This study has been conducted to investigate the responses of various isolates of four Colletotrichum species such as C. gloeosporioides, C acutatum, C. coccodes, and C. dematium isolated from infected tissues of several crops to fungicides such as carbendazim, carbendazim+diethofencarb, four protective fungicides, and three ergosterol biosynthesis-inhibiting (EBI) fungicides. All the isolates of C. acutatum showed $EC_{50}$ values in a range of 0.001-3.040 ${\mu}g/ml$ against carbandazim, a benzimidazole fungicide. As for the response to carbendazim, the isolates of C. gloeosporioides obtained from pepper, apple, and strawberry were clearly divided into two groups, resistant or sensitive isolates. All the resistant isolates showed $EC_{50}$ values above 1000 ${\mu}g/ml$, whereas the sensitive isolates had lower $EC_{50}$ values than 0.550 ${\mu}g/ml$. The isolates of C. gloeosporioides exhibited a negative cross resistance between carbendazim and diethofencarb (a N-phenylcarbamate fungicide), but isolates of C. acutatum did not. Toward carbendazim, C. coccodes and C. dematium isolates showed a similar response to C. acutatum isolates and the sensitive isolates of C. gioeosporioides, respectively. As for response of Protective fungicides, all the isolates of C. acutatum showed a more resistant reaction than all the isolates of C. gloeosporioides. However, there was no difference among 4 species of Colletotrichum against EBI fungicides.
Wilted soybean plants were collected from soybeans cultivation fields in Korea from 2014 to 2016. Fusarium spp., Colletotrichum spp., Rhizoctonia spp., Macrophomina sp., Phytophthora spp., and Calonectria ilicicola were obtained from the infected samples. Out of these, Fusarium spp. were the dominant species (79.1%). In total, 53 isolates were identified as F. solani species complex, F. oxysporum species complex, F. graminearum species complex, and F. fujikuroi species complex based on mycological characteristics. Sequence typing analysis was conducted using translation elongation factor 1 alpha (TEF) to confirm the identification of isolates. All isolates were identified as F. solani, F. oxysporum, F. commune, F. asiaticum, and F. fujikuroi based on phylogenetic analysis of TEF sequences. Pathogenicity of 44 isolates was tested on three cultivars of soybean using the root dip inoculation method. Out of 5 Fusarium species, only F. asiaticum could not cause the symptoms or be weak. Ten isolates were selected based on pathogenic characters and species identification to investigate the host range and screen soybean cultivars for resistance. Fusarium solani, F. oxysporum, and F. commune were aggressive only to soybean, and F. fujikuroi was aggressive to kidney bean, yellow cowpea, black cowpea, adzuki bean as well as soybean. All 13 Korean soybean cultivars were susceptible to F. commune and F. fujikuroi. Out of 13 cultivars, cv. Janggi, cv. Poongsannamul, and cv. Socheongja were resistant to Fusarium wilt, while cv. Hwanggeumol and Chamol were susceptible to Fusarium wilt.
Mycotoxins produced by molds isolated from discolored sun-dried red pepper fruits were determined and the toxicity to animals was also tested by feeding mold-grown unpolished rice to rats. Among the mold species tested, only Alternaria alternata was toxic to experimental animals, while other mold species belonging to the genera of Colletotrichum, Diaporthe, Diaporthopsis, Botryosphereia, Aspergillus and Fusarium were not. Rats fed Alternaria-grown rice lost weight and died within two weeks of feeding period. Succumbed rats during the process of feeding study showed extreme cases of enlargements of stomach, small intestine and liver. Among the 17 Alternaria isolates, 8 species produced considerable amount of tenuazonic acid along with small amounts of other toxins including alternariol and monomethyl ether derivative of alternariol in both red pepper homogenate and unpolished rice. It is therefore advised that red pepper fruits infested by molds during the sun-drying process be discarded to avoid unnoticeable health hazards.
A semi-selective agar medium was developed for detecting and enumerating Colletotrichum scovillei in chili (Capsicum annum) plant material. Potato-dextrose-agar(PDA) was used as the basic medium. The composition of the semi-selective agar medium was established after several attempts to favor the development of C. scovillei and inhibit the growth of other fungi and bacteria. The semi-selective agar medium contained PDA amended with pyribencarb and pydiflumetofen at 40 ㎍ mL-1 each and streptomycin at 100㎍ mL-1 for preventing bacterial growth. The pH was adjusted to 4.8 with 85% lactic acid. The inhibition of the mycelial growth of C. scovillei was significantly less than that of most other fungi including Fusarium species when grown on the semi-selective medium. C. scovillei was detected from naturally infected chili plants by plating fruit and stem tissue suspensions on the semi-selective medium, which was found to be reliable and quantifiable. This was the first report of a semi-selective agar medium to detect the presence of C. scovillei in naturally infected chili tissue.
Kim, Young-Ho;Jun, Ok-Kyoung;Sung, Mi-Joo;Shin, Jun-Sung;Kim, Jung-Ho;Jeong, Myoung-Il
The Plant Pathology Journal
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v.16
no.4
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pp.242-245
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2000
In 1999 and 2000, a rot of graft-cacti including Hylocereus trigonus (three-angled cactus), Gymnocalycium mihanovichii, and Chamaecereus silvestrii occurred in several greenhouses in major cactus-growing areas of Korea. Typical symptoms included a moist, light brown rot or a watery rot of the stems. A Colletotrichum sp. was isolated from the lesions. The fungus formed dark gray, dense or floccose colonies on potato dextrose agar, frequently forming many light pink acervuli often surrounded with setae. The hyaline, cylindrical conidia were one-celled with round ends. Appressoria were mostly semicircular or clavate. Thin-walled asci contained eight, one-celled, hyaline ascospores (biseriate in ascus). Ascopspores were strainht or curved, ellipsoidal or subcylindrical. Based on these characteristics, the fungus was identified as Glomerlla cingulata (anamorph : C. gloeosporioides). Wound inoculation of basal stems of the cactus by the mycelial plugs or conidia produced symptoms identical to those described above. Various cactus species were compared in susceptibility using stem disc inoculation. Cereus tetragonus, Eriocereus jusbertii, Myrtillocactus geomentrizans, and three-angled cacti from Mexico and Taiwan were susceptible, but C. peruvianus (Peruvian apple cactus) and Harrisia tortuosa not. This is the first report of G. cingulata causing stem rot of graft-cactus in Korea.
Kim, Suyoung;Park, Sook-Young;Kim, Hyejeong;Kim, Dongyoung;Lee, Seon-Woo;Kim, Heung Tae;Lee, Jong-Hwan;Choi, Woobong
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.4
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pp.375-383
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2014
Fungi tolerate exposure to various abiotic stresses, including cytotoxic compounds and fungicides, via their ATP-driven efflux pumps belonging to ATP-binding cassette (ABC) transporters. To clarify the molecular basis of interaction between the fungus and various abiotic stresses including fungicides, we constructed a cDNA library from germinated conidia of Colletotrichum acutatum, a major anthracnose pathogen of pepper (Capsicum annum L.). Over 1,000 cDNA clones were sequenced, of which single clone exhibited significant nucleotide sequence homology to ABC transporter genes. We isolated three fosmid clones containing the C. acutatum ABC1 (CaABC1) gene in full-length from genomic DNA library screening. The CaABC1 gene consists of 4,059 bp transcript, predicting a 1,353-aa protein. The gene contains the typical ABC signature and Walker A and B motifs. The 5'-flanking region contains a CAAT motif, a TATA box, and a Kozak region. Phylogenetic and structural analysis suggested that the CaABC1 is a typical ABC transporter gene highly conserved in various fungal species, as well as in Chromista, Metazoans, and Viridiplantae. We also found that CaABC1 was up-regulated during conidiation and a minimal medium condition. Moreover, CaABC1 was induced in iprobenfos, kresoxim-methyl, thiophanate-methyl, and hygromycin B. These results demonstrate that CaABC1 is necessary for conidiation, abiotic stress, and various fungicide resistances. These results will provide the basis for further study on the function of ABC transporter genes in C. acutatum.
The survival of Colletotrichum acutatum was investigated in soil, infected fruits, and infected fruit debris incorporated into soil at several temperatures with different soil moisture levels. Samples were examined at 2-week intervals for 18 weeks to determine the survival of the pathogen based on the number of colony forming unit (CFU) of C. acutatum recovered on a semi-selective medium. C. acutatum conidia survived in both sterile and non-sterile soil at 4 and $10^{\circ}C$ for 18 weeks. If infected pepper fruits were completely dried, C. acutatum survived for 18 weeks at temperature from 4 to $20^{\circ}C$. Soil temperature and moisture affected the survival of C. acutatum in infected fruit debris incorporated into soil after air-drying. The effect of soil moisture on survival was weaker at low temperatures than at high temperatures. For up to 16 weeks, conidia were recovered from fruit debris in soil that had been kept at 4 to $20^{\circ}C$ and below 6% soil moisture. Conidia were recovered from fields until approximately 6 months after pepper fruits were harvested. Using PCR with species-specific primers and a pathogenicity test, we identified conidia recovered from soil and infected fruit from both the laboratory and field as C. acutatum and as the primary inoculum causing pepper anthracnose.
Shin, Jong-Hwan;Han, Joon-Hee;Park, Hyun-Hoo;Fu, Teng;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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v.35
no.6
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pp.575-584
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2019
Colletotrichum acutatum is a species complex responsible for anthracnose disease in a wide range of host plants. Strain C. acutatum KC05, which was previously isolated from an infected pepper in Gangwon Province of South Korea, was reidentified as C. scovillei using combined sequence analyses of multiple genes. As a prerequisite for understanding the pathogenic development of the pepper anthracnose pathogen, we optimized the transformation system of C. scovillei KC05. Protoplast generation from young hyphae of KC05 was optimal in an enzymatic digestion using a combined treatment of 2% lysing enzyme and 0.8% driselase in 1 M NH4Cl for 3 h incubation. Prolonged incubation for more than 3 h decreased protoplast yields. Protoplast growth of KC05 was completely inhibited for 4 days on regeneration media containing 200 ㎍/ml hygromycin B, indicating the viability of this antibiotic as a selection marker. To evaluate transformation efficiency, we tested polyethylene glycol-mediated protoplast transformation of KC05 using 19 different loci found throughout 10 (of 27) scaffolds, covering approximately 84.1% of the entire genome. PCR screening showed that the average transformation efficiency was about 17.1% per 100 colonies. Southern blot analyses revealed that at least one transformant per locus had single copy integration of PCR-screened positive transformants. Our results provide valuable information for a functional genomics approach to the pepper anthracnose pathogen C. scovillei.
Cho Jun-Young;Choi Gyung-Ja;Lee Seon-Woo;Jang Kyoung-Soo;Lim He-Kyoung;Lim Chi-Hwan;Lee Sun-Og;Cho Kwang-Yun;Kim Jin-Cheol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.2
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pp.280-285
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2006
Methanol extract of the rhizomes of turmeric, Curcuma longa L., effectively controlled the development of red pepper anthracnose caused by Colletotrichum coccodes. In addition three antifungal substances were identified from the methanol extract of C. longa rhizomes as curcumin, demethoxycurcumin, and bisdemethoxycurcumin using mass and $^{1}H-NMR$ spectral analyses. The curcuminoids in a range $0.4-100\;{\mu}g/ml$ effectively inhibited the mycelial growth of three red pepper anthracnose pathogens, C. coccodes, C. gloeosporioides, and C. acutatum. The three curcuminoids inhibited mycelial growth of C. coccodes and C. gloeosporioides to an extent similar to the synthetic fungicide dithianon did, but the synthetic agent was a little more effective against C. acutatum. The curcuminoids also effectively inhibited spore germination of C. coccodes, and bisdemethoxycurcumin was the most active. Among the three curcuminoids, only demethoxycurcumin was effective in a greenhouse test in suppressing red pepper anthracnose caused by C. coccodes.
Kwak, Hwa-Sook;Kim, Jiwon;Park, Jin Woo;Sang, Mee Kyung
Korean Journal of Organic Agriculture
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v.29
no.4
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pp.575-588
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2021
The purpose of this study is to select actinomycetes with antifungal activity against Botrytis cinerea and Colletotrichum orbiculare, which are airborne pathogens in cucumber plants. In 2020, 560 species of actinomycetes were isolated from rhizome soils of various vegetables in Korea; 7 strains showing simultaneous antifungal activity against two pathogens were selected. Finally, strain S20-465 was selected through dual culture and plant assay. This strain was identified as Streptomyces sp. based on 16S rRNA analysis. The culture filtrate of strain S20-465 inhibited mycelial growth of both pathogens by more than 60%. In addition, when cucumber plants were treated with 20-fold and 40-fold diluted culture filtrates of S20-465, lesions caused by B. cinerea and C. orbiculare on cucumber leaves were significantly reduced compared to the control. This results suggest that strain S20-465 produces specific secondary metabolites with antifungal activity against both pathogens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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