• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권8호
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• pp.765-773
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• 2009

Edwardsiella tarda is a pathogen with a broad host range that includes human and animals. The E. tarda hemolysin (Eth) system, which comprises EthA and EthB, is a noted virulence element that is widely distributed in pathogenic isolates of E. tarda. Previous study has shown that the expression of ethB is regulated by iron, which suggests the possibility that the ferric uptake regulator (Fur) is involved in the regulation of ethB. The work presented in this report supports the previous findings and demonstrates that ethB expression was decreased under conditions when the E. tarda Fur ($Fur_{Et}$) was overproduced, and enhanced when $Fur_{Et}$ was inactivated. We also identified a second ethB regulator, EthR, which is a transcription regulator of the GntR family. EthR represses ethB expression by direct interaction with the ethB promoter region. In addition to ethB, EthR also modulates, but positively, luxS expression and AI-2 production by binding to the luxS promoter region. The expression of ethR itself is subject to negative autoregulation; interference with this regulation by overexpressing ethR during the process of infection caused (i) drastic changes in ethB and luxS expressions, (ii) vitiation in the tissue dissemination and survival ability of the bacterium, and (iii) significant attenuation of the overall bacterial virulence. These results not only provide new insights into the regulation mechanisms of the Eth hemolysin and LuxS/AI-2 quorum sensing systems but also highlight the importance of these systems in bacterial virulence.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제27권1호
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• pp.112-121
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• 2017

Edwardsiella tarda is a gram-negative pathogenic bacterium in aquaculture that can cause hemorrhagic septicemia in fish. Many secreted proteins have already been identified as virulent factors of E. tarda. Moreover, since virulent phenotypes are based on the expression regulation of virulent genes, understanding the expression profile of virulent genes is important. A quantitative RT-PCR is one of the preferred methods for determining different gene expressions. However, this requires the selection of a stable reference gene in E. tarda, which has not yet been systematically studied. Accordingly, this study evaluated nine candidate reference genes (recA, uup, rpoB, rho, topA, gyrA, groEL, rpoD, and 16S rRNA) using the Excel-based programs BestKeeper, GeNorm, and NormFinder under different culture conditions. The results showed that 16S rRNA was more stable than the other genes at different culture growth phases. However, at the same culture time, topA was identified as the reference gene under the conditions of different strains, different culture media, and infection, whereas gyrA was identified under the condition of different temperatures. Thus, in experiments, the expression of gapA and fbaA in E. tarda was analyzed by RT-qPCR using 16S rRNA, recA, and uup as the reference genes. The results showed that 16S rRNA was the most suitable reference gene in this analysis, and that using unsuitable reference genes resulted in inaccurate results.

• 한국어병학회지
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• 제18권3호
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• pp.215-225
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• 2005

본 연구는 강독성 균주인 E. tarda PoKF-000623가 생산하는 세포외생성물 (ECPs)을 넙치에 투여되었을 때 나타나는 생리학적 및 면역학적 영향을 조사하고자 하였다. E. tarda PoKF-000623 균주가 생성하는 ECPs의 넙치 (평균체중, 5.6g)에 대한 96hr-$LD_{50}$ 은 약 0.714${\mu}g$ g TEX>$fish^{-1}$ 이었으며, ECPs의 주사에 의한 폐사는 고농도 (40${\mu}g$ TEX>$fish^{-1}$) 뿐만 아니라 저농도 (4${\mu}g$ TEX>$fish^{-1}$)에서도 지속적으로 발생하였다. 평균 체중 59.1 g 크기의 넙치에 각각 0, 4 and 40${\mu}g$ ECPs TEX>$fish^{-1}$ 의 농도로 근육 주사한 후, 혈청 중 glucose 농도와 total protein 농도 및 신장 식세포의 활성을 조사하였다. 그 결과 고농도의 ECPs 주사 시험구의 넙치에서 혈중 glucose 농도와 total protein 농도가 대조구에 비하여 유의적으로 높게 나타났다. 그러나 세포성 면역 기구인 신장 식세포의 CL 반응과 세균 살해능은 대조구에 비하여 유의적으로 저하되었다. 따라서 넙치에 고농도의 E. tarda ECPs를 투여하면 생체 지표의 일부에 영향을 미치는 것으로 확인되었고 면역 활성, 특히 신장 식세포 활성의 억제가 edwardsielosis의 발병에 영향을 미치는 것으로 사료된다.

• 한국양식학회지
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• 제14권2호
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• pp.81-87
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• 2001

Antimicrobial activity of the essential oil extracted from plants Artemisia princeps var. orientalis, Thuja orientalis and Chamaecyparis obtusa were tested against selected pathogenic bacteria and fungi of fish. At the concentrations above 500ppm, ingibitory effect of the oil of A. princeps var. orientalis was at its peak against Aeromonas hydrophila ATCC 14715, A. hydrophila CF-2, A. salmonicida ATCC 14174 and A. salmonicida EL-1 but the bacteria Edwardsiella tarda KBF-1, Vibrio anguillarum ATCC19264, V. ordalii ATCC33509 and Streptococcus sp. were insensitive. Likewise, the oil extract of T. orientalis showed the highest inhibitory activity against V. ordalii ATCC33509, E. tarda ECK-1, and E. tarda KBF-1 at 300ppm; however the activity was highest at 500ppm or A. hydrophila ATCC14715, A. hydrophila CF-2, A. salomonicida ATCC14174, A. salmonicida EL-1 and Streptococcus sp. SF-1. With increasing dose of C. obtusa oil, the inhibitory activity became more and more effective against A. hydrophila CF-2, A. salomonicida ATCC14174, E. tarda ECK-1 and Streptococcus sp. SF-1, but A. hydrophila ATCC14174, A. salmonicida EL-1, E. tarda KBF-1, V. anguillarum ATCC19264, V. ardalii ATCC33509 and gram positive bacteria (Streptococcus sp.) were somewhat resistant. A. princeps var. orientalis, T. orientalis and C. obtusa were also tested against Saprolegnia sp. at the oil concentrations of 10, 100, 500, 1,000, 1,500 and 2,000ppm. The inhibitory effect of the oil on the inhibit the mycelial growth of Saprolegnia sp. at 10ppm and completely inhibited at over 500ppm.

• 한국어병학회지
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• 제32권2호
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• pp.97-104
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• 2019

본 연구에서는 2017년 4월부터 12월 사이에 여수수산시장에서 구입한 수산물로부터 분리된 Vibrio parahaemolyticus와 Morganella morganii의 내성특성을 알아보고 장내세균인 Escherichia coli와 어류 병원균인 Edwardsiella tarda와의 내성전이 가능성을 알아보았다. Broth mating 법으로 실시한 conjugation에서 형성된 transconjugants를 분리하기 위하여 ampicillin(AMP) 50 ㎍/ml와 streptomycin (SM) 150 ㎍/ml 또는 oxytetracycline(OT) 30 ㎍/ml이 첨가된 TSA배지를 사용하였다. AMP, amoxicillin (AML), colistin(CT)에 낮은 감수성을 보였던 V. parahaemolyticus와 달리 M. morganii는 AMP, AML, CT, erythromycin, OT, tetracyclin등에 감수성이 낮았다. V. parahaemolyticus와 M. morganii를 E. coli와 conjugation을 실시한 결과 transconjugants인 E. coli는 분리되지 않은 반면 SM내성을 획득한 V. parahaemolyticus와 M. morganii가 분리되었다. 한편 V. parahaemolyticus와 E. tarda의 broth mating에서는 AMP와 AML 내성을 획득한 E. tarda transconjugant가 분리되었다. 그러나 V. parahaemolyticus의 β-lactamase 유전자인 VPA 0477의 전이는 확인되지 않았으며, E. tarda의 내성이 전달된 V. parahaemolyticus나 M. morganii는 검출되지 않았다. 이와 같은 결과는 생물 위해성 세균들 간의 내성전이가 양방향성이며 매우 다양한 패턴으로 진행되고 있음을 시사한다.

• 한국어병학회지
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• 제20권3호
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• pp.281-289
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• 2007

어병세균인 Edwardsiella tarda, Vibrio ichthyoenteri, Streptococcus iniae의 강도다리에 대한 병원성, 염분농도가 어병세균의 성장 및 강도다리의 lysozyme 활성과 사육수온, 밀도가 강도다리에 미치는 영향을 조사하였다.연구 결과, E. tarda에 대해서는 병원성이 높았으나, V. ichthyoenteri와 S. iniae에 대해서는 항병력이 높았다.염분농도에 따른 균의 증식속도 조사 결과, E. tarda와 S. iniae는 저염분에서 증식속도가 빨랐으나, V. ichthyoenteri는 저염분에서 낮았으나, 유의적인 차이는 보이지 않았다. 저염분 사육에서 강도다리의 lysozyme 활성은 일반해수구에 비하여 다소 낮게 나타났으나 유의적인 차이는 보이지 않았다.사육수온, 밀도가 강도다리에 미치는 영향을 조사한 결과, 수온은 26℃ 이하, 밀도는 수조저면적의 100% 이하가 강도다리의 생리학적 성상 및 lysozyme 활성이 높게 나타났다.

• 한국어병학회지
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• 제12권2호
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• pp.83-88
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• 1999

녹차 추출물을 이용하여 각종 어병세균의 collagenase 활성과 생성 억제 및 생육저해 효과를 조사하였다. 어병세균의 감염시에 필요한 효소인 collagenase활성을 8종의 어병세균에 대하여 측정한 결과 0.08-0.7unit/ml 범위로 나타났다. 그중 collagenase활성이 높은 Edwardsiella tarda의 collagenase 활성은 0.2 mg/ml의 녹차 추출물이 첨가된 반응액에서 거의 100% 저해되었다. E. tarda의 collagenase 생합성은 ST배지에서 $25^{\circ}C$, 16시간 배양하였을 때 가장 높게 나타났다. 이 효소는 0.08 mg/ml의 녹차 추출물이 첨가된 배양액에서 1/3이상 생합성이 감소하였다. 또한 균의 생육에 미치는 녹차 추출물의 영향을 조사한 결과 8 mg/ml이 첨가된 배양액 내에서 균의 생육이 완전히 억제되었다.

• 한국양식학회지
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• 제16권2호
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• pp.118-123
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• 2003

이산화염소($ClO_2$) 처리에 의한 어병 세균의 살균 효과를 조사하기 위하여 감염어 유래 분리주인 Vibrio anguillarum, Edwardsiella tarda, Streptococcus sp. 및 Streptococcus sp.를 대상으로$ClO_2$유효 농도 0.455, 0.246 및 0.129 ppm에 30초, 1분, 3분, 5분 및 10분간 처리하여 ClO$_2$의 살균효과를 조사하였다. V. anguillarum과 E. tarda는 ClO$_2$ 0.246 ppm에서, 30초 이 상의 처리에 의하여 세균의 증식이 완전히 저해되었다. 그러나 상대적으로 저농도인 0.129 ppm에서는 5분 이상의 염소처리 조건이 필요하였다. Streptococcus sp.는 실험에 사용된 어병 세균 중 $ClO_2$의 살균능이 가장 낮은 것으로 나타났다. 0.455 ppm에서 Streptococcus sp.는 30초 반응 후 그 증식이 완전히 저해되었고, 0.246 ppm과 0.129 ppm의 ClO$_2$에서는 각각 배양 3시간, 8시간 이후부터 그 생잔에 의한 증식이 확인되어졌다. Streptococcus sp.는 본 실험에서 설정한 최저농도인 0.129 ppm 에 30초간의 반응으로 균이 사멸됨으로서 실험에 사용된 세균 중 ClO$_2$에 가장 민감한 것으로 나타났다. 그러므로 Streptococcus sp. 는 0.455 ppm, V. anguillarum과 E. tarda는 0.246 ppm, Streptococcus sp. 는 0.129 ppm의$ClO_2$농도로 30초 전후로 처리하는 조건이 가장 효과적임을 본 연구를 통해 확인할 수 있었다.

• 한국어병학회지
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• 제21권3호
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• pp.189-199
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• 2008

This paper aims to compare difference with the in an ability of their resistance and survival against in a non-specific defence mechanism of the olive flounder, between the virulent and the avirulent E. tarda strains. The tested E. tarda strains, we divided into the virulent and the avirulent strain groups on the basis of a value of 50% lethal dose (LD50) for the olive flounder weighed 10.3 g in average. The strains of LD50 101.6~104.2 cfu/fish were grouped as virulent strains, such as KE-1, KE-3, KE-5 and FSW910410. The group of avirulent strains as LD50 exceeded 108.7 cfu/fish were included the strains, SU100 and AL92448. A test was conducted to understand the survival ability of each strain in the mucus of the skin and the intestine of olive flounders. The results showed KE-1, KE-3, KE-5 and FSW910410 were highly to survive between 6 hours and 24 hours in intestine. The survival ability in the bile of olive flounder the number of avirulent strains declined during incubation but the virulent strain showed the number of alive bacteria having sustained or increased. In the test for the survival of bacteria in fresh sera of olive flounder, the virulent strains also had tendency to multiply. Concerning the tested bacteria internalization into the head kidney macrophages and the intracellurar replication in the macrophages of olive flounder. The virulent strains exhibited strong internalization, followed high rate replication. According to the results, virulent strains of E. tarda revealed more ability to resist and survive in the face of humoral and cellular defence factors than avirulent strains.

• 한국어병학회지
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• 제7권2호
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• pp.113-117
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• 1994

어병 세균에 대해 쑥(Artemisia princeps var. orientalis) 추출물인 정유의 항균성을 조사하였다. Aeromonas hydrophila, Aeromonas salmonicida, Aeromonas sorbia, Edwardsiella tarda 와 Streptococcus sp. (yellowtail)는 1,000~2,000 ppm 에서 증식이 억제되었다. 즉 억제 농도는 A.salmonicida 가 1,000 ppm A.hydrophila, A. sorbia, E. tarda 와 Streptococcus sp. (yellowtail)는 1,500 ppm 이었다. 그러나 Vibrio anguillarum, Vibrio ordalii, Edwardsiella ictaluri와 Streptococcus sp. (SF-1)는 100~2,000 ppm 농도에서 현저한 억제 효과는 없었다.