As expected, the expression of denitrifying genes in a Typha wetland (relatively stagnant compared to other ponds), showing higher nitrogen removal efficiency in summer, was affected by temperature. The abundance and gene transcripts of nitrate reductase (narG), nitrite reductase (nirS), nitric oxide reductase (norB), and nitrous oxide reductase (nosZ) genes in seasonal sediment samples taken from the Acorus and Typha ponds of free surface flow constructed wetlands were investigated using quantitative polymerase chain reaction (Q-PCR) and quantitative reverse transcription PCR (Q-RT-PCR). Denitrifying gene copy numbers ($10^5-10^8$ genes $g^{-1}$ sediment) were found to be higher than transcript numbers-($10^3-10^7$ transcripts $g^{-1}$ sediment) of the Acorus and Typha ponds, in both seasons. Transcript numbers of the four functional genes were significantly higher for Typha sediments, in the warm than in the cold season, potentially indicating greater bacterial activity, during the relatively warm season than the cold season. In contrast, copy numbers and expression of denitrifying genes of Acorus did not provide a strong correlation between the different seasons.
A denitrifying polyphosphate-accumulating bacterium (YKP-9) was isolated from activated sludge of a 5-stage biological nutrient removal process with step feed system. This organism was a Gram-negative, coccus-shaped, facultative aerobic chemoorganotroph. It had a respiratory type of metabolism with oxygen, nitrate, and nitrite as terminal electron acceptors. The 16S rRNA gene sequence of strain YKP-9 was most similar to the 16S rRNA gene sequence of Paracoccus sp. OL18 (AY312056) (similarity level, 97%). Denitrifying polyphosphate accumulation by strain YKP-9 was examined under anaerobic-anoxic and anaerobic-oxic batch conditions. It was able to use external carbon sources for polyhydroxyalkanoates(PHA) synthesis and to release phosphate under anaerobic condition. It accumulated polyphosphate and grew a little on energy provided by external carbon sources under anoxic condition, but did neither accumulate polyphosphate nor grow in the absence of external carbon sources under anoxic condition. Cells with intracellular PHA cannot accumulate polyphosphate in the absence of external carbon sources under anoxic condition. Under oxic condition, it grew but could not accumulate polyphosphate with external carbon sources. Based on the results from this study, strain YKP-9 is a new-type denitrifying polyphosphate-accumulating bacterium that accumulates polyphosphate only under anoxic condition, with nitrate and nitrite as the electron acceptors in the presence of external carbon sources.
The diversity of the denitrifying bacterial populations in Daejeon Sewage Treatment Plant was examined using a culture-dependent approach. Of the three hundred and seventy six bacterial colonies selected randomly from agar plates, thirty-nine strains that showed denitrifying activity were selected and subjected to further analysis. According to the morphological and biochemical properties, the thirty nine isolates were divided into seven groups. This grouping was supported by an unweighted pair group method, using an arithmetic mean (UPGMA) analysis with fatty acid profiles. Restriction pattern analysis of 16S rDNA with four endonucleases (AluI, BstUI, MspI and RsaI) again revealed seven distinct groups, consistent with those defined from the morphological and biochemical properties and fatty acid profiles. Through the phylogenetic analysis using the 16S rDNA partial sequences, the main denitrifying microbial populations were found to be members of the phylum, Proteobacteria; in particular, classes Gammaproteobacteria (Aeromonas, Klebsiella and Enterobacter) and Betaproteobacteria (Acidovorax, Burkholderia and Comamonas), with Firmicutes, represented by Bacillus, also comprised a major group.
Biodegradation of an explosive compound, glyceryl trinitrate (GTN), was studied with a denitrifying microbial culture grown in a sequencing batch reactor and a GTN acclimated denitrifying culture. The GTN acclimated culture, which were fed on GTN for 1 month, degraded GTN regioselectively via denitration on C1 position as compared to C2 position denitration by denitrifying culture that has never been exposed to GTN. Accumulation of two isomeric glyceryl dinitrates (GDNs) in both culture medium suggests that GDN denitration is the rate-limiting step in GTN biodegradation. The first order GTN degradation rate normalized to cell concentration of the acclimated culture was calculated to be 0.045 (${\pm}0.002$) L/g-hr. Increasing concentration of electron acceptor(nitrate) resulted in discouraged GTN degradation. According to microbial community analysis, prolonged GTN exposure resulted in 25% increase in the genus level of the GTN acclimated culture with the disappearance of two dominating denitrifying microbial species of Methyloversatilis universalis and Hyphomicrobium zavarzinii in the denitrifying culture.
Biodegradation of carbon tetrachloride (CTC) in denitrifying and aerobic columns was investigated under various conditions of electron-acceptor and electron-donor availability. CTC removal increased when the electron-acceptor (nitrate) injection was stopped in the denitrifying column; however, CTC remova1 decreased when electron donor (acetate) was deleted in the denitrifying and the aerobic column. Small fractions of the CTC removed appeared as chloroform, indicating that reductive dechlorination of CTC was occurring. The results from the denitrifying column support the hypothesis that CTC behaves as an electron acceptor that competes for the pool of available electrons inside the bacterial cells.
Leaking underground storage tanks are a major source of groundwater contamination by petroleum hydrocarbons. Aerobic bioremediation has been highly effective in the remediation of many fuel releases. However, Bioremediation of aromatic hydrocarbons in groundwater and sediments is ofen limited by the inability to provide sufficient oxygen to the contaminated zones due to the low water solubility of oxygen. Nitrate can also serve as an electron acceptor and results in anaerobic biodegradation of organic compounds via the processes of nitrate reduction and denitrification. Because nitrate is less expensive and more soluble than oxygen. it may be more economical to restore fuel-contaminated aquifers using nitrate rather than oxygen. And denitrifying bacteria are commonly found in the subsurface and in association with contaminated aquifer materials. These studies have shown that BTEX and MTBE can be degraded by the nitrate-amended microcosms under aerobic and anaerobic conditons. Biodegradation of the toluene and ethylbenzne compounds occurred very quickly under denitrifying conditions. MTBE, benzene and p-xylene were recalcitrant under denitrifying conditions in this study, But finally Biodegradaton was observed for all of the test compounds.
Enhanced biological phosphorus removal (EBPR) behavior and microbial characteristics in the anaerobic-aerobic SBR (PAO SBR) and the anaerobic-anoxic SBR (DPAO SBR) were examined in this research. For 392 days of operation, both SBRs have exhibited a good EBPR (or denitrifying EBPR) performance. $P_{release}/P_{influent}$ ratio was highest in both reactors after the stabilization, while the efficiency of phosphorus removal was decreased since the sludge granulation has been visually observed within the reactor. The comparative analysis of Pyrosequencing-based microbial population between PAO and DPAO sludges showed indirectly that Dechloromonas spp. could utilize $O_2$ and $NO_3{^-}-N$ as an electron acceptor and Accumulibacter phosphatis use only $O_2$ in EBPR system. Also, we concluded that Thauera spp. as a denitrifier contribute significantly to the anoxic phosphorus removal in the DPAO system.
Denitrification is an important biological mechanism in wastewater treatment process because this process is technically to remove nitrogen from water to air. There have been lots of study about denitrification engineering and molecular biological research about denitrifying bacteria, respectively. However, combination of these researches was unusual and rare. This study is about the correlation between quantity of denitrifying bacteria and denitrification potential, and consists of NUR batch test as analysis method of denitrification potential and quantitative molecular analysis for denitrifying bacteria. Three reactors (A/O, MLE and A/O of nitrogen deficiency) are operated to get activated sludge with various denitrification potential. All samples which were acquired from reactors were measured denitrification potential by NUR test and NUiR test. Also, Real-time PCR was conducted for quantification of denitrifying bacteria composition in activated sludge. The various denitrification potentials were measured in the reactors. The denitrifiaction potential was the highest in MLE process and the reactor of the nitrogen deficiency showed the lowest. Genomic DNA of activated sludge was obtained and consequently, real-time PCRuse the primer sets of nirK and nirS were conducted to quantify genes involving denitrification reductase production. As the result of real-time PCR, nirK gene showed more significant influence on denitrification potential comapred with nirS gene.
혐기-무산소조건으로 구성된 회분식 반응조에서 질산염을 이용하여 인(P)도 동시에 제거될 수 있는 가능성을 알아보기 위해서 인의 제거 양상을 혐기-호기조건의 반응조와 비교하여 조사하였고, 질산염과 인을 동시에 제거하는 미생물분포를 분석하였다. 그 결과 비교적 낮은 농도의 유기물이 적용되었을 때(평균 CODcr=130mg/ι)두 반응조 모두 인이 효과적으로 제거되었으며 반응조내의 최종 인의 농도를 1 mg P/L. 이하로 유지하였다. 특히, 질산염을 전자수용체로 이용한 혐기-무산소조건의 반응조는 기존의 영양소제거 시스템과 비교하여 5-7 mg (P+N)/ι의 영양소를 추가적으로 제거하여 유기물의 효과적 인 이용이 가능한 것으로 판명되었다. 혐기-무산조 조건의 방응조내 미생물 분포를 조사 한 결과 질소원을 제거하는 미생물군(denitrifying bacteria)과 인을 제거하는 미생물군(polyphosphate accumulating bacteria)이 함께 존재하고 있음이 밝혀졌고, 이들 중 $\beta$-proteobacteria에 속하는 Zoogloea ramigera와 Rhodocyclus에 포함되는Alcaligenes defragrans 등은 탈질능력 이 있으면서 anoxic상태에서 인을 동시에 축적할 수 있는 탈질-탈인균주(denitrifying phosphate accumulating organisms; dPAO)로 조사되었다.
농법에 따른 토양성분과 $N_2O$ 발생량, 탈질세균 수, 탈질세균의 군집 구조와 T-RFLP 패턴을 계절별로 조사하였다. 토양성분 분석결과 총 탄소량과 총 유기탄소량은 유기농법에서 각각 1.57%, 1.28%, 무농약 농법은 1.52%, 1.24%, 관행농법은 1.40%, 0.95%로 친환경농법에서 유기 탄소량이 비교적 높게 나타났다. $N_2O$ 발생량은 5월과 11월 토양이 높았지만 속도는 8월 토양이 빨랐다. 탈질세균 수는 유기농토양은 평균 $1.32{\times}10^4MPN/g$,무농약 토양은 평균 $1.17{\times}10^4MPN/g$, 관행농 토양은 평균 $6.29{\times}10^3MPN/g$으로 친환경농법 토양이 관행농법 토양에 비해 탈질세균 수가 많은 것을 확인하였다. 계통수 분석 결과, 전체 10개 Cluster 중 유기농법 토양이 6개의 Cluster에 분포되어 친환경 농법 토양이 다양한 군집을 갖는 것을 확인하였다. T-RFLP 패턴의 PCA profile 분석 결과, 유기농법은 넓은 분포를, 관행농법은 좁은 범위의 분포를 나타내고, 무농약농법은 유기농법과 관행농법의 중간에 분포하는 것으로 확인되었다. 따라서 계절과 농법에 따라 탈질세균의 분포와 군집구조가 달라지는 것을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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