Hyun-Il Cho;Soon-Young Pail;Il-Hoan OH;Kyun-Jung Ahn;Dong-Wook Kim
Journal of Microbiology
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제39권4호
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pp.300-304
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2001
Epstein-Barr Virus(EBV)-transformed lymphoblastoid B cell lines, BLCL which expresse antigens, are potential antigen-presenting cells(APCs) for the induction of CTL in vitro. However transfection of BLCLs with subsequent selection by antibiotics is notoriously difficult because plating efficiencies of BLCLsare reported to be 1% or less. To generated stable transfectants of BLCLs we produced high titers of retroviruess encoding pp 65 antigen of human cytomegalovirus of foreign antigens and trans-duced them of BLCLs. The pp 65 gene was cloned into the retroviral vector pLXSN. The recombinant retroviral vector was transfected to ecotropic packaging cell line, CP&E86, and this polyclonal recom-binant retrovirus was transduced to PA317 that is amphotropic pakaging cell line. The titers of colned PA317 amphotropic retroviruses ranged from 5 to $\times$10$^{6}$ colony forming units (CFU)per ml (CFU/ml) We performed three rounds of consecutive transductions to BLCLs in order to improve the clon-ing effieiencies. The expression of recombinant HCMV-pp65 antigen was more than 20% after the final transduction. THe third-transduced BLCLs were easily selected in optimal concentration of G418. BLCLs expressing foreign antigens could be used as target cells for CTL assay and/or as APCs for induction of in vitro CTL responses specific for viral and tumor antigens.
Identification of group A $\beta$-phemolytic streptococci is very important to provide an appropriate preventive measure of possible rheumatic fever and acute glomerulonephritis. For such purpose bacitracin susceptibility of streptococci because of its simplity has been most widely used despite of its occasional faulty results. Recently, a coagglutination technique was advocated using streptococcal group specific antibodies adsorbed to protein A-containing staphylococci. This study was conducted to evaluate the coagglutination technique using reagents prepared by ourselves. The specificity, reproducibility and stability were ascertained and the following results were obtained. 1. The identification by coagglutination technique using our own reagent gave the same results compared with the Lancefield precipitation technique. The result also agreed with the Phadebact grouping. 2. There were no variation in group A and B identification due to lot difference. However, there were a few discrepant results in group C and G identification which was conducted in different days with different lots of our reagent. 3. The stability of our reagents was less satisfactory compared to the commercial product. An effort to improve the stability was considered necessary. 4. For coagglutination, it was found convenient to use supernatant of Todd-Hewitt broth incubated for 24 hours. Both parafin-ringed slide glass and RPR card gave comparable results and the former could be used when the latter is not available.
Chlamydia trachomatis has now shown that this interesting intracellular parasite is a cause of nongonococcal urethritis, infantile pneumonia, pelvic inflammatory disease and epididymitis, in addition to lymphogranuloma venerum and inclusion conjunctivitis. There are several diagnostic methods for C. trachomatis, but the method using monoclonal antibody is the most sensitive and specific. The hybride cell were prepared by fusion of myeloma cell($P_3X_{63}\;Ag_8{\cdot}V_{653}$) of mouse and lymphocyte of mouse(BALB/c) that were immunized with formalin killed C. trachomatis serotype D. The cell mixtures after fusion were dispensed into 640 wells of the 96 well culture plates and continuously cultured in HAT medium for 2 weeks. The supernatants of culture media in 83(13%) wells were reacted with C. trachomatis, which were determined by enzyme-linked immunosorbent assay in 96 well microplate. The clones that secreted antibody to C. trachomatis were cloned by limiting dilution. Only six monoclones secreted antibody to C. trachomatis. The antibody titer of ascitic fluid that collected from same BALB/c mice bearing hybridoma cells was above 1:100,000. These monoclonal antibodies that were IgG reacted with elementary and reticulate bodies of all serotypes(Ba, D, E, F, G, H, J and LGV type-I) using ELISA and indirect immunofluorescence stain, but there were no cross reaction with other bacteria(coagulase negative Staphylococcus, Proteus and E. coli). We concluded these six monoclones secreted the same monoclonal antibody to C. trachomatis. The sensitivity and specificity of the monoclonal antibody compared with Microtrak(confirmatory test of C. trachomatis, Syva) was 100%, respectively.
진단검사의학은 신속하고 정확한 체외검사 결과를 제공함으로써 임상의사가 환자를 진료하는 데 도움을 주는 전문 분야이다. 정확한 검사 결과를 제공하기 위해서는 검사에 관련된 모든 요소의 표준화가 필요하다. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)는 1968년에 표준화를 하는 데에 모두가 동의할 수 있는 공식적인 절차를 마련하기 위해 만들어졌고, 현재까지 임상검사실, 연구용 검사실을 포함한 많은 종류의 검사실 전 분야에 대해서 표준과 지침을 출판하여, 전 세계의 많은 검사실들이 표준화를 위해 이를 이용하고 있다. CLSI의 항생제 감수성 검사 소위원회(AST SC)는 6개의 상설 부서와 필요에 따라 만들어지는 많은 특설 부서로 구성되어 있다. AST SC의 구성원들은 소위원회에 제안된 내용을 검토하여 연 2차례 열리는 회의에서 제안 내용을 반영할지 여부를 결정함으로써 문서의 개정이 이루어진다. 이 회의는 등록한 사람은 누구나 참여할 수 있으므로, 우리 학회원들도 회의에 참여하여 표준 혹은 지침 문서의 생산에 능동적인 역할을 하기를 기대한다.
CIFTCI Ihsan Hakki;KARACA Semsettin;DOGRU Omer;CETINKAYA Zafer;KULAC Mustafa
Parasites, Hosts and Diseases
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제44권1호
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pp.95-98
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2006
Scabies and pediculosis are ubiquitous, contagious, and debilitating parasitic dermatoses. The tendency of high prevalence of pediculosis and scabies among school and preschool age children has prompted us to conduct a head louse and scabies prevalence survey among preschool nursery children in our district. A school-based, crosssectional study was performed, with 1,134 children chosen for evaluation. All cases were evaluated by physical examination and a detailed, structured questionnaire. The infestation was found in 14 $(1.2\%)$ of 1,134 children; 9 $(0.8\%)$ with pediculosis capitis and 5 $(0.4\%)$ with scabies. We found that infestations were more frequent in children with mothers whose education levels were low. This indicates the necessity of an improvement in the economic and sociocultural status of the community and the promotion of hygiene concepts and practices in order to improve health of preschool age children.
Ozkirimli Sumru;Apak T. Idil;Kiraz Muammer;Yegenoglu Yildiz
Archives of Pharmacal Research
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제28권11호
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pp.1213-1218
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2005
N,N-Dialkylditihiocarbamate derivatives have been well known as broad-range fungicides. In this study, the triazole derivatives of ten new N,N-disubstituted dithiocarbamates (3a-j) were synthesized and their structures were identified by spectral and elemental analysis. Results of the antifungal activity studies showed that some of the compounds tested were active against M. canis, M. gypseum, and T rubrum at the concentration of 12.5 $\mu$g/mL when c1otrimazol was used as a standard.
Kim, Keuk-Jun;Sung, Woo-Sang;Moon, Seok-Ki;Choi, Jong-Soo;Kim, Jong-Guk;Lee, Dong-Gun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권8호
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pp.1482-1484
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2008
Spherical silver nanoparticles (nano-Ag) were synthesized and their antifungal effects on fungal pathogens of the skin were investigated. Nano-Ag showed potent activity against clinical isolates and ATCC strains of Trichophyton mentagrophytes and Candida species ($IC_{80}$, 1-7${\mu}g/ml$). The activity of nano-Ag was comparable to that of amphotericin B, but superior to that of fluconazole (amphotericin B $IC_{80}$, 1-5${\mu}g/ml$; fluconazole $IC_{80}$, 10-30${\mu}g/ml$). Additionally, we investigated their effects on the dimorphism of Candida albicans. The results showed nano-Ag exerted activity on the mycelia. Thus, the present study indicates nano-Ag may have considerable antifungal activity, deserving further investigation for clinical applications.
CW-270031, an injectable carbapenem, is a novel synthesized pyrrolidinyl-thio carbapenems. It was evaluated for its in vitro antibacterial activities in comparison with those of imipenem and meropenem against standard strains and clinical isolated strains, CW-270031 was more active than imipenem against gram-negative (E. coli and Klebsiella oxytoca) clinical isolates, but it was slightly active than meropenem. Against Klebsiella aeruginosa CW-118 MIC were 0.048 $\mu$g/ml for CW-270031, 0.19 $\mu$g/ml for imipenem. Against clinical E. coli MIC range were 0.012$\sim$0.195 $\mu$g/ml for CW-270031, 0.097$\sim$0.39 $\mu$g/ml for imipenem. Against clinical Klebsiella oxytoca MIC$_{50}$ were 0.09 $\mu$g/ml for CW-270031, 0.39 $\mu$g/ml for imipenem. Against gram-positive standard strains and clinical CW-270031 was slightly more activity than meropenem, but CW-270033 was less active than imipenem against these tested isolates. The subcutaneous injection of CW-270031 in mice revealed that the half-life of CW-270031 in serum was about 13 min, long than that of meropenem (10.6 min). CW-270031. was stable to hydrolysis by dog renal dehydropeptidase I (DHP-l) enzyme, to an more stabilities shown by meropenem.
Kim, Ki-Yong;Yang, Ho-Chul;Tamplin, Mark-L.;Choi, Sang-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권1호
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pp.78-83
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1999
Thirty-six environmental isolates of Vibrio vulnificus obtained from seawater, sediments, and raw seafoods, and 18 clinical isolates from Vibrio septicemia patients were typed by restriction endonuclease digestion profiles (REDP) of genomic DNA with SfiI. The results revealed a high-level of variation in REDPs, indicating a vast genomic diversity among V. vulnificus strains. Genetic relatedness of the strains showed similarities ranging from 10% to 100%. Different REDPs for isolates from various raw seafoods were obtained, and clustering of strains according to type of seafoods was not observed. In contrast, clinical isolates of V. vulnificus showed higher similarity to one another, and could be subdivided into one separate group. The difference in REDPs of the V. vulnificus isolates from clinical origin and from raw seafoods substantiates the previous observation that only a single type of pathogenic strain was involved in each human infection, despite the numerous genetically polymorphic strains found from implicated oysters.
Sixty-eight clinical isolates of Stenotrophomonas maltophilia from inpatients of 2 university hospitals in Taegu were epidemiologically analyzed by using the minimum inhibitory concentrations of 25 antimicrobial drugs, biochemical reaction, pulsed-field gel elctropgoresis (PFGE), and PCR with enterobacterial repetitive intergenic consensus sequences as primer (ERIC-PCR). 1. All the strains were susceptible to minocycline. More than 57% were susceptible to sulfisomidine (Su), ciprofloxacin (Ci), Ofloploxacin (Of), nalidixic acid (Na), and chloramphenicol (Cm), and $19{\sim}35%$ to ceftazidime (Cd), trimethoprim (Tp), Ticacillin-clavulanic acid, and cefoperazone-sulbactam. Most isolates were resistant to ${\beta}$-lactam antibiotics such as ampicillin (Ap), carbenicillin (Cb), cefotaxim (Ct), cefoxitin (Cx), and aminoglycosides including gentamicin (Gm), tobramycin (Tb), amikacin (Ak). 2. All the isolates were multiply resistant of 5 to 17 drugs and showed 40 different resistance pattern types. 3. All the strains showed very similar biochemical reactions except ${\beta}$-galactosidase and nitrate reduction test. Fourteen strains selected randomly were classified 10 different pattern type by PFGE and ERIC-PCR. These two methods showed identical result. Four strains isolated from wound in 1994 showed similar MIC pattern and identical API 20NE profile, PFGE, and ERIC-PCR pattern indicating episodes of cross-infection among patients. These results indicate that PFGE or ERIC-PCR profile has comparable discriminatory power for epidemiological typing of S. maltophilia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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