Periodontal ligament(PDL) cells and human gingival fibroblasts(HGFs) play important roles in development, regeneration, normal function, and pathologic alteration. PDL cells and HGFs have the similarity related with general characteristics of fibroblast such as spindle shaped morphology, the presence of vimentin intermediate filament and the synthesis of interstitial collagens and fibronectin. There were many studies about the differences between PDL cells and HGFs, but they were not about whole gene level. In this study, we tried to explain the differences of gene expression profiles between PDL cells and HGFs, and the differences among three individuals by screening gene expression patterns of PDL cells and HGFs, using cDNA microarray. Although there were some variants among three experiments, a set of genes were consistentely and differentially expressed in one cell type. Among 3,063 genes, 49 genes were more highly expressed in PDL cells and 12 genes were more highly expressed in HGFs. The genes related with cell structure and motility were expressed more highly in PDL cells. These are cofilin 1, proteoglycan 1 secretory granule, collagen type I(${\alpha}$ 1), adducin gamma subunit, collagen type III(${\alpha}$ 1), fibronectin, lumican(keratan sulfate proteoglycan), and ${\alpha}$ -smooth muscle actin. Tissue inhibitor of metalloproteinase known as the enzyme controlling extracellular matrix with matrix metalloproteinase is more highly expressed in PDL cells, osteoprotegerin known as osteoclastogenesis inhibitory factor is more highly expressed in HGFs. We performed northern blot to verify cDNA microarray results on selected genes such as tissue inhibitor of metalloproteinase, fibronectin, osteoprogeterin. The result of northern blot analysis showed that each cell expressed the genes in similar pattern with cDNA microarray result. This result indicates that cDNA microarray is a reliable method in screening of gene expression profiles.
Purpose: The purpose of this animal study was to perform a histological and histomorphometric analysis in order to elucidate the effect of fibroblast growth factor-2 (FGF-2) on injured periodontal ligament (PDL) and cementum after tooth replantation in dogs. Methods: The roots of 36 mandibular premolars from six mongrel dogs were used in this study. The roots were randomly divided into three groups: (1) a positive control group (n=12), in which the PDL was retained; (2) a negative control group (n=12), in which the PDL and the cementum between the notches were removed; and (3) an experimental group (n=12), in which the PDL and the cementum between the notches were removed and the roots were soaked in an FGF-2 solution ($30{\mu}g/0.1mL$). After treating the root surfaces, the extracted roots were replanted into extraction sockets. The animals were sacrificed four and eight weeks after surgery for histologic and histomorphometric evaluation. Results: At four and eight weeks, normal PDLs covered the roots in the positive control group. In the negative control group, most replanted roots showed signs of replacement resorption. In the experimental group, new PDL-like tissue and cementum-like tissue were observed to partially occupy the region between the root surfaces and the newly formed bone. Histomorphometric analysis showed that the mean length of the newly formed cementum-like tissue on the roots treated with FGF-2 was significantly greater than that of the tissue on the roots in the negative control group (four weeks, P=0.008; eight weeks, P=0.042). However, no significant differences were observed between the roots treated with FGF-2 and the negative control roots with respect to newly formed PDL-like tissue. Conclusions: The results of this study suggest that use of FGF-2 on injured root surfaces promotes cementogenesis after tooth replacement in dogs.
치아우식증이나 치주질환으로 치아를 상실한 경우 여러 가지 방법으로 수복 치료할 수 있으나 그 중에서 임플란트와 치아 이식에 대한 관심이 높아지고 있다. 최근에는 치아 이식에 대한 성공률을 높이기 위해서 치아를 형성시키고 발육시키는 과정에 관한 많은 연구가 이루어지고 있다. 치아싹 이식은 생체 내와 생체 외에서 연구되고 있고, 생체 내 이식은 쥐와 생쥐, 고양이, 개 등 여러 동물에서 시행되고 있다. 이러한 생체 내 이식은 대부분 구강 외에서 시행되고 있으며 구강 내 이식에 대한 연구는 드물다. 본 연구는 악골 내에 이식한 치아싹이 발육되고 석회화되는지 관찰하기 위하여 성숙한 흰쥐의 상악 제 1 구치를 발치하고 그 발치와에 임신 13.5일 된 태아쥐에서 모상기의 하악 제 1 구치의 치아싹을 이식하고 2, 6 개월 후 희생하여 방사선학적 그리고 조직학적으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 12 개월과 6개월 동안 악골 내에 이식한 치아싹은 석회화된 치아 조직이 형성 되었고 치아 조직에서 상아질과 백악질, 치수 조직이 관찰되었으며 법랑질 공간 주변은 상피로 둘러싸여 있었다. 2. 6개월 동안 구강 상피 하방에 위치한 치아 조직은 상피로 둘러싸여 있었고 주위에 치주인대 및 결합조직이 관찰되었다. 3. 이식한 시간이 경과함에 따라 치아 형성이 진전되었으나 치아 조직은 크기가 작았고 형태학적으로 완전하지 못하였다.
The aim of present study was to assess the thickness of masticatory mucosa on the hard palate and tuberosity as a potential donor site for mucogingival surgery. Thickness measurement was performed in 30 dental college students who are periodontally healthy, with a recently developed, ultrasonic device(SDM). The mean age of study subjects was 23.7(range 21-29) years old and the subjects were composed of 18 males and 12 females. Eighteen standard measurement points were defined on the hard palate, located on 3 lines which ran at different distances parallel to the gingival margin. Six positions were designated on each of these 3 lines between the level of the canine and the second molar. On the tuberosity, 6 standard measurement points were defined, located on 2 lines running parallel to the gingival margin at different distances. Data were analyzed to determine differences in gender, between different positions, and between lines, by an analysis of variance. The results showed that the mucosa of the tuberosity was significantly thicker than that of the hard palate region. Gender did not influence the thickness of masticatory mucosa, either on the hard palate or the tuberosity. On the hard palate, mucosa thickness increased as the distance from the marginal gingiva increased. The mucosa over the palatal root of the maxillary first molar was significantly thinner than that at all other positions on the hard palate. Measurement error at palate was 0.25mm, at tuberosity 0.51mm. No difference in the thickness of masticatory mucosa on palate and tuberosity was found between men and women. On the hard palate, soft tissue thickness progressively increased in sites further from the gingival margin. Therefore, we may harvest more thicker graft on the tuberosity that has more masticatory mucosa thickness than hard palate, however the width may not be sufficient for using.
This study was performed to evaluate the effects of extracts of Drynariae Rhizoma on the characteristics of rat calvaria cells(RCV) and bone marrow cells(RBM) which have the important role on the bone formation in vitro. Drynariae Rhizoma has been known as the useful herbal medicament for treatment of the wound healing including regeneration of bone fracture, and also has been used to treat the periodontal lesions, tooth mobility, gingival bleeding and pus discharge via sulcus in Oriental Medicine. In control group, the cells were cultured alone with Dulbeco's Modified Eagle's Medium contained with 10% fetal bovine serum, 100U/ml penicillin, $100{\mu}g/ml$ streptomycin, $0.5{\mu}g/ml$ amphotericin-B. In experimental group, extracts of Drynariae Rhizoma(0.1, 1, 5, 10, $50{\mu}g/ml$) were added into the above culture condition. And then each group was characterized by examing the cell proliferation at 1, 3, 7, 14, 21, 30th day, the amount of total protein synthesis and alkaline phosphatase activity of RCV at 2,4th day and those of RBM at 3, 6th day. And also, the calcified nodule of RCV was examed at 3, 5th day in three goup, control, experimental, culture with the PDGF group. The results were as follow ; 1. Both RCV and RBM cells in Drynariae Rhizoma-treated experimental group proliferated more rapidly than nontreated control group. The experimental group below $5{\mu}g/ml$ Drynariae Rhizoma-treated showed more prominent cell proliferation from the 7th day to the 21st day than the control group and above $10\;{\mu}g/ml$ treated group in RCV. 2. Amount of total protein synthesis was more increased in Drynariae Rhizomatreated group than in control group. In $5{\mu}g/ml$ Drynariae Rhizoma-treated group showed most prominent protein synthesis of the any other exrperimental group and control group. 3. Alkaline phosphatase activity also more increased in Drynariae Rhizomatreated group than control group. 4. Mineralized nodules in Drynariae Rhizoma-treated group were more than not in control group but also in PDGF-treated group. From the above results, Drynariae Rhizoma appeared to enhanced the proliferation, protein synthesis, alkaline phosphatase activity and cellular ability of mineralized nodule formation than PDGF. So that, we conclude that Drynariae Rhizoma enhances the activities of bone cells which have the important role on the periodontal regeneration and optimal application of Drynariae Rhizoma was thought to be useful as the means in bone regeneration.
The purpose of this study was to assess the effect of polycaprolactone strip with minocycline on the periodontal pocket in humans and the various clinical parameters in rapidly progressive periodontitis. Nine patients with rapidly progressive periodontitis were selected for the study. They had not taken antibiotics for 6 months and had no history of dental treatment for 6 months before the study. They were in good general health. By the split-mouth method, patients received a supragingival scaling, experimental group (9sites) were subjected to subgingival placement of polycaprolactone strips(1 strip) containg 30% minocyclne and control group (9 site) were subjected to subgingival placement of not polycaprolactone strips(1 strip) containing 30 A Minocycline. Strips were replaced with freshly filled ones at 1 week and 2 week. All strips were removed from pockets at 3 week Clinical examination (plaque index, gingival index, probing pocket depth) and distribution on the bacteria morphology of subgingival plaque were monitored on baseline (0 week), 1, week, 2 week, 4 week and 8 week. The result were as follows : 1. Plaque index in experimental group was not significantly reduced during all weeks(P<0.05), but slightly reduced at 2, 4 and 8 weeks and that in control group was not significantly reduced during monitoring period. 2. Probing pocket depth was significantly reduced at 2, 4 and 8 weeks(P<0.05) in experimental group, but that in control group was not siginificantly changed during monitoring period. 3. Gingival index was significantly improved at 2, 4 and 8 weeks(P<0.05) in experimental group but that in control group was not significantly changed. 4. Percentage of cocci was significantly increased at 2, 4 and 8 weeks in experimental group but that in control group was not significantly changed. 5. Percentage of non-motile rods in both group were not significantly changed when compared with those of baseline(0 week) (P<0.05). 6. Percentage of motile rods was siginificantly reduced at 1, 2 and 4 weeks in experimental group (p<0.05) but that in control group was not significantly changed. 7. Percentage of spirochetes was siginificantly reduced during all weeks(P<0.05) but that in control group was not significantly changed. The result showed that polycaprolactone containing 30% minocycline effect the clinical index and bacterial morphotype.
Purpose: Chitosan & chitosan derivative(eg. membrane) have been studied in periodontal regeneration, and recently many studies of chitosan have reported good results. If chitosan's effects on periodontal regeneration are enhanced, we can use chitosan in many clinical and experimental fields. For this purpose, this study reviewed available literatures, evaluated comparable experimental models. Materials and Methods: Ten in vivo studies reporting chitosan's effects on periodontal tissue regeneration have been selected by use of the 'Pubmed' and hand searching. Results: 1. In Sprague Dawley rat calvarial defect models, amount of newly formed bone in defects showed significant differences between chitosan/chitosan-carrier/chitosan-membrane groups and control groups. 2. In beagle canine 1-wall intrabony defect models, amount of new cementum and new bone showed significant differences between chitosan/chitosan-membrane groups and control groups. The mean values of the above experimental groups were greater than the control groups. Conclusion: The results of this study have demonstrated that periodontal regeneration procedure using chitosan have beneficial effects, which will be substitute for various periodontal regenerative treatment area. One step forward in manufacturing process of chitosan membrane and in use in combination with other effective materials(eg. bone graft material or carrier) may bring us many chances of common use of chitosan in various periodontal area.
2단계 임플란트 수술법에 있어서 식립 후 골유착을 위한 치유과정 중 발생할 수 있는 덮개나사의 노출의 양상에 따른 조기 변연골 흡수 정도를 관찰하고자 하였다. 덮개나사의 노출을 보인 경우에서 선정 기준에 맞는 환자를 선택해 모집단으로 하여, 28명의 환자에서 덮개나사의 노출이 확인된 28개의 임플란트를 실험군으로 하고 노출되지 않은 나머지를 대조군으로 하였다. 총 64개의 임플란트 고정체($TiUnite^{TM}$, NobelBiocare, Sweden)가 식립되었으며 임플란트 식립 1개월 후 정기검사를 통해 덮개나사의 노출을 확인하였다. 노출의 정도에 따라 1군(대조군, 노출 없음), 2군(pin-point 노출), 3군(1/2이하의 노출), 4군(1/2 이상 노출), 5군(완전 노출)으로 하였고 2개월 정기 검진 시 치유지대주를 연결하였다. 식립 직후, 2개월 정기 검진시 치근단 방사선 촬영을 통해 변연골 흡수 변화량을 측정하고 비교하여 다음의 결과를 얻었다. 1. 덮개나사의 노출시 변연골 흡수가 관찰되었다. 2. 2군과 3군은 나머지 군에 비해 변연골 흡수 변화량이 유의하게 증가하였다(P <.05). 3. 4군과 5군은 1군에 비해 변연골 흡수 변화량이 유의하게 증가하였으나(P <.05), 그 정도는 2군과 3군에 비해 작았다(P <.05). 이상의 결과에서 임플란트 식립 후 치유과정 중 발생하는 덮개나사의 노출은 조기 변연골 흡수에 기여하므로 주기적인 검진을 통해 치유지대주를 연결하는 것이 임상적으로 적절하리라 사료된다.
Cytotoxic substances in dental calculus and root cementum of periodontally diseased teeth inhibit new attachment and regeneration. The purpose of scaling and root planing is to remove pathologic structures harboring these cytotoxic substances in order to create a biologically acceptable root surface. However, these procedures inevitably leave a non-biocompatible smear layer. Conventionally, the smear layer has been removed with low pH etching agents such as citric acid, phosphoric acid and tetracycline hydrochloride(TC). Lately, a supersaturated neutral pH etching solution of ethylene diamine tetraacetic acid(EDTA) has been found to be as effective as low pH etchants with respect to smear removal and to be superior in exposing root surfaceassociated collagen. The aim of the present study was to determine the effect of root surface treatment using EDTA on the initial attachment of human gingival fibroblasts. 27 human teeth, extracted due to severe periodontitis, were cut into dentin slices after root planing. The specimens were divided into TC group(treated with $50㎎/m{\ell}$ tetracycline-HCl, pH 1.52), EDTA group(treated with 17% EDTA, pH 7.4), and non-treated control group. After sterilization, 5th subcultured human gingival fibroblasts were seeded in each culture well containing a prepared root slice and incubated for 15 min., 60 min., and 4 hours in 5% $CO_2$ incubator at $37^{\circ}C$. At each incubation time, the number of attached fibroblasts were counted on the microphotographs taken at a magnification of x100. The difference of the number of attached cells between groups was statistically analyzed by the ANOVA followed by Duncan test in SPSS/PC+programs. The results were as follows : 1. After incubation for 15 min, the attached cells were significantly more in EDTA group and TC group than non-treated control group(p<0.05), but there was no significance in the difference between EDTA group and TC group(p>0.1). 2. After incubation for 60 min and 4 hours, there was no significant difference in the number of attached cells between all groups(p>0.1). 3. In both EDTA group and TC group, there was no significant difference in the number of attached cells between different incubation(p>0.1). But in control group, the number of attached cells was significantly increased after incubation for 60 min, compared with incubation for 15 min(p<0.05). The above results suggest that root surface treatment using EDTA could enhance the initial attachment of gingival fibroblasts to root surface as effective as tetracycline-HCl.
Inorganic bovine bone mineral has been widely researched as bone substitution materials in orthopedic and oral and maxillofacial application. OCS-B(NIBEC, Korea) is newly-developed inorganic bovine bone mineral. The aim of this study is to evaluate the safety and efficacy of bovine bone-derived bone graft material(OCS-B). Micro-structure of newly-developed inorganic bovine bone mineral(OCS-B) was analyzed by scanning electron microscope(SEM). Round cranial defects with eight mm diameter were made and filled with OCS-B in rabbits. OCS-B was inserted into femoral quadrant muscle in mouse. In scanning electron microscope, OCS-B was equal to natural hydroxyapatite. Rabbits were sacrificed at 2 weeks and 4 weeks after surgery and mice were sacrificed at 1 week and 2 weeks after surgery. Decalcified specimens were prepared and observed by microscope. In calvarial defects, osteoid and new bone were formed in the neighborhood of OCS-B at 2 weeks after surgery. And at 4 weeks after surgery osteoid and new bone bridge formed flourishingly. No inflammatory cells were seen on the surface of OCS-B at 1 week and 2 weeks in mouse experimental group. It is concluded that newly-developed inorganic bovine bone mineral(OCS-B) is a flourishing bone-forming material and biocompatible material.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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