• 제목/요약/키워드: Confocal laser scanning microscope

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Colonization and Population Changes of a Biocontrol Agent, Paenibacillus polymyxa E681, in Seeds and Roots

  • Park, Okhee;Kim, Jinwoo;Ryu, Choong-Min;Park, Chang-Seuk
    • The Plant Pathology Journal
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    • 제20권2호
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    • pp.97-102
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    • 2004
  • Paenibacillus polymyxa E681, with its plant growth promotion and root colonization ability, has been proven to be a promising biocontrol agent of cucumber and barley. This study investigated the attributes related to the movement of bacteria from the seed to the radicle and to the whole root system. It also illustrated the existing form and population changes of the bacteria on seed and root using the scanning electron microscope and confocal laser scanning microscopy. The bacteria invaded and colonized the inside of the seed coat while the seeds were soaked in bacterial suspension. Almost the same number of bacteria on seed surface invaded the inside of the seed coat right after seed soaking. The population densities of E681 increased greatly inside as well as on the surface of the seed before the radicle emerged. The bacteria attached on the emerging radicle directly affected the initial population of newly emerg-ing root. The colonized cells on the root were arranged linearly toward the elongation of the root axis. In addition to colonizing the root surface, strain E681 was found inside the roots, where cells colonized the inter-cellular space between certain epidermal and cortical cells. When the cucumber seeds were soaked in bacterial suspension and sown in pot, the bacterial populations attached on both the surface and inside of the root were sustained up to harvesting time. This means that E681 successfully colonized the root of cucumber and sustained its population density up to harvesting time through seed treatment.

자외선 조사에 의한 모발구조의 형태학적 변화 (Morphological Changes of Hair Structure by UV Irradiation)

  • 김정환;이옥섭;한지숙;신성연;백두현;하병조
    • 대한화장품학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.311-316
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    • 2008
  • 본 연구에서는 모발의 내부 및 외부구조에 자외선이 미치는 영향에 관하여 조사를 수행하였다. 자외선이 조사된 모발의 형태학적 및 화학적 구조의 변화를 알아보기 위해 주사전자현미경(SEM), 투과전자현미경(TEM), 공초점레이져주사현미경(CLSM) 등을 사용하였다. SEM상에서 자외선이 조사된 모발은 자외선에 의한 화학적 산화반응에 의한 표면이 거칠고 부풀어진 형태를 보였다. 이황화결합(disulfide bond)의 산화에 의한 시스테인산(cysteic acid)의 분해로 팽윤부위가 관찰되었다. 또한 자외선 조사에 의해 표면색의 변화를 나타내었다. TEM 분석결과 버진헤어(virgin hair)의 경우에는 매끄러운 표면구조를 나타내었지만, 자외선 조사모발에 있어서는 거칠고 모수질층이 갈라진 형태를 보여주었다. 모피질층에 존재하는 멜라닌 입자의 크기가 감소하고 소실되는 것이 관찰 되었다. CLSM에 의해 3차원적 구조의 입체영상을 얻을 수 있었으며, 광학분할에 의한 버진헤어는 강한 형광을 나타내었지만, 자외선 조사모발은 낮은 형광을 보여주었다. 이는 버진헤어의 경우 자동형광을 나타낼 수 있는 방향족 아미노산이 많이 존재하는데 비해 자외선 조사모발은 방향족 아미노산이 파괴되어 낮게 나온 것으로 여겨진다.

NaCl 수용액에 담근 Hydroxyapatite 코팅된 타이타늄 시편의 표면 변화 (The Surface Characteristic Changes of Hydroxyapatite Coated Ti Disc When Immersed in NaCl Solution)

  • 백연화;김명주;권호범;임영준
    • 구강회복응용과학지
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    • 제28권4호
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    • pp.339-347
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    • 2012
  • Hydroxyapatite 코팅 임플란트의 세포반응성을 증가시키기 위한 다양한 연구들이 진행되어 왔다. 본 연구에서는 Hydroxyapatite 코팅된 타이타늄 시편을 NaCl 수용액에 다양한 기간 동안 담그어 놓았을 때 발생하는 표면거칠기, 표면접촉각, 표면에너지 등의 표면 특성의 변화를 관찰하였다. Hydroxyapatite 코팅 타이타늄 시편을 0.9% NaCl 용액에 담근 후 각각 7일, 14일, 21일간 $37^{\circ}C$를 유지하였다. 담그지 않은 동일한 시편을 대조군으로 하였다.(n=3) 모든 시편을 공기 중에서 완전 건조 후 공초점레이저주사현미경(CLSM)를 이용하여 표면거칠기를 측정하였다. 증류수를 시편 표면에 떨어뜨린 후 표면접촉각을 video contact angle analyzer를 이용하여 측정하였고 세 가지 용액을 떨어뜨려 접촉각을 측정하여 표면에너지를 산출하였다. 표면을 관찰하기 위해 Field Emission-Scanning Electron Microscope 촬영을 시행하였다. 본 연구 결과 Hydroxyapatite 시편을 Nacl 수용액에 담그는 간단한 방법을 통해 표면거칠기 및 친수성이 증가하는 것을 관찰할 수 있으며, 이러한 표면특성의 개선을 통하여 세포반응성이 증가하는 것을 기대할 수 있다.

일반적 수정과 세포질내 정자주입법에 의해 수정에 실패한 인간난자의 미세소관과 염색체의 형태이상 (Aberrant Microtubule Assembly and Chromatin Configuration of Homan Oocytes Which Failed to Complete Fertilization Following In Vitro Fertilization and Intracytoplasmic Sperm Injection)

  • Chung, H. M.;Kim, N. H.;Kim, J. W.;J. M. Lim;Park, C.;J. J. Ko;K. Y. Cha;Kim, J. M.;K. S. Chung
    • 한국가축번식학회지
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    • 제24권2호
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    • pp.143-154
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    • 2000
  • 본 연구는 생식보조기법을 시행한 불임환자로부터 얻은 난자를 일반적인 수정법과 세포질내 정자직접주입법으로 수정을 유도한 다음 정상수정에 실패한 난자에 대한 미세소관과 염색체의 형태학적 차이를 laser scanning confocal microscope를 이용하여 비교분석하고자 실시하였다. 일반적 수정법 혹은 세포질내 정자직접주입법 실시 후 18시간째에 해부현미경 하에서 난자를 관찰하였을 때 전핵형성에 실패한 미수정란, 한 개의 전핵 또는 3개이상의 전핵의 형성이 관찰된 이상수정란으로 구분하여 연구를 실시하였다. 미세소관의 관찰을 위해서 (-tubulin antibody를 반응시킨 후 형광물질이 부착된 2차항체와 반응시킨 후 관찰하였으며 염색체의 관찰을 위해서는 propidium iodide로 염색한 다음 confocal microscope 하에서 관찰하였다. 연구결과 대부분의 난자는 수정과정중에 있었으나 일부의 난자에서는 특정단계에서 정지되어 있는 것이 관찰되었다. 즉, 감수분열 중기에서 정자의 침입이 이루어지지 않은 경우, 정자의 침입은 이루어졌으나 sperm aster 형성이 불완전한 경우, 웅성 및 자성전핵의 형성에 실패한 경우 및 전핵의 위치가 불완전한 경우 등이 관찰되었고 이들 난자의 경우 높은 비율로 미세소관과 염색체의 이상이 관찰되었다. 이상의 연구결과로 미루어 볼 때 생식보조기법의 시술과정에서 채취되는 난자의 수정실패의 원인은 세포골격기관 특히 미세소관의 이상과 염색체의 이상에 기인되는 것으로 사료되면 이러한 세포골격 구성물질의 이상에 대해서는 추후에 세포조직학적 또는 분자생물학적 분석이 필요하다고 하겠다.

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채색 안료 층의 표면오염물에 대한 레이저클리닝기법의 적용성 평가 연구 -공초점레이저주사현미경(CLSM)을 통한 분석평가 중심으로- (Study of Applicability for Removing Contaminants on Surface of Color Pigment Using the Laser Cleaning Technique -Focus on Analysis Method of Confocal Laser Scanning Microscope-)

  • 김진형
    • 보존과학회지
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    • 제30권2호
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    • pp.123-136
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    • 2014
  • 훼손된 문화재의 안정적인 보존 방안을 제안하는데 있어서 수많은 접근방법들이 있으며 이 방법들은 검증절차가 필수적이다. 또한 보존행위 이후의 예상되는 결과물들은 긍정적 결과로 도출되어야 하는 필연성을 가지고 있다. 보존행위는 문화재가 갖는 고유한 다양성, 특수성 등등의 여러 사항들을 고려한 명확한 해법을 찾는 행위는 당연히 쉽지 않은 과제이다. 또한 기존에 이미 검증된 방법론이나 접근법이라 하더라도 그 대상이 처한 상황이나 조건에 의해 원점에서 재고해야 되는 경우도 있다. 문화재보존행위에 대한 안정적 방법을 구현하기 위해서는 많은 시행착오가 불가피하다. 이러한 시점에서 레이저를 이용한 문화재의 적용은 이미 그 효율성에 대해서 일부가 검증되었음에도 불구하고 아직까지 재질별 적용 호환에 대한 검증이나 연구가 미비하다. 레이저빔의 특성상 모든 문화재 재질에 대한 적용은 한계가 있지만, 비접촉성 접근방법이라는 여타 클리닝방법과 다른 기본 원리이기 때문에 그 특성을 장점으로 활용하여 안정성을 확보하고자 하였다. 이러한 행위 과정은 공초점레이저주사현미경(CLSM)을 활용하여 채색안료와 레이저 광에 대한 작용반응 등의 일련의 과정을 관찰하였다. 레이저빔과 여러 종류의 채색안료들과의 반응과정에서 발생되는 문제점이나 클리닝기법으로써의 효율성을 동시에 실험하여 실제 문화재에 대한 적용 범위 선정이나 적용 이후의 결과물을 예측하는데 도움을 주고자 하였다.

유치의 레진침투법을 위한 레이저 형광법의 진단적 활용 (Diagnostic Utilization of Laser Fluorescence for Resin Infiltration in Primary Teeth)

  • 박소영;정태성;김지연;김신
    • 대한소아치과학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.265-273
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    • 2019
  • 이 연구는 레진침투법(resin infiltration, RI)을 적용하기 적합한 초기 유아기 우식증 병소를 동정하는데 있어 레이저 형광법(laser fluorescence, LF)의 활용 가능성을 평가하기 위해 수행되었다. 인접면 우식을 가진 20개의 자연 탈락 유구치를 이용, 중심와를 지나도록 협설로 절단하여 근원심 치면을 별개의 시편으로 간주하였다. ICDAS code 1과 2에 해당하는 시편 27개를 선별하였고 LF값을 측정하였다. 현미경 평가를 위해 RI 시행 시 이중 염색을 병행하였고, 절편을 제작하였다. 현미경 영상으로부터 병소깊이(최대 탈회깊이, $LD_{max}$), 최대 침투깊이($PD_{max}$), 평균 레진 침투율(Penetration rate, PR)을 측정하고, 상관분석을 시행하였다. LF값은 PR과 양의 상관관계를 보였으나 $LD_{max}$$PD_{max}$와는 유의성을 보이지 않았다. 얕은 법랑질 우식군을 제외하고, 깊은 법랑질 우식군과 상아질 우식군에서는 LF값과 PR 간에 유의한 상관관계가 확인되었다. 활동성 우식은 RI를 적용할 경우 침투율이 높고, LF 값이 보다 높게 측정될 수 있다. 진행 정도가 유사한 우식병소의 활성도를 평가하고자 할 경우, 레이저 형광법이 유용할 것으로 사료되었다.

전기방사법으로 제조된 실리카/폴리카프로락톤 적층형 부직포에 배양한 골아 세포의 중식, 분화에 관한 연구 (A study on the differentiation of MC3T3-E1 incubated on the layer-built silica/polycaprolactone non-woven fabric produced by electrospinning)

  • 안민국;김경화;김태일;이용무;이상훈;구영;류인철;정종평;한수부;설양조
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제37권1호
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    • pp.115-124
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    • 2007
  • Silica is known as a promising osteoconductive material, and polycaprolactone is a bioactive and degradable material. The purpose of this study was to monitor the differentiation of MC3T3-E1 cells cultured on the layer-built silica/poly caprolactone non-woven fabric produced by electrospinning. Non-woven fabric (silica, polycaprolactone, PSP, SPS) was made by electrospinning and they were inserted in the 48 well cell culture plate. MC3T3-E1 cells were prepared by subculture. Cells were seeded to each well $1{\times}10^5$ concentration per well. Dulbecco's modified eagle medium with 10% FBS and 1% antibiotic-antimycotic solution was used. Confocal laser scanning microscope was taken 4 hours after incubation (95% air. 5% $CO_2$, $37^{\circ}C$). Cell proliferation was monitored by spectrophotometer on 1, 7, 14 days, and the morphology of the growing cells was observed by field emission scanning electron microscope. To monitor the differentiation of osteoblasts on the materials, MC3T3-E1 cells were incubated in 48 well culture plate after seeding with the density of $1{\times}10^5$ concentration. Then ELISA kit & EIA kit were used on to assess osteocalcin and osteopontin expression respectively. The other conditions were the same as above. MC3T3-E1 cells were proliferated well on all of the materials. There were no statistical differences among them. The osteopontin expression of silica, PSP, SPS was significantly higher than other groups on day 3 (p/0,05), but after that time, there were no statistically signigicant differences. The osteocalcin expression was significantly higher in silica and PSP than other groups on day 14. These findings show that PSP was as good as silica on the effect of osteoblast differentiation. The PSP non-woven fabric may have the possibility as bone graft materials.

Modification of surface pretreatment of white spot lesions to improve the safety and efficacy of resin infiltration

  • Yim, Hyun-Kyung;Min, Ji-Hyun;Kwon, Ho-Keun;Kim, Baek-Il
    • 대한치과교정학회지
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    • 제44권4호
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    • pp.195-202
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    • 2014
  • Objective: A low-viscosity resin (infiltrant) was used to inhibit the progression of white spot lesions (WSLs) and resolve associated esthetic issues. An alternative pretreatment was explored to increase the pore volume of the surface layer of the WSLs. Also, the penetration effects of the infiltrant were evaluated for various pretreatments. Methods: Sixty two artificial lesions were fabricated on bovine teeth. As a positive control, 15% HCl gel was applied for 120 seconds. Further, 37% $H_3PO_4$ gel was applied for 30 seconds using three methods. The samples were divided as follows: $H_3PO_4$ only group, $H_3PO_4$ sponge group, and $H_3PO_4$ brush group. The acid was gently rubbed with the applicators (i.e., a sponge or brush) throughout the application time. To compare the effects of resin infiltration, twenty paired halves of specimens were treated with an infiltrant (ICON$^{(R)}$). Results: Thicknesses of the removed surface layers and infiltrated areas were evaluated by confocal laser scanning microscope. The positive control and the 37% $H_3PO_4$ brush group failed to show significant differences in the removed thickness (p > 0.05); however, the mean percentage of the infiltrated area was higher in the 37% $H_3PO_4$ brush group ($84.13{\pm}7.58%$%) than the positive control ($63.51{\pm}7.62%$, p < 0.001). Scanning electron microscope observations indicate higher pore volumes for the 37% $H_3PO_4$ brush group than for the positive control. Conclusions: Application of 37% $H_3PO_4$ with a brush for 30 seconds increased the pore volume of WSL surface layers and the percentage of infiltrated areas in comparison to the use of 15% HCl for 120 seconds.

자외선B 조사에 의한 모발 외부와 내부의 광산화에 관한 분광학적 비교 (Spectroscopic Comparison of Photo-oxidation of Outside and Inside of Hair by UVB Irradiation)

  • 하병조
    • 공업화학
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    • 제31권2호
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    • pp.220-225
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    • 2020
  • 모발은 여러 가지 아미노산들을 포함하는 단백질로 이루어져 있다. 자외선(UV)은 태양광선중에서 모발손상에 가장 큰 영향을 미치며 모발 노화에 주된 역할을 한다. 본 연구의 목적은 전자현미경(SEM), 공초점현미경(CLSM) 및 적외선 현미경분광법(IR micro spectroscopy)을 이용하여 정상모발에 UVB를 조사한 후 특징적인 형태학적 및 화학적 구조변화를 알아보는 것이다. 에너지 분산형 X선 분광기가 부착된 전자현미경은 자외선 조사모발의 표면이 정상모발과 비교했을 때 거칠고 높은 산소원소의 함량을 보였다. 형광 및 3차원 위상 이미지를 CLSM으로 분석한 결과 정상모발의 초록색 형광방출이 UVB 조사모발에 비해 매우 높았다. 또한 fluorescamine 형광 염색법을 통해 UVB 조사모발은 정상모발에 비해 펩타이드 결합의 파괴로 생성된 자유 아미노기가 많음을 확인할 수 있었다. UVB 조사모발의 강한 푸른색 형광은 아미노기의 함량이 높다는 것을 의미하며, 이는 CLSM에서도 관찰되었다. 따라서 fluorescamine은 UVB 조사모발에서 펩타이드 결합의 파괴를 관찰하는데 유용한 도구가 될 수 있다. 정상모발과 UVB 조사모발의 단면을 IR micro-spectroscopy를 통해 이미지 맵핑(mapping)한 결과, UVB 조사모발은 정상 모발에 비해 모발의 표면은 물론 내부에 걸쳐 디설파이드 결합(disulfide bond)의 산화가 일어나고 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 분광학적 방법은 단독 또는 다른 분석법과 함께 모발화장품의 개발에 응용될 수 있을 것이다.

조선왕조실록 밀랍본 복원기술 연구(제3보) -습열열화처리를 이용한 복원용 한지의 내구성 평가- (The Study of Restoration Technique of Wax-Treated Volume for the Annals of the Joseon Dynasty (III) -Evaluation of Durability of Korean Traditional Paper using Moist-heat Aging Treatment-)

  • 정선화;정선영;서진호;정소영
    • 펄프종이기술
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    • 제45권5호
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    • pp.49-55
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    • 2013
  • To explore the paper materials for restoration of the Annals of the Joseon Dyansty, durability of the three type of the traditional Korean Papers were estimated in this study, through moist heat artificial aging test. Three types(D, F, and G) which showed the best preservation performance in dry heat and UV treatment in the previous study were selected and artificial accelerated aging treatment with moist-heat process was conducted; the viscosity change rate was D>G>F; folding endurance G>D>F; $L^*$ value F>D>G; $a^*$ and $b^*$ change rate D>G>F; brightness decrease rate D>G>F, suggesting paper F showed the least change rate in physical/optical properties. Also the CLSM image observation showed fair coherence among fibers and confirmed paper mulberry. And in FDI extraction from each sample, paper F showed the highest value. Overall, paper F (traditional glossy paper) showed the highest stability against thermal treatment. It confirms that paper F is suitable as restoration paper for tributary remains including the annals of the Joseon Dynasty for its steady strength/viscosity decrease rate and color change rate.