This study investigated the relaxation effects of Crataegi Fructus(CF, Crataegus pinnatifida Bunge) on the contraction evoked by phenylephrine in rabbit carotid artery, and also analyzes antioxidative status in vitro. CF revealed siginificant relaxation on phenylephrine-induced arterial contraction. It's relaxant effect statistically significant in both in the presence of endothelium and absence of endothelium, but statistically exerted more strong relaxation in the presence of endothelium. CF increased in vitro nitric oxide(NO) production in dose-dependent manner. Also, they reduced malondiaidehyde(MDA) concentrations, phosphatidyl choline-liposome(PCOOH) contents, linoleic acid-induced lipid peroxidation and exerted 1,1-diphenyl-2- picryl-hydrazyl(DPPH) radical scavenging effect, in vitro. These results indicate that Crataegi Fructus would be effective in relaxing arterial contraction and it's antioxidative effects may be involved in endothelium-dependent relaxation of artery via vascular protective properites.
The hawthorn fruit (Crataegus pinnatifida Bunge var. typica Schneider) is used as a traditional medicine in Korea. The objective of this study was to understand the mechanisms of the anti-inflammatory effects of the water fractionated portion of hawthorn fruit on a lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cellular model. The level of nitric oxide (NO) production in the water fraction and LPS-treated RAW 264.7 cells were determined with an ELISA. The cytotoxicity of the water fraction and LPS was measured with an MTT assay. Expression of nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin 6 (IL-6), and interleukin $1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$) mRNA were analyzed with a reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The water fraction of hawthorn fruit was determined to be safe and significantly inhibited NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells and suppressed COX-2, (TNF)-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and IL-6 expression. The observed anti-inflammatory effects of the water fraction of hawthorn fruit might be attributed to the down-regulation of COX-2, (TNF)-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, and IL-6 expression in LPS-stimulated RAW 264.7 cells.
Hawthorn is widely distributed in Korea and has been used as herbal medicine for treating various cardiovascular disease, arteriosclerosis and hypertension in Korea. In order to select superior honey tree plant from Korea, the free sugar and organic acid in hawthorn fruits, including five Korean clones and four Chinese cultivars, were evaluated. We also compared these hawthorn fruits of five clones (selected from different area of Korea) with Chinese hawthorn cultivars. Glucose, galactose, fructose and sucrose were the major sugar components of hawthorn. In this study, we observed that sucrose, glucose and fructose content. The highest sucrose content of hawthorn fruit was 188.12g/100g in Daegeumseong cultivar. The sweetness index, which plays important role of taste, was also calculated from the content of sucrose, glucose and fructose. The contribution of each carbohydrate was calculated, based on the fact that fructose is 2.30 and sucrose 1.35 times sweeter than glucose. The highest sweetness of hawthorn fruit was 579.52 in Pocheon clone. Main organic acid detected in hawthorn fruit were citric acid, malic acid and shikimic acid. The highest citric acid and malic acid content in hawthorn fruit were 157.50g/100g (Pocheon 3) and 34.12g/100g (Daegeumseong), respectively. The results of this study would be helpful for using food and functional food products, due to the beneficial effects of free sugar and organic acid for human health such as antioxidants and anticarcinogenic properties.
It had been known for a while that Crataegi Fructus(CF; Crataegus pinnatifida Bunge) had only a digestive effect. Recently, it has been demonstrated that CF also has an anti-hypertensive effect. However, its mechanism of relaxant effect has not been investigated yet. This study was examined to investigate the mechanism of vascular relaxation effect of CF in isolated rat thoracic aorta. CF revealed significant relaxation to phenylephrine(PE)-induced arterial contraction but much less to KCI-induced one. When CF was pretreated, it inhibited PE-induced contraction non-competitively. Methylene blue(10/sup -6/M) completely blocked the relaxant effect of CF whereas L-NAME(10/sup -5/M) did almost completely. However, atropine(10/sup -6/M) did not have any influence on vascular relaxation effect of CF. Regarding cNOS activity, CF significantly increased its activity from rat whole brain homogenate in a dose dependent manner which was inhibited by L-NAME(10/sup -5/M). On the other hand, CF did not affect on expression of TNF-α mRNA in RAW 264.7 cells, suggesting that CF is not related to iNOS activity. These results indicate that CF would be effective in relaxing vascular contraction through release of endothelial nitric oxide.
16종의 한약재 및 약용식물류의 열수 추출물에 대한 흡광도, 총페놀화합물 및 플라보노이드 함량과 이들의 항산화 효과를 분석하였다. 추출수율은 단삼이 $35.49\%$로 다른 시료에 비하여 월등히 높았으며 pH는 $4.00\~5.92$의 범위로 산성 pH에 더 가까웠다. 방향족 화합물의 함량을 검색하고자 $250{\mu}g/mL$농도의 시료로 280 nm에서 흡광도를 측정한 결과 꿀풀이 2.872로 가장 높았으며 엉겅퀴와 산사육, 산조인은 0.5이하의 낮은 흡광도를 나타내었다. 갈색화 반응 생성물의 흡광도를 측정한 결과도 유사한 경향을 나타내어 꿀풀의 경우 1.312로 가장 높은 값을 다음은 옥수수수염 (0.917), 금물초(0.725) 순이었다. 총 페놀 화합물의 함량은 꿀풀이 $5.07{\pm}0.05mg/100g$으로 다른 시료에 비하여 월등히 높은 함량이었고 플라보노이드의 함량은 단삼에서 $4.82{\pm}1.16\;mg/100g$으로 다른 시료에 비하여 약 2배 정도 높은 함량이었다. 대부분의 시료에서 농도가 증가함에 따라 전자공여 효과도 높아지는 경향을 보였는데 산조인, 산수유, 단삼은 $1000{\mu}g/mL$의 농도에서 $90\%$ 이상의 전자공여 효과를 나타내었다. 환원력도 전자공여능과 유사한 경향이었으나 BHT와 비교할 때 유의적으로 낮은 환원력을 나타내었다. 아질산염 소거능은 $500{\mu}g/mL$의 농도에서 $50\%$ 이상의 소거효과를 나타낸 시료는 꿀풀과 금물초 2종에 불과하였으며 $1000{\mu}g/mL$의 농도에서는 산조인, 산수유, 감국, 꿀풀, 금물초, 오가피, 단삼, 울금이 $50\%$ 이상의 소거효과를 나타내었다. 꿀풀의 경우 전 농도에서 다른 시료들에 비하여 유의적으로 높은 아질산염 소거효과를 나타내어 $250{\mu}g/mL$에서는 $59.62{\pm}1.573\%,\;1000{\mu}g/mL$에서는 $80.58{\pm}0.300\%$의 소거효과를 보였다.
본 연구에는 항비만소재로 연구되어진 11종의 소재를 대상으로 lipoprotein lipase (LPL)의 억제효능을 확인하고자 배양배지내 LPL의 함량과 LPL 효소활성을 측정하였다. 그 결과 3T3-L1 adipocyte에서 LPL의 분비를 억제하는 소재로 능이추출물(NE)을 선택할 수 있었다. 선택된 NE의 폴리페놀과 플라보노이드 함량을 측정한 결과 $16.61{\pm}0.44mg/g$과 $6.58{\pm}0.01mg/g$이 각각 확인되었다. NE의 LPL 분비억제기작을 확인하기위해 먼저 세포내 LPL단백질의 함량과 mRNA 발현을 확인하였다. 그 결과 함량이 감소했던 배양배지와는 다르게 NE를 처리한 3T3-L1 adipocyte의 세포내 LPL은 유의하게 증가한 것을 확인할 수 있었으며 mRNA의 발현에는 영향이 없음을 관찰할 수 있었다. 이를 바탕으로 생성된 LPL 단백질의 exocytosis에 문제가 발생했을 것으로 유추하고 다양한 단백질 이동 관련 유전자의 발현을 확인하였다. 그 결과 LPL의 이동과 분해에 관여하여 세포내 LPL의 활성을 조절하는 것으로 알려진 SorLA의 발현이 증가하는 것을 확인하고 이를 조절하는 transcription factor의 발현과 nuclear로의 이동에 NE가 미치는 영향을 검토하였다. 그 결과 NE를 처리함으로써 SorLA promoter에 작용하는 $C/EBP{\beta}$의 단백질 발현이 nuclear에서 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 본 연구를 통해 NE가 SorLA 유전자의 transcription factor인 $C/EBP{\beta}$의 단백질 발현을 nuclear에서 증가시킴으로서 결과적으로 LPL의 분비억제가 가능함을 확인할 수 있었으며 이는 NE의 항비만 효과기전을 설명하는 기초자료를 제공하는 것이라 사료된다.
마늘과 한약재(결명자, 하수오, 영지 및 산사육) 복합물의 항산화능과 콜레스테롤을 급이한 흰쥐에 이를 급이하였을 때 간장 조직 중 지질 함량에 미치는 영향을 분석하였다. 한약재의 총 페놀 및 플라보노이드 함량은 151.02 mg/100 g 및 43.69 mg/g으로 결명자에서 가장 높았다. 마늘과 한약재 복합물의 전자공여능, 환원력 및 hydroxyl radical 소거능은 마늘 추출물 첨가량이 0.3% 이상일 때 첨가량에 따른 유의적인 차이를 보였다. $\beta$-carotene 존재 시 linoleic acid에 대한 항산화능은 마늘 추출물의 첨가량에 의존적으로 증가되었다. 콜레스테롤을 급이한 흰쥐에 마늘과 한약재 복합물을 급이하였을 때 총 지질의 함량은 대조군에 비해 유의적으로 감소되었으며, 마늘추출물의 0.7%첨가군(G-0.7%)에서 가장 낮았다. 총 콜레스테롤은 대조군에서는 14.95 mg/g이었는데, 마늘과 한약재 복합물 급이 후 11.47~11.86 mg/g으로 대조군에 비해 감소되었다. 중성지방은 마늘 추출물의 0.7% 첨가군에서 46.42 mg/g으로 0.3% 및 0.5%의 마늘 추출물 급이군에 비해 유의적으로 낮은 함량이었다. 마늘과 한약재 복합물 급이군에서 TBARS함량은 0.5~0.7%의 마늘 추출물 급이시 대조군에 비해 약 15.8~17.6% 감소되었다. 항산화능은 마늘 추출물을 0.5% 이상 첨가한 실험군에서 대조군에 비해 유의적으로 높았다. 본 실험결과로 볼 때 마늘과 한약재 복합물의 급이는 콜레스테롤급이 흰쥐의 간장조직의 지질 축적 저하에 효과적이라고 생각되어진다.
본 연구는 산약, 행인, 산사자, 지실 등 4종류의 한약재를 물과 에탄올로 추출하여 전자공여능, 아질산염소거능 및 암세포 증식억제능을 검토하여 이들을 이용한 기능성 식품제조에 필요한 기초자료를 얻고자 하였다. 전자공여능은 물 추출물 1,000 ppm에서 산약은 14%, 행인은 36%, 산사자는 72% 그리고 지실은 43%였고, 에탄올 추출물의 전자공여능은 1,000 ppm에서 산약은 62%, 행인은 59%, 산사자는 89% 그리고 지실은 42%였다. 4가지 약재 모두에서 물 및 에탄올 추출물 농도가 올라 갈수록 전자공여능도 높아져 1,000 ppm에서 가장 높았고 1,000 ppm에서 물 추출물은 산사자, 지실, 행인 그리고 산약의 순서였으며 에탄올 추출물은 산사자, 행인, 지실 그리고 산약의 순서로 산사자의 전자공여능이 가장 높았고 산약이 가장 낮았다. 산약, 행인, 산사자 및 지실의 아질산염 소거능은 물 및 에탄올 추출물 모두에서 pH가 낮아짐에 따라 아질산염 소거능은 증가하여 pH 1.2에서 가장 높았고 동일한 pH에서는 농도 의존적으로 아질산염 소거능도 증가하였다. pH 1.2에서 물 추출물 1,000 ppm의 아질산염 소거능은 산약이 5%, 행인이 31%, 산사자가 55% 그리고 지실이 45%였고 동일농도에서 에탄올 추출물은 산약이 18%, 행인이 32%, 산사자가 69% 그리고 지실이 52%였다. 물 및 에탄올 추출물 모두에서 산사자 가 가장 높은 아질산염 소거능을 보였고 지실, 행인 그리고 산약의 순서였다. 물 추출물과 에탄올 추출물의 MDA-cell(유방암 세포)에 대한 증식억제능으로 행인과 산사자는 물 추출물보다 에탄올 추출물이 모든 농도에서 유의적으로 높았고 산약과 지실은 에탄을 추출물보다 물 추출물이 높았으나 유의적인 차이는 없었다. 특히 에탄올 추출물 1,000 ppm에서 행인과 산사자의 MDA cell에 대한 증식억제능은 94% 및 69%로 매우 높았다. 물 추출물과 에탄올 추출물의 A549 cell(폐암세포)에 대한 증식억제능은 물 및 에탄올 추출물 모두에서 지실이 가장 높아 물 추출물 1,000 ppm에서 45%였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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