Ji-O Seo;Hyoung-Seop Park;Won-Ki Jeong ;Nam-Gil Kim
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.56
no.5
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pp.684-690
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2023
This study was conducted bimonthly from February to December 2021 to reveal the ecology of Sargassum thunbergii in the intertidal zone along the coasts of Korea. Separate surveys on the period of embryo formation were conducted from February 2021 to December 2022. The growth of S. thunbergii began to increase in February, reached a maximum in June, and was at a minimum in October. Air vesicles were formed from February to June, April to August, and February to August on the east, west, and south coasts, respectively. Receptacles were observed from April to June on the east coast, but from April to August on the west and south coasts. The earliest release of embryos was observed in late May 2022 on the south coast, followed by early June on the east and west coasts. The average size of leaves, stems, and air vesicles was maximum on the east coast and minimum on the west coast, whereas leaf and internode intervals were maximum on the west coast and minimum on the east coast. Plant length, biomass, and the number of branches showed maximum values in the south coast and minimum values in the east coast.
The faulty regulation of imprinting gene lead to the abnormal development of reconstructed embryo after nuclear transfer. However, the correlation between the imprinting status of donor cell and preimplantation stage of embryo development is not yet clear. In this study, to determine this correlation, we used the porcine spermatogonial stem cell (pSSC) and fetal fibroblast (pFF) as donor cells. As the results, the isolated cells with laminin matrix selection strongly expressed the GFR ${\alpha}$-1 and PLZF genes of SSCs specific markers. The pSSCs were maintained to 12 passages and positive for the pluripotent marker including OCT4, SSEA1 and NANOG. The methylation analysis of H19 DMR of pSSCs revealed that the zinc finger protein binding sites CTCF3 of H19 DMRs displayed an androgenic imprinting pattern (92.7%). Also, to investigate the reprogramming potential of pSSCs as donor cell, we compared the development rate and methylation status of H19 gene between the reconstructed embryos from pFF and pSSC. This result showed no significant differences of the development rate between the pFFs ($11.2{\pm}0.8%$) and SSCs ($13.3{\pm}1.1%$). However, interestingly, while the CTCF3 methylation status of pFF-NT blastocyst was decreased (36.3%), and the CTCF3 methylation status of pSSC-NT blastocyst was maintained. Therefore, this result suggested that the genomic imprinting status of pSSCs is more effective than that of normal somatic cells for the normal development because the maintenance of imprinting pattern is very important in early embryo stage.
Present studies were conducted to investigate the developmental stage and the location of embryos in the reproductive tract at various times after ovulation, the morphologically normal after thawing of embryos preserved in liquid nitrogen, and the survival after transferring frozen-thawed embryos. The results obtained were as follows: 1. Embryo stage and location in the reproductive tract after hCG administration. For the investigation of embryo stage and location in the reproductive tract after ovulation, rabbits were laparotomized at 24, 40, 48, 72 and 120 hrs post hCG injection, simultaneously with mating. the oviducts and uteri were flushed out with PBS medium containing 50% rabbit serum, respectively. 1) Most of embryos was remained in the oviduct within 48 hrs, with the lapse of time, embryos were started to move to uterus and shifted in uterus at 72 hrs after hCG injection. 2) The representatives of embryos stage collected at 24, 40, 48, 72 and 120 hrs were 1-cell(60.4%), 8-cell to early morula (52.3, 39.3%), late blastocyst (95.5%) stages, respectively. 2. Morphological normality and survival of the frozen-thawed embryos. For the evalution of the quality and viability on the frozen-thawed embryos, immediately after thawing, embryos were assessed by morphologically normal under a dissecting microscope, and a further test of frozen-thawed embryos was made by transferring the morphologically normal embryos to the uteri of recipient rabbit induced pseudopregnancy by the injection of hCG at the time of hCG injection in donor rabbits. 1) The propotions of embryos which a, pp.ared morphologically normal was higher when 8-cell (85.7%) and morula(90.5%) were used for freezing than when 4-cell (66.7%) and blastocyst (75.8%) were used. 2) Preganacies were observed at Day 15 after transfer of frozen-thawed 8-cell (7/13), morula (19/42) and blastocyst (3/19) but not after transfer of embryos at 4-cell stage.
Kim, Eun-Hye;Cheong, Seung-A;Yoon, Junchul David;Jeon, Yubyeol;Hyun, Sang-Hwan
Journal of Embryo Transfer
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v.28
no.1
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pp.1-6
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2013
A lot of works have been dedicated to clarify the reasons why the establishment of embryonic stem cells (ESCs) from pig is more difficult than that from mouse and human. Several concomitant factors such as culture condition including feeder layer, sensitivity of cell to cell contact, definitive markers of pluripotency for evaluation of the validity and optimal timing of derivation have been suggested as the disturbing factors in the establishment of porcine ESCs Traditionally, attempts to derive stem cells from porcine embryos have depend on protocols established for mouse ESCs using inner cell mass (ICM) for the isolation and culture. And more recently, protocols used for primate ESCs were also applied. However, there is no report for the establishment of porcine ESCs. Indeed, ungulate species including pigs have crucial developmental differences unlike rodents and primates. Here we will review recent studies about issues for establishment of porcine ESCs and discuss the promise and strategies focusing on the timing for derivation and pluripotent state of porcine ESCs.
The changes of protein bodies in endosperm cells of both seeds with red seed coat and indehiscent seeds of Panax ginseng C.A. Meyer have been investigated in relation to the embryo development. In the early stage of seeds with red seed coat, spherical spherosomes were distributed in endosperm cells. Protein bodies were formed from vacuoles containing the storage protein. Cell organelles were hardly observed in the cytoplasm. In the late stage of the seed with red seed coat, the endosperm was filled with spherosomes and protein bodies. The protein bodies consisted of amorphous inclusions with high electron density or proteinaceous matrix with even electron density. In the seed of in dehiscence, the protein body in endosperm cells contained globoids and protein crystalloids. The globoid of protein body had a electron dense materials. Umbiliform layer was formed between embryo and endosperm. The deformation patterns of endosperm cell wall and the cellulose microfibril were observed in endosperm cells near the umbiliform layer. Umbiliform layer consisted of lipid body and autolyzed cell debris. The protein body of endosperm cell near the umbiliform layer showed various degenerative patterns, and so electron density of proteinaceous matrix was gradually decreased.reased.
The characteristics such as characters of seed, fruit and endosperm, development of embryo, dehisced and germination rate of seeds which harvested at 10 days intervals from 20 days to 60 days after pollination were determined to clarify the optimum time for seed production of ginseng. The sizes of length, width and thickness of fruits, seeds and endosperms investigated on 20 days after pollination were not largely different from those that harvested after 60 days. But the weights of fruits and seeds were increased along with the delay of harvesting time. The seeds which harvested from 30 to 60 days showed comparatively high dehisced and germinated rates, especially 40 days in dehisced rates and 50 days in germinated rates. The embryos were rapidly grown in early stage. Lengths of the embryo on 20 days after pollination were approximately grown to 30 ${\mu}{\textrm}{m}$. And after 30 days pollinated, embryos were not only more rapidly grown to 213 ${\mu}{\textrm}{m}$ but also cotyledon premodia were developed in this time and completely formed after 40 days.
Effect of cadmium on the early amphibian development was analyzed through FETAX (Frog Embryo Teratogenesis Assay: Xenopus). Embryos manifested concentration-dependent mortality and realformations; shortage of anterior-posterior axis gut realformation, ocular anomalies, bent notochord, misshapen dorsal fin, and derreal blisters. The treatment with 1.5ppm cadmium solution caused 100% mortality and concentration of lppm did not kill the embryos that caused 100% anomaly. The teratogenic index (TI = LC50 /EC50) was 2.8 indicating that $CdCl_2$ is teratogenic for Xenopus laevis. Embryos that were pulsetreated with at early to late blastula stage (St. 3-9) and mid to late blastula stage (St. 6-10) showed relatively strong resistance to cadmium, but the embryos treated at gastrula stage (St. 10-13) showed high mortality. And the embryos treated at tailbud stage (after St. 25) showed highest mortality of any other early stages. Effects of temperature were studied through pulse- treatment during gastrula stage at $20^{\circ}C$ and $30^{\circ}C$. The embryos treated with 7.5ppm at $30^{\circ}C$ and 15ppm at $20^{\circ}C$ caused 100% mortality respectively, indicating that higher temperature had more severe toxic effect. One of the most peculiar effect of cadmium at gastrulation was distortion of the tail. The probable cause of toxic effect of Cd was discussed.
Discharged materials from the point or non-point source are released into the sea, and as the results, marine environment is directly affected. We must estimate the impacts of contaminants to marine pollution rapidly and accurately. Therefore, it is needed on early warning system for appreciating marine environmental impacts, and required a bioassay to evaluate abnormal changes. A bioassay test was developed to examine the effects of heavy metal contaminants on the early life stages of the marine annimals. We have studied the effects of metals on early development of a sea urchin species, Strongylocentrotus intermedius. S. intermedius embryos were tested with six metals (Cu, Ag, Zn, Cd, Cr, Ni) and showed the highest sensitivity to Cu as well as the lowest sensitivity to Cd. The order of biological impact for metals was Cu>Ag>Ni>Zn>Cr>Cd. In accordance with the results, sea urchins embryos can provide biological criteria for seawater quality assessment. The sensitivity of developmental bioassay whith S. intermedius is at intermediate level among marine organisms commonly used in aquatic bioassays. And this sea urchin can be routinely employed as a test organism for ecotoxicity assays.
DNA methylation at cytosines (5mC) is a major epigenetic modification involved in the regulation of multiple biological processes in mammals. How methylation is reversed was until recently poorly understood. The family of dioxygenases commonly known as Ten-eleven translocation (Tet) proteins are responsible for the oxidation of 5mC into three new forms, 5-hydroxymethylcytosine (5hmC), 5-formylcytosine (5fC) and 5-carboxylcytosine (5caC). Current models link Tet-mediated 5mC oxidation with active DNA demethylation. The higher oxidation products (5fC and 5caC) are recognized and excised by the DNA glycosylase TDG via the base excision repair pathway. Like DNA methyltransferases, Tet enzymes are important for embryonic development. We will examine the mechanism and biological significance of Tet-mediated 5mC oxidation in the context of pronuclear DNA demethylation in mouse early embryos. In contrast to its role in active demethylation in the germ cells and early embryo, a number of lines of evidence suggest that the intragenic 5hmC present in brain may act as a stable mark instead. This short review explores mechanistic aspects of TET oxidation activity, the impact Tet enzymes have on epigenome organization and their contribution to the regulation of early embryonic and neuronal development.
Park, Jae-Min;Han, Kyeong-Ho;Kim, Na-Ri;Yoo, Dong-Jae;Yun, Seong-Min;Han, Ji-Hyeong
Development and Reproduction
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v.18
no.4
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pp.259-266
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2014
The egg development and early life history of Korean spotted sleeper, Odontobutis interrupta which is Korean endemic species from Sora-choen was investigated. The Korean spotted sleeper were caught at Sora-myeon, Yeosu-si, Jeollanamdo, from Korea at May in 2014. The fertilized eggs were $4.23{\pm}0.05mm$ in long diameter and had oil globules. Hatching time of the embryo began about 442 hr 14 min after fertilization under water temperature of $19.5^{\circ}C$. The newly hatched larvae were $4.27{\pm}0.35mm$ in total length and their anus were not yet opened. 3 days after hatching postlarvae was measured $6.20{\pm}0.11mm$ in total length. 10 days after hatching postlarvae was measured $6.69{\pm}0.14mm$ in total length.
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