Hwang, Sung-Jin;Na, Myoung-Suk;Pyo, Byoung-Sik;Lee, Jong-Bin;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.8
no.3
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pp.250-258
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2000
Hairy root cultures of Rheum undulatum L. induced by a co-culture with Agrobacterium rhizogenes ATCC15834 were established and the production of tannin in hairy roots was investigated. The growth of hairy roots was maximized in WPM liquid medium supplemented with 2 mg/L IAA, and 3% sucrose (pH 5.7). The highest yields of tannin were obtained from WPM medium containing 0.5 mg/L ABA, and 5% sucrose (pH 5.5). The growth and tannin production in hairy root cultures were influenced by the addition of elicitors to the medium. The addition of 50 mg/L chitosan enhanced the production of tannin with about 1.7 fold.
Park, Woo-Tae;Kim, Young-Seon;Park, Nam-Il;Kim, Haeng-Hoon;Lee, Sook-Young;Park, Sang-Un
Korean Journal of Agricultural Science
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v.38
no.2
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pp.213-217
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2011
Agrobacterium rhizogenes, a gram-negative soil bacterium, is one of the most widely studied among them. A, rhizogenes can transfer T-DNA, excised from Ri (root inducing)-plasmids from the bacterial to the plant cell. It is the causal agent of 'hairy root' diseases in plants, and has been used for the production of hairy root cultures from a multitude of species. Five different strains of Agrobacterium rhizogenes differed in their ability to induce Scutellaria baicalensis hairy roots and also showed varying effects on the growth in hairy root cultures. A. rhizogenes R 1000 is the most effective strain for the induction (57.3%) and growth (11.9 g $L^{-1}$) in hairy root of Scutellaria baicalensis. Our results demonstrate that use of suitable strains of A. rhizogenes may allow study of the regulation of flavone biosynthesis in hairy root cultures of Scutellaria baicalensis.
A transformed hairy root clone of Scutellaria baicalensis was established following infection with Agrobacterium rhizogenes ATCC15834. Three root clones of S baicalensis were selected by growth habit and baicalin content. The most active strain-the SR-03 clone-was examined for its growth and baicalin content under various culture conditions. The root growth and baicalin content were maximized in a Schenk and Hildebrandt medium supplemented with 4 and 6% sucrose, respectively. The accumulation of baicalin in transformed hairy roots was enhanced through exposure to various elicitors. Elicitation was attained by the addition of methyl jasmonate, salicylic acid, and various concentrations of fungal cell wall elicitors to the medium. The accumulation of baicalin in the elicited cultures ranged from 10.5 to 18.3 mg/g dry weight of the roots, which was 1.5- to 3-fold the amount attained in controls.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.35
no.4
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pp.995-1002
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2018
Hairy root culture of ginseng is industrially prospected because the cultivation period of ginseng is relatively long. In this study, the effect of medium concentration and sucrose concentration on hairy root culture of ginseng was evaluated. The optimization of ginseng hairy roots transformed by Agrobacterium rhizogene were performed liquid medium. The MS(Murashinge & Skoog basal medium) concentration was selected with 1/2 strength MS and the optimal sucrose concentration was determined at 2-3%(w/v). At the optimum culture condition, The yield (the ratio of weight of grown hairy root cultures to weight of fresh ginseng hairy roots) and production rate of ginseng root were 19.42 times and 5.73 g/l-day. The major ginsenosides were Rb group, Re and Rg1. The produced total ginsenoside content in the solid medium was 9.87 (mg/g) and increased 1.34 times in the liquid medium (13.23 mg/g). In solid culture, the contents of ginsenosides Rb, Re and Rg1 were 2.14, 3.65 and 1.87 mg/g, respectively. In liquid culture, the contents of ginsenosides Rb, Re and Rg1 were 3.54, 4.12 and 2.63 mg/g, respectively.
Paek, Yun-Woong;Hwang, Sung-Jin;Park, Don-Hee;Hwang, Baik
Journal of Plant Biology
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v.39
no.3
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pp.161-166
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1996
The hairy root cultures of Centella asiatica were established by infection leaf explants with Agrobacterium rhizogenes A4, 15834 in 1/2 Murashing and skoog liquid medium supplemented with 50 $\mu$M acetosyringone. The induced hairy roots were subjected to paper electrophoresis for the detection of opine and opine-positive clones which were considered to have been transformed. Five hairy root clones were selected according to the different bacterial strains used, growth rate and pattern. Among media tested, MS basal medium substituted phosphate concentration by 2.5mM K2HPO4 showed the highest growth rate in the dark condition.
Ginseng (Panax ginseng CA. Meyer) hairy root cultures, which are established via the infection of ginseng root discs with Rhizobium rhizogenes, have been used to construct profiles of both biomass growth and nutrient consumption in flask cultures. In a 250 mL shake flask culture, the maximum biomass was observed on the 59th day of the culture period, at 216.8 g (fresh wt) per liter or 11.4 g (dry wt) per liter. The hairy roots were determined to have a growth rate of 0.355 g-DW/g cells/day during the exponential growth phase and a maximum specific growth rate on day 7. Total ginseng saponin and phenolic compound contents were noted to have increased within the latter portion of the culture period. Linear correlations between increases in biomass weight and nutrient uptake were used to imply the conductivity yield $2.60g-DW/(L{\cdot}mS)$ and carbon yield 0.45 g-DW/(g sugar) in the 250 mL flask cultures. The biomass yield when two different nitrogen sources were used (ammonia and nitrate) was shown to remain approximately constant. at $0.47g-DW/(L{\cdot}mM\;NH_4$) and $0.33g-DW/(L{\cdot}mM\;NO_3$); it remained at these levels for 16 days with the ammonia. and for 24 days with the nitrate. The biomass yield when a phosphate source was used was also shown to remain approximately constant for 9 days, at $3.17g-DW/(L{\cdot}mM\;PO_4$), with an $R^2$ of 0.99.
Two new compounds lanast-5,8-dien-3β-ol-27-oic acid-3β-D-glucopyranosyl (4'-1'')-10'',11''-dimethoxy anthracene (1), 2-methoxy-6-(n-nonacontan-5'',6''-dionyl)-11-hydroxy-13-methyl-11β-D-rhamnopyranoside anthracene (2) have been isolated from the hairy root cultures of Catharanthus roseus. Their structures have been elucidated with the help of 500 MHz NMR using one- and two-dimensional NMR in combination with IR, EI/MS, FAB/MS and HRFABMS spectroscopy.
The effects of media and elicitors on betalain, phytolaccoside G and D2 production were examined in the hairy roots of Phytolacca esculenta van Houtte induced by Agrobacterium tumefaciens $A_4$T. Phytolaccoside G and D2 from Phytolacca hairy roots PEH2 were identified by TLC, HPLC, IR, Mass, $^1$H-NMR, and ^(13)C-NMR. Among the culture media tested, SH medium was the best for hairy root growth of hairy roots. White medium was the most suitable medium for betalain production, while MS medium was for phytolaccoside G and D2 production. Although the growth of hairy roots was supped by light (1,000 Lux), the production of betalain, phytolaccoside G and D2 was enhanced by the same light treatment. Addition of elicitors such as NaF, chitosan, and yeast extract to the culture medium increased the content of betalain, phytolaccoside G and D2, suggesting the importance of culture condition for the production of those componds.
This article was conducted to induce the transgenic hairy roots and determine the effect of culture conditions on optimum growth of hairy roots by Agrobacterium rhizogenes strain, 15834 in Lycium chinense Miller. Hairy roots of L. chinense Miller. were induced from leaf segments by co-cultivation with A. rhizogenes. When the hairy roots were cultured in various MS medium strength and sucrose concentrations, the highest growth of hairy roots was observed in half-strength MS media supplemented with 3% sucrose, respectively. In air lift bioreactor cultures, the liquid medium contained with 1/2 MS and 3% sucrose was also the best for optimum growth of hairy roots.
New methods have been developed to transform Panax ginseng with Ri plasmids of Agrobacterium rhizogenes 15834 and A. rhizogenes A4. Modified leaf disc method was made feasible to establish hairy root culture even when an axonic plantlet was not available as in the case of P. ginseng. The contents of ginsenosides (Rgl, Rf, Rc, Rbl, and Rb2) in hairy roots. were determined by HPLC. Hairy root cultures, established as liquid culture in MS medium, was produced 0.34~1.19% ginsenosides on dry weight basis, and this result is significantly higher level than that of normal P. ginseng.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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