The role of glyoxylate bypass in a lysine-producing Corynebacterium lactofermentum strain was analyzed. Unlike the wild type, the strain expressed enzymes of glyoxylate bypass during growth in the fermentation broth containing glucose as the carbon source. To evaluate the importance of glyoxylate bypass in the strain, we disrupted chromosomal aceA by using a cloned fragment of the gene. Site-specific disruption of aceA which codes for the isocitrate lyase, the first enzyme of the bypass, was confirmed by Southern blot analysis. The aceA mutant strain completely lost isocitrate lyase activity and ability to grow in a minimal medium containing acetate as the sole carbon source. The mutant strain was similar to its parental strain in growth characteristics and produced comparable amounts of lysine in shake flasks containing glucose as the carbon source. The amount of oxaloacetate accumulated in the fermentation medium was similar for both strains, suggesting that expression of glyoxylate bypass does not necessarily lead to the increase in intracellular oxaloacetate. These data clearly demonstrate that glyoxylate bypass does not function as one of the routes of carbon supply for lysine production in the strain. It appears that the leakiness of the glyoxylate bypass in the strain might be the result of a secondary mutation which arose during previous strain development by random mutagenesis.
Osteocalcin is a vitamin K dependent and bone specific protein which plays an important role in the regulation of bone and calcium metabolism. In this study, we evaluated the relationship between the C298T polymorphism in the osteocalcin gene and bone mineral density (BMD) in Korean young men and their interaction with physical activity. BMDs of the femoral neck and lumbar spine were measured using dual energy X-ray absorptiometry, and the C298T polymorphism in the osteocalcin gene determined using polymerase chain reaction (PCR)-HindIII restriction fragment length polymorphism (RFLP) method. We did not observe any significant differences in the femoral neck and lumbar spine BMDs across genotypes of this polymorphism in controls, athletes or combined groups, respectively (P>0.05). Therefore, our data suggest that the C298T polymorphism in the osteocalcin gene is not a suitable genetic marker for the susceptibility to BMD.
Mass spectrometry (MS) is a very powerful instrument that can be used to analyze a wide range of materials such as proteins, peptides, DNA, drugs, and polymers. The process typically involves either chemical or electron (impact) ionization of the analyte. The resulting charged species or fragment is subsequently identified by the detector. Usually, single mass uses source-induced dissociation (SID), whereas mass/mass uses collision-induced dissociation (CID) to analyze the chemical fragmentations Each technique has its own advantages and disadvantages. While CID is most effective for the analysis of pure substances, multiple-step MS is a powerful technique to get structural data. Analysis of veterinary drugs ampicillin, chloramphenicol, ciprofloxacin, and oxytetracycline serves to highlight the slight differences between SID and CID. For example, minor differences were observed between ciprofloxacin and oxytetracycline via SID or CID. However, distinct fragmentation patterns were observed for ampicllin depending on the analysis method. Both SID and CID showed similar fragmentation spectra but different signal intensities for chloramphenicol. There are several factors that can influence the fragmentation spectra, such as the collision energy, major precursor ion, electrospray mode (positive or negative), and sample homogeneity. Therefore, one must select a fragmentation method on an empirical and case-by-case basis.
An isolate of Cucumber mosaic virus (CMV), PaFMl-CMV causing malformation on the fruit of paprika (Capsicum annuum var, grossum) was characterized based on biological reactions, serological relationships, and partial nucleotide sequence analyses. PaFMl-CMV was distinguishable from other isolates of CMYI Mf-(subgroup I) and LS-CMV (subgroup II), in terms of its reactions to some host plants. Polyclonal antibody against PaFMl-CMV showed homologous antigenic relationship with LS-CMV, however, the antibody formed a spur between PaFMl- and Mf-CMV, In the comparison of molecular size of dsRNAs of PaFMl-CMV with Mf- and LS-CMV, PaFMl-CMV had a slightly smaller RNAl and larger RNA2, RNA3, and RNA4. When the CDNA product of PaFMl-CMV coat protein (CP) gene was digested with some restriction enzymes, the fragment pattern was identical with that of LS-CMV The nucleotide and amino acid sequences of PaFMl-CMV CP gene were 99.5% and 98.6% identical with LS-CMV respectively. The data indicate that PaFMl-CMV belongs to subgroup II of CMV, which is the first report in Korea.
Al-Daoude, Antonious;Shoaib, Amina;Al-Shehadah, Eyad;Jawhar, Mohammad;Arabi, Mohammad Imad Eddin
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.4
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pp.425-431
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2014
Leaf scald caused by the infection of Rhynchosporium secalis, is a worldwide crop disease resulting in significant loss of barley yield. In this study, a systematic sequencing of expressed sequence tags (ESTs) was chosen to obtain a global picture of the assembly of genes involved in pathogenesis. To identify a large number of plant ESTs, which are induced at different time points, an amplified fragment length polymorphism (AFLP) display of complementary DNA (cDNA) was utilized. Transcriptional changes of 140 ESTs were observed, of which 19 have no previously described function. Functional annotation of the transcripts revealed a variety of infection-induced host genes encoding classical pathogenesis-related (PR) or genes that play a role in the signal transduction pathway. The expression analyses by a semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) revealed that Rar1 and Rpg4 are defense inducible genes, and were consistent with the cDNA-AFLP data in their expression patterns. Hence, the here presented transcriptomic approach provides novel global catalogue of genes not currently represented in the EST databases.
Boonyasiri, Adhiratha;Cheunsuchon, Pornsuk;Srirabheebhat, Prajak;Yamasaki, Hiroshi;Maleewong, Wanchai;Intapan, Pewpan M.
Parasites, Hosts and Diseases
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v.51
no.6
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pp.739-742
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2013
A 52-year-old woman presented with lower back pain, progressive symmetrical paraparesis with sensory impairment, and sphincter disturbance. Magnetic resonance imaging (MRI) of the whole spine revealed multiple intradural extramedullary serpiginous-mass lesions in the subarachnoid space continuously from the prepontine to the anterior part of the medulla oblongata levels, C7, T2-T8, and T12 vertebral levels distally until the end of the theca sac and filling-in the right S1 neural foramen. Sparganosis was diagnosed by demonstration of the sparganum in histopathological sections of surgically resected tissues and also by the presence of serum IgG antibodies by ELISA. DNA was extracted from unstained tissue sections, and a partial fragment of mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (cox1) gene was amplified using a primer set specific for Spirometra spp. cox1. After sequencing of the PCR-amplicon and alignment of the nucleotide sequence data, the causative agent was identified as the larva of Spirometra erinaceieuropaei.
To determine the frequencies of the genotypes of estrogen metabolising enzyme (CYP17, CYP1A1, CYP1B1, and COMT) and to identify the high-risk genotypes of these metabolic enzymes to breast cancer in Korean, the author has analysed 115 breast cancer patients and corresponding age and sex matched heathy controls using polymerase chain reaction-restiction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). A2/A2 genotype in CYP17 polymorphism, m2/m2 genotype in CYP1A1 polymorphism, and Val/Val genotype in CYP1B1 had 0.95, 1.40 and 0.76 relive risks to breast cancer comparing with reference genotypes of each polymorphism, respectively. Among the genotypes of COMT enzyme polymorphism, L/H and L/L genotypes had 0.97 and 1.54 relative risks to breast cancer, respectively. According to the number of high risk genotype, the patients with one or two putative high risk genotypes had 0.95 and 1.94 relative risks to breast cancer, respectively. This study have demonstrated the unique frequency of genotypes of estrogen metabolizing enzyme in Korean healthy women, which will provide the basic data and insights to study the estrogen related conditions in Korean women including breast and endometrial cancers. And it also indicates that the well-known high risk genotypes of estrogen metabolizing enzymes are not significantly associated with the development of breast cancer in Korean women.
The Transactions of the Korean Institute of Electrical Engineers D
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v.55
no.5
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pp.240-247
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2006
Frequent arousals during sleep degrade the quality of sleep and result in sleep fragmentation. Visual inspection of physiological signals to detect the arousal events is cumbersome and time-consuming work. The purpose of this study is to develop an automatic algorithm to detect the arousal events. The proposed method is based on time-frequency analysis and the support vector machine classifier using single channel electroencephalogram (EEG). To extract features, first we computed 6 indices to find out the informations of a subject's sleep states. Next powers of each of 4 frequency bands were computed using spectrogram of arousal region. And finally we computed variations of power of EEG frequency to detect arousals. The performance has been assessed using polysomnographic (PSG) recordings of twenty patients with sleep apnea, snoring and excessive daytime sleepiness (EDS). We could obtain sensitivity of 79.65%, specificity of 89.52% for the data sets. We have shown that proposed method was effective for detecting the arousal events.
The D165539 locus was investigated to collect population genetic data in the Korean population. The selected subject was unrelated 293 Korean people. DNA was extracted from the samples and PCR was performed with fluorescent primer. The amplified fragment was analysed by automated DNA sequencer and it's application software. Among the Korean population, 7 allele and 18 geneotype were observed and allele No. 9 is mostly frequent(0.2679) and then allele No. 11(0.2679), allele No. 9(0.2645). The observed heterozygosity and the expected heterozygosity is 0.7466, 0.7829 each. The polymorphism information content(PIC) is 0.7466. The power of discrimination(PD) and the mean exclusion chance(MEC) are calculated to be 0.9190 and 0.5775.
The optimum blasting pattern to excavate a quarry efficiently and economically can be determined based on the minimum production cost, which is generally estimated according to rock fragmentation. Therefore, it is a critical problem to predict fragment size distribution of blasted rocks over an entire quarry. By comparing various prediction models, it can be ascertained that the result obtained from Kuz-Ram model relatively coincides with that of field measurements. Kuz-Ram model uses the concept of rock factor to signify conditions of rock mass such as block size, rock jointing, strength and others. For the evaluation of total production cost, it is imperative to estimate 3-D spatial distribution of rock factor for the entire quarry. In this study, a sequential indicator simulation technique is adopted for estimation of spatial distribution of rock factor due to its higher reproducibility of spatial variability and distribution models than Kriging methods. Further, this can reduce the uncertainty of predictor using distribution information of sample data. The entire quarry is classified into three types of rock mass and optimum blasting pattern is proposed for each type based on 3-D spatial distribution of rock factor. In addition, plane maps of rock factor distribution for each ground level are provided to estimate production costs for each process and to make a plan for an optimum blasting pattern.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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