Animal cells show different behaviors in response to the mechanical properties of the substrates. We hypothesize that the rigidity of the substrates also affects the bacterial motility and controls the colony dynamics. It is found that the colony size of Escherichia colis and Bacillus subtilis grown on the agar plates is correlated with agarose gel concentrations and thus with the substrate rigidity. High- resolution microscopic imaging reveals that bacteria in single colonies form different aggregation patterns on the agar plates with varying gel concentration. We measured the apparent diffusion coefficients in the agarose gel plates made with different gel concentrations. Mathematical modeling and quantitative imaging of dye dispersion in the agar plates suggest that there is a close connection between the diffusion rate and the colony size. Nanoscale pore structures and kinetic constraints in the porous media may have an effect on bacterial colony dynamics.
최근 센서 네트워크 기술 발전은 효과적인 라우팅 방법 개발로 부터 시작되었으며, 라우팅 프로토콜이 응용프로 그램이나 네트워크 아키텍처에 의존적이라는 차이 때문에 라우팅 프로토콜은 많은 주의를 요한다. 빠른 환경 변화와 능동적인 네트워크 구조의 특징은 효과적인 라우팅과 에너지 소비에 매우 치명적이다. 센서 네트워크는 에너지 소비라는 부분에서 전통적인 네트워크와는 다르며, 따라서 데이터 중심적인 기술들은 효율적인 에너지 보급을 위하여 라우팅을 실행하곤 한다. 본 논문에서는 네트워크 라우팅에서 ant colony 최적화 기술과 전송 데이터 구성을 위한 데이터 집중 라우팅 능력 등 두 가지 이점을 이용하여 효율적인 자율센서 네트워크 구축방법을 제시한다.
Purpose: The purpose of this study is to evaluate the efficacy of mesenchymal stem cell (MSC) isolation by the magnetic-activated cell sorting (MACS) method in tendon tissue-derived cells compared to the colony picking method for isolation of MSCs by picking colony-forming cells. Materials and Methods: Human tendon-derived cells were isolated by enzyme digestion using normal tendon tissues from three donors. We used the magnetic kit and well-known MSC markers (CD90 or CD105) to isolate MSCs in tendon-derived cells using MACS. Cloning cylinders were used to isolate colony-forming cells having MSC characteristics in tendon-derived cells. Colony-forming unit-fibroblast (CFU-F) assay was used to evaluate the self-renewal capacity of cells isolated using the colony picking method or MACS. For comparison of differentiation potentials into osteogenic or adipogenic lineage between two groups, alizarin red S and oil red O staining were performed at 14 days after induction of differentiation in vitro. Results: Flow cytometry results showed that early passage tendon-derived cells expressed CD44 in 99.13%, CD90 in 56.51%, and CD105 in 86.19%. In the CFU-F assay, CD90+ or CD105+ cells isolated with MACS showed larger colony formation in size than cells isolated using the colony picking method. We also observed that CD90+ or CD105+ cells were constantly differentiated into both osteogenic and adipogenic lineages in cells from all donors, whereas cells isolated using the colony picking method were heterogeneous in differentiation potentials to the osteogenic and adipogenic lineages. Conclusion: CD90+ or CD105+ cells isolated using MACS showed superior MSC characteristics in the self-renewal and multi-differentiation capacities compared with cells isolated using the colony picking method.
치주질환과 관련된 세균인 S. gordonii, F. nucleatum 및 P. gingivalis의 상호작용이 군집 형성에 미치는 영향을 알아보고자 trypticase soy hemin menadione broth에 단독 및 열처리한 사균과 혼합 분주하여 혐기성 균배양조를 통해 $37^{\circ}C$$CO_2$ 배양기에서 anearobic gas pack 하에 7일간 배양하였다. 군집 형성 정도를 확인하기 위해 흡광도를 측정하였으며, 군집 구조 및 형태를 확인하기 위해 주사전자현미경으로 관찰하였다. P. gingivalis의 병원성에 미치는 영향을 확인하기 위해 real-time RT-PCR를 통해 gingipain인 HRgpA를 생성하는 rgpA 유전자에 대한 발현 분석을 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다. S. gordonii와 P. gingivalis의 군집 형성은 다른 사균들에 의해 증가하였다. F. nucleatum의 경우 P. gingivalis 사균에 의해 증가하는 양상을 보였으나 S. gordonii 사균에 의해서는 군집 형성이 감소되었다. 따라서 본 실험에 사용된 균주는 군집 형성 시 상호작용 인자뿐 아니라 세균 입자 그 자체 등을 통해서도 서로 영향을 주는 것으로 생각된다.
Ko, Eul-Bee;Jang, Yin-Gi;Kim, Cho-Won;Go, Ryeo-Eun;Lee, Hong Kyu;Choi, Kyung-Chul
Biomolecules & Therapeutics
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제30권2호
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pp.151-161
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2022
This study elucidates the anti-cancer potential of gallic acid (GA) as a promising therapeutic agent that exerts its effect by regulating the PI3K/Akt pathway. To prove our research rationale, we used diverse experimental methods such as cell viability assay, colony formation assay, tumor spheroid formation assay, cell cycle analysis, TUNEL assay, Western blot analysis, xenograft mouse model and histological analysis. Treatment with GA inhibited cell proliferation in dose-dependent manner as measured by cell viability assay at 48 h. GA and cisplatin (CDDP) also inhibited colony formation and tumor spheroid formation. In addition, GA and CDDP induced apoptosis, as determined by the distribution of early and late apoptotic cells and DNA fragmentation. Western blot analysis revealed that inhibition of the PI3K/Akt pathway induced upregulation of p53 (tumor suppressor protein), which in turn regulated cell cycle related proteins such as p21, p27, Cyclin D1 and E1, and intrinsic apoptotic proteins such as Bax, Bcl-2 and cleaved caspase-3. The anti-cancer effect of GA was further confirmed in an in vivo mouse model. Intraperitoneal injection with GA for 4 weeks in an A549-derived tumor xenograft model reduced the size of tumor mass. Injection of them downregulated the expression of proliferating cell nuclear antigen and p-Akt, but upregulated the expression of cleaved caspase-3 in tumor tissues. Taken together, these results indicated that GA hindered lung cancer progression by inducing cell cycle arrest and apoptosis, suggesting that GA would be a potential therapeutic agent against non-small cell lung cancer.
This study was performed to determine the effect of Phyllostachys nigra var. henenis Strapf leaf extract on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation and apoptosis in jejunal crypt cells of mice irradiated with high and low dose of gamma-radiation. Phyllostachys nigra var. henenis Strapf administration before irradiation (I.P.: 125 mg/kg of body weight, at 24 hours before irradiation) resulted in an increase of the formation of endogenous spleen colony (p<0.01). The frequency of radiation-induced apoptosis was also reduced by pretreatment of Phyllostachys nigra var. henenis Strapf (I.P.: 280 mg/kg or 28 mg/kg of body weight, at 24 hours before irradiation, p<0.01). These results indicated that Phyllostachys nigra var. henenis Strapf might be a useful radioprotector, especially since it is a relatively nontoxic natural product. Further studies are needed to characterize better the promotion nature of Phyllostachys nigra var. henenis Strapf and its components.
Studies were performed to determine the effect of Korean red ginseng (extract powder, spray-dried), it is made of choice 6-year-old raw ginseng roots, and processed by steaming and drying, on jejunal crypt survival, endogenous spleen colony formation, and apoptosis in jejunal crypt cells of irradiated mice. Jejunal crypts were protected by pretreatment of red ginseng (1 mg/head, single I.P. at 24hours before irradiation, p<0.05). Red ginseng administration before irradiation (1 mg/head, single I.P at 24hours before irradiation) resulted in an increase of the formation of endogenous spleen colony (p<0.05). The frequency of radiation-Induced apoptosis in intestinal crypt cells was also reduced by treatment of red ginseng both pretreatment (P.O.: 2 mg/ml of drinking water for 7 days, p<0.005, I.P.: 1 mg/head, single I.P. at 24 hours before irradiation, p<0.005) and post-treatment (1 mg/head, single I.P at 30 minutes after irradiation, p<0.05). These results indicated that Korean red ginseng might be a useful radio-protector, especially since it is a relatively nontoxic natural product. Further studies are needed to characterize better the promotion nature of red ginseng and its fractions.
Gefitinib, a first generation epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor (EGFR TKI), provides obvious clinical benefit in patients with EGFR-mutant non-small cell lung cancer (NSCLC). However, patients ultimately develop gefitinib resistance which mainly caused by EGFR T790M secondary mutation. In the current study, we investigated whether the root extract of Scutellaria baicalensis (SB) overcomes gefitinib resistance. Gefitinib-resistant H1975 human NSCLC cells (EGFR L858R/T790M double mutant) were treated with gefitinib and/or ethanol extract of SB (ESB) to evaluate the effect of ESB on the gefitinib sensitivity. The cell viability was measured by MTT assay and trypan blue exclusion assay. The colony-forming ability was evaluated by anchorage-dependent colony formation assay. Combined treatment with gefitinib and ESB markedly decreased the cell viability and colony formation than single treatment with gefitinib or ESB in H1975 cells. In addition, cells treated with both gefitinib and ESB exhibited a significant increase of sub-G1 DNA content which indicates apoptotic cells compared with those treated with gefitinib or ESB alone. As a molecular mechanism, combined treatment with gefitinib and ESB strongly downregulated the phosphorylation of ERK and JNK than single treatment with gefitinib or ESB. Taken together, our results demonstrate that ESB sensitizes H1975 cells to gefitinib treatment. We cautiously propose that ESB can be used in combination with gefitinib for the advanced NSCLC patients with acquired resistance to EGFR TKIs.
Objective : Endothelial colony-forming cells (ECFCs) have been reported to play an important role in the pathogenesis of moyamoya disease (MMD). We have previously observed stagnant growth in MMD ECFCs with functional impairment of tubule formation. We aimed to verify the key regulators and related signaling pathways involved in the functional defects of MMD ECFCs. Methods : ECFCs were cultured from peripheral blood mononuclear cells of healthy volunteers (normal) and MMD patients. Low-density lipoproteins uptake, flow cytometry, high content screening, senescence-associated β-galactosidase, immunofluorescence, cell cycle, tubule formation, microarray, real-time quantitative polymerase chain reaction, small interfering RNA transfection, and western blot analyses were performed. Results : The acquisition of cells that can be cultured for a long time with the characteristics of late ECFCs was significantly lower in the MMD patients than the normal. Importantly, the MMD ECFCs showed decreased cellular proliferation with G1 cell cycle arrest and cellular senescence compared to the normal ECFCs. A pathway enrichment analysis demonstrated that the cell cycle pathway was the major enriched pathway, which is consistent with the results of the functional analysis of ECFCs. Among the genes associated with the cell cycle, cyclin-dependent kinase inhibitor 2A (CDKN2A) showed the highest expression in MMD ECFCs. Knockdown of CDKN2A in MMD ECFCs enhanced proliferation by reducing G1 cell cycle arrest and inhibiting senescence through the regulation of CDK4 and phospho retinoblastoma protein. Conclusion : Our study suggests that CDKN2A plays an important role in the growth retardation of MMD ECFCs by inducing cell cycle arrest and senescence.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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