(土壤由來)의 Enterobacter와 Klebsiella로 구성되었으며, Escherichia coli는 1%이하(以下)로 검출(檢出)되었고, 대부분(大部分)의 사료(飼料)는 이들 균오염도(菌汚染度)에 문제성이 없으나 유동 broiler 용사료(用飼料)에서는 분뇨성 유래(由來) Escherichia coli오염도(汚染度)가 커서 문제성으로 주목(注目)할만하다. 일반사상균수(一般絲狀菌數)는 수집시료(蒐集試料)의 약(約) 45%가 검출한계(檢出限界) 이상(以上)이었고 기외오염사료(其外汚染飼料)는 1g당(當) $5.9{\times}10^2{\sim}4.5{\times}10^5$이었다. 내삼투성(耐?透性) 사상균(絲狀菌)은 전수집시료(全蒐集試料)에서 검출(檢出)되었으며 1g당(當) $2.5{\times}10{\sim}3.5{\times}10^5$ 범위에 있었고, 주(主)로 Aspergillus glaucus군(群)에 속(屬)하는 Asp. amsteldami, Asp. ruber, Asp, ochraceus와 기타 소수(小數)의 Asp. versicolor, Penicillium sp. 로 구성되어 있다. Mycotoxin 생산균인 Asp. flavus, Asp. candidus Asp, ochraceus 등이 오염(汚染)은 되었었으나 그 분포(分布)와 생육밀도(生育密度)로 보아 주목(注目)할만한 것은 못되었다. 전수집사료(全蒐集飼料)에 대(對)하여 Mycotoxin을 검색(檢索)한 바 확인(確認)할 수 없었다.

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