• 제목/요약/키워드: E. coli culture

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유전자 재조합 E. coli를 이용한 levofloxacin의 광학선택적 생산

  • 민병혁;이상윤;조종문;오선영;장성재;임상민;김동일
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
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    • pp.666-670
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    • 2001
  • Levofloxacin은 ofloxacin의 L형의 광학이성질체로 D형의 ofloxacin보다 뛰어난 향균활성을 갖는다. 본 연구에서는 광학선택성을 지닌 외래 효소를 재조합균주에서 발현시키고 고농도배양과 세포고정화를 통해 levofloxacin을 생산하였다. E. coli 고농도 배양을 수행하여 89 g/L의 세포농도를 얻었으며 IPTG 1 mM로 단백질 발현을 유도하여 levofloxacin 생산 반응에 사용할 때 최적 첨가시기를 결정하였다. 세포고정화를 위해서는 sodium alginate를 사용하였으며 1.5% 첨가시 가장 우수한 효소활성을 나타내었고 재사용시에도 효소활성과 광학선택성이 유지됨올 확인하였다.

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Change Pattern of Species and Antimicrobial Susceptibility of Microorganisms Isolated from Blood Culture during 5 Years: 2008-2012

  • Shin, Kyung-A;Shin, Kyeong Seob;Hong, Seung Bok
    • 대한의생명과학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.245-253
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    • 2013
  • To provide reference data or guideline for empirical treatment of bloodstream infection, we studied a change pattern in causative microorganisms and antimicrobial susceptibility in a general hospital at Gyeonggi province during five years. We retrospectively reviewed the frequency of causative microorganisms and antimicrobial susceptibility results of 5,782 microorganisms isolated from blood culture in a general hospital during the period from January 2008 to December 2012. The most common pathogens were Escherichia coli (14.7%), Staphylococcus aureus (7.5%), Streptococcus viridans group (4.9%), and Klebsiella pneumoniae (4.1%). The multiple microorganisms were isolated in 4.3% of bloodstream infection patients. The average contamination rate of blood culture during five years was 3.0%. Methicillin-resistant S. aureus (MRSA), vancomycin-resistant Enterococcus faecium (VRE), and penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae were isolated at 62%, 27% and 11%, respectively. Cefotaxime-resistant E. coli and K. pneumoniae was 20% and 18%, respectively. Imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa (IRPA) and Acinetobacter baumannii (IRAB) was 25% and 66%, respectively. E. coli and S. aureus were most common pathogens isolated from blood culture for five years. The increase of multidrug-resistant microorganisms, such as MRSA, VRE, ESBL, IRPA and IRAB, requires more strict control of antibiotics and causes the need of the more updated guideline for the treatment of blood stream infection.

Expression profile analysis of metabolism of Escherichia coli during high cell density cultivation using DNA chip

  • 윤성호;이상엽;임근배
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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    • pp.600-603
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    • 2000
  • DNA chip containing 207 E. coli genes related to important metabolisms such as (TCA cycle, glycolysis, fermentation and etc) were used to carry out a comprehensive investigation of the change in metabolism and physiology during high cell density culture of E. coli by fed-batch cultivation.

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Escherichia coli와 Bacillus subtilis의 당지질 생합성과 지방산 조성에 미치는 금속산화물의 효과 (The Effects of Metal Compounds on the Biosynthesis of the Galactolipid and Composition of Fatty Acids in Escherichia coli and Bacillus subtilis)

  • Lee, So Yeon;Yoon, Hyo Sook;Choi, Won Chang;Lee, Chong Sam
    • 한국환경보건학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.12-23
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    • 1997
  • Potassium dichromate(PD, 500 ppm, 500 ppm), potassium chromate(PC, 500 ppm, 500 ppm), cobalt chloride(CC, 100 ppm, 10 ppm), methylmercuric chloride(MC, 100 ppm, 10 ppm)을 처리한 배지에 E. coli와 B.subtilis를 배양하는 동안에 당지질과 galactose의 생합성 및 지방산 조성을 대조구와 비교 분석하였다. 금속화합물 처리구에서의 생장과 MGDG, DGDG의 함량 및 total lipid는 대조구에 비해 감소하였다. 또한 당지질 형성에 이용된 galatose의 함량은 억제되었다. E. coli와 B. subtilis에서 MGDG와 DGDG 합성에 이용된 주요 지방산은 다양한 변화를 나타내었다.

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식품부패 및 병원성 미생물에 대한 자소잎 추출물의 항균효과 (Antimicrobial Activities of Extracts of Perilla Frutescens Briton var. acuta Kudo on Food Spoilage or Foodborne Disease Microorganisms)

  • 이가순;이주찬;한규흥;오만진
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제6권2호
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    • pp.239-244
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    • 1999
  • 자소잎중 물과 에탄올을 이용하여 얻은 추출물을 2종의 부패곰팡이(Aspergillus flavus KCTC 6143, Aspergillus jlavus KcrC 6961) 및 5종의 식중독세균 ( isteria monocytogenes ATCC 15313, Staphylococc따 aureus 196E ATCC 13565, Escherichia coli 0157:H7 ATCC 43895, Salmonella typhimurium ATCC 13311, Yersinia enterocolitica)에 대하여 항균효과를 조사하였다. 생육증식 저해농도를 disk method로 검색한 결과 에탄올추출물에서 그 효과가 인정되어 5종의 식중독 세균에 대하여 자소잎 에탄올 추출물을 농도별로 첨 가한 후 그 효과를 비교하였다. Gram양성균(L. monocytogenes, S. aureus)의 경우가 Gram음성균(E. coli 0157:H7, S. typhimurium, Y. enterocolitica)에 비하 여자소잎 에탄올추출물에 의한 증식억제효과가 추 출물 $1000\mu\textrm{g}$/mL 농도 첨가구에서 월둥히 컸으며 생 육증식억제효과의 크기는 L. monocytogenes, S. aureus, S. typhimurium의 순이었고, E. coli 0157:H7과 Y enterocolitica균에 대한 생육증식억제 효과는 농도첨 가별에 따라 생육증식이 비례적으로 억제되었다. 자 소잎 에탄올 추출물은 $121^{\circ}C$에서 15분간 가열처리한 후에도 항균력이 인정되었다.

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이산화염소가 E. coli O157:H7, Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenes의 생존에 미치는 영향 (Inhibitory Effect of Aqueous Chlorine Dioxide on Survival of Escherichia coli O157:H7, Salmonella typhimurium, and Listeria monocytogenes in Pure Cell Culture)

  • 염형준;고종관;김미리;송경빈
    • 한국식품과학회지
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    • 제36권3호
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    • pp.514-517
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    • 2004
  • 본 연구에서는 이산화염소 처리를 이용하여 대표적 식중독 미생물인 E. coli O157:H7, Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenes에 대한 살균 효과를 측정하였다. Pure cell culture 상태에서의 E. coli는 이산화염소 5 ppm에서 D-value가 3.37분으로 측정되었다. 그러나 Salmonella와 Listeria의 생존곡선은 이산화염소 처리시간에 따라 biphasic curve를 나타내었다. 이러한 biphasic curve는 5분까지의 처리로 해당 농도에서의 살균효과는 대부분 나타나고 그 이후는 효과가 없음을 보여주었다. 특히 Listeria의 5ppm과 10ppm의 처리결과는 이산화염소의 처리에 영향을 주는 인자 중 처리 시간보다는 처리농도가 더 큰 영향을 끼치는 것을 나타내었다. 본 연구 결과는 이산화염소 허용치인 5ppm이 신선채소에 대한 미생물학적 안전성을 확보 하기엔 부족하다는 것을 시사한다.

Enterobacter aerogenes에 의한 수소 생산 초기 단계인 포메이트 탈카복시 반응 연구 (Formate Decarboxylation: Initial Step for Hydrogen Production by Enterobacter aerogenes)

  • 최진영;조영충;안익성
    • 공업화학
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    • 제20권4호
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    • pp.449-452
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    • 2009
  • 철,셀레늄,그리고 몰리브데늄이 결여되어 있는 최소배지는 Escherichia coli MC4100의 혐기성 배양에서의 수소생산을 억제하였다. 철, 셀레늄, 그리고 몰리브데늄은 대장균과 Enterobacter 모두의 formate dehydrogenase ($FDH_{II}$) 효소의 보조인자로 알려져 있다.그러므로 이러한 미량성분들이 최소배지에 결여되어 있을 때는 $FDH_{II}$를 통한 수소생산이 대장균 뿐만 아니라 E. aerogenes에서도 저해될 것이다. 이러한 성분들이 부족할 때 E. aerogenes 413에 의한 수소 생산은 지연되었다.그러므로,E. aerogenes에 의한 수소 생산은 NADH의 재산화가 아닌 포메이트 탈카복시 반응에 의해서 시작된다고 사료된다.

Temperature-Dependent Expression of Escherichia coli Thioredoxin Gene

  • Lee, Jin-Joo;Park, Eun-Hee;Ahn, Ki-Sup;Lim, Chang-Jin
    • BMB Reports
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    • 제33권2호
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    • pp.166-171
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    • 2000
  • Thioredoxin is a multifunctional protein that is ubiquitous in microorganisms, animals and plants. Previously, the expression of the Escherichia coli thioredoxin gene (trxA) was found to be negatively regulated by cAMP. In the present study, the effect of temperature on the expression of the E. coli trxA gene was investigated. In order to examine the temperature effect, the fusion plasmid pCL70 that harbors the E. coli trxA P1P2 promoter was used. The other two fusion plasmids, pJH3 and pMH521 that were constructed in different vectors which harbor the E. coli trxA P2 promoter, were also used. When the E. coli strain MC1061/pCL70 was grown in a rich medium at $25^{\circ}C$, $34^{\circ}C$ and $42^{\circ}C$, the cells grown at $42^{\circ}C$ gave the highest $\beta$-galactosidase activity. The E. coli MC1061/pJH3 and MC1061/pMG521 cells showed increased $\beta$-galactosidase activity after the shift of the culture temperature to $42^{\circ}C$. The wild-type trxA gene of the E. coli MC1061 cells produced much higher thioredoxin activity at the higher temperature. These results support the conclusion that the E. coli trxA gene is regulated in a temperature-dependent manner. Especially the expression from its P2 promoter appeared to be sensitive to temperature.

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저온저장중 Allspice(Pimenta dioica L.)에 의한 Escherichia coli 0157:H7과 Staphylococcus aureus 196E의 생존억제 (Inhibition of Escherichia coli 0157:H7 and Staphylococcus aureus 196E by allspice (Pimenta dioica L.) during cold storage)

  • 박찬성
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.106-112
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    • 1997
  • 향신료인 allspice(Pimenta dioica L.)를 액체배지에 첨가하여 2종류의 식중독세균(Escherichia coli 0157:H7과 Staphylococcus aureus 196E)의 증식과 저온저장중 생존에 미치는 항균효과를 조사하였다 저농도(0~2%, w/v)의 allspice를 함유한 tryptic soy broth(TSB)에 E. coli와 S. aureus를 $10^{5}$~$10^{6}$ cells/$m\ell$가 되게 접종하여 35$^{\circ}C$에서의 증식과 냉장(5$^{\circ}C$)및 냉동(-2$0^{\circ}C$)저장중 생존억제효과를 생균수의 변화로서 조사하였다. 35$^{\circ}C$에서의 E. coli 증식은 1%이내의 향신료 농도에서는 증식이 저해되지 않았으나, 2%의 allspice 존재하에서는 긴 유도기를 거친 후에 증식이 시작되었다. 35$^{\circ}C$에서의 S. aureus의 증식은 0.1%와 0.3%의 allspice 존재하에서는 긴 유도기를 거친 후에 증식이 시작되었으나 0.5~2%에서는 세균의 증식이 억제되어 사멸하였다. 5$^{\circ}C$에서 냉장한 경우에는 E. coli와 S aureus 모두 0.3%의 allspice에 의해 생존이 크게 억제되었으며 0.5%이상의 농도에서는 저장말기에 사멸하였다. -2$0^{\circ}C$에 동결저장하였을 때 E. coli는 저장기간이 길어질수록, 첨가한 향신료의 농도가 높을수록 생존 억제효과가 증대되었다. 동결저장중 S. aureus의 생균수는 저장초기에 급격히 감소한 후 거의 일정수준을 유지하였으며 첨가한 향신료의 농도에 따른 생균수의 차이는 나타나지 않았다. 동결저장에서 0.1%의 향신료를 첨가했을 때 E. coli와 S. aureus는 대조구의 생균수에 비해 1/100이하로 생균수가 감소하여 allspice는 우수한 항균효과를 나타내었다.다.

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대장균에서 증식속도 조절에 의한 수용성 재조합 인간 과립구 콜로니 촉진인자의 생산 (Production of Soluble Recombinant Human Granulocyte Colony Stimulating Factor in E. coli by Control of Growth Rate.)

  • 박세철;고인영;강희일
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.135-141
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    • 2004
  • 인간 과립구 성장인자(hG-CSF)는 골수에서 생산되는 단백질로 호중구의 분화 및 생성을 촉진시키는 역할을 한다. 현재 재조합 hG-CSF는 암화학요법에 의한 호중구감소증, 골수이식시 호중구 감소증, 재생불량성 빈혈에 수반되는 호중구 감소증 등으로 적응증이 확대되고 있다. 본 연구에서는 OmpA signal sequence를 삽입하여 인간 과립구 성장인자(hG-CSF)가 분비발현되도록 고안된 T7 promoter 에 의하여 발현되는 pYRCl 발현백터를 제조하였다. E. coli BL2l (pYRCl) 발현시 $37^{\circ}C$에서 배양하는 경우 많은 양의 봉입체(aggregates)를 형성한다. 이에 비하여 $10\mu$M ucose를 포함하는 변형된 MBL배지에서 10 g/$\ell$IPTG를 유도물질로 7시간동안 $25^{\circ}C$에서 배양하였을 때 전체 periplasm단백질의 15%가 soluble rhG-CSF이었다. 또한, 유가식 배양방법을 사용하여 E. coli BL2l(pYRCl)에서 soluble rhG-CSF의 생산조건을 조사하였다. 유가식 배양에서 rhG-CSF의 발현량이 비증식속도를 $0.43 h^{-1}$ 에서 0.14 $h^{-1}$ 으로, 유도 배양시간을 최적화함으로써 rhG-CSF의 발현량이 4.4mg/$\ell$에서 24mg/$\ell$ 로 증가하였다.