8가지 목련과 수목의 수피 및 잔가지를 채집하고 건조하여 MeOH로 열추출하고, 사람의 암세포에 대한 독성을 측정하였다. 이중 일본 목련이 강한 세포독성이 관찰되어 세포독성을 갖는 순수한 물질 즉, magnonol, honokiol, dihydroxybiphenyl ether, linodenine, anonaine, asimilobine에 대한 세포독성을 측정하였다. 그리고 암세포 살해능 및 apoptosis 유도능을 측정한 결과 magnonol, honokiol, dihydroxybiphenyl ether가 초기단계의 apoptosis 유도에 기인함을 밝혔다. 따라서 세포독성이 강한 물질로 판명된 magnolol, honokiol, dihydroxybiphenyl ether에 대한 정량분석을 위해서 MeOH 추출물을 클로로포름, 에틸아세테이트, 수용성 분획으로 나누고, 에틸 아세테이트 분획을 n-Hexane : Acetone(4:1, v/v)용매로 silica gel chromatography를 한 후, 이 들 화합물이 함유된 분획을 만들었다. 이 분획을 HPLC system으로 이들의 함량을 측정한 결과 MeOH 추출물에 대하여 각각 0.9%, 0.3%, 0.24%가 있음을 밝혔다
본 연구는 균핵병의 원인균인 Sclerotinia sclerotiorum에 대해 항균활성을 갖는 친환경 유기농자재를 개발할 목적으로 이엽마두령(Aristolochia tagala Champ.)으로부터 활성물질 분리하였다. 이엽마두령을 MeOH로 추출하여 용매분획을 하였고, 용매분획 중에서 가장 강한 활성을 나타낸 $CHCl_3$ fraction을 column chromatography로 분리하여 43개의 subfraction을 얻었다. 43개의 subfraction을 bioassay한 결과 MYHS26 subfraction에서 강한 활성을 나타내었다. MYHS26 subfraction을 GC-MS로 분석하여 chromatogram 상의 주요 peak에 해당하는 mass spectrum과 Wiley library를 비교하여 profiling한 결과, 2,4-di-tetra-butyl-phenol, 2-monopalmitin, 1-mono-stearin이 주요 물질로 검출되었다. 항균활성물질로 추정되는 1-mono-stearin 화합물의 항균활성을 검정하기 위하여 표준품을 사용하여 생물검정한 결과 이 화합물이 강한 활성을 나타내었다. 따라서 이엽마두령으로부터 분리한 1-mono-stearin 화합물이 균핵병의 원인균인 Sclerotinia sclerotiorum에 대한 항균 활성물질인 것으로 추정되었다.
본 연구는 균핵병의 원인균인 Sclerotinia sclerotiorum에 대해 항균활성을 갖는 친환경 유기농자재를 개발할 목적으로 송라(Usnea longissima)로부터 활성물질을 분리하였다. 송라를 MeOH로 추출하여 용매분획을 하였고, 용매분획 중에서 강한 활성을 나타낸 $CHCl_3$ fraction을 column chromatography로 분리하여 40개의 subfractions을 얻었고 9개의 그룹으로 나누었다. 9개의 subfractions을 bioassay한 결과 G3 subfraction에서 강한 활성을 나타내었다. G3 subfraction을 GC-MS로 분석하여 chromatogram 상의 활성물질로 추정되는 peak의 mass spectrum과 Wiley library를 비교하여 profiling한 결과, Usnic acid가 주요 물질로 검출되었다. 항균활성물질로 추정되는 Usnic acid 화합물의 항균활성을 검정하기 위하여 표준품을 사용하여 생물검정한 결과 이 화합물이 강한 활성을 나타내었다. 따라서 송라로부터 분리한 Usnic acid가 균핵병의 원인균인 Sclerotinia sclerotiorum에 대한 항균 활성물질인 것으로 추정하였다.
Jeong, Da-Wool;Cho, Chi Heung;Lee, Jong Suk;Lee, Seung Hwan;Kim, Taewan;Kim, Dae-Ok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권7호
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pp.1094-1104
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2018
The peel of astringent persimmon (Diospyros kaki Thunb. cv. Cheongdo-Bansi) is a by-product of dried persimmon (gotgam). We investigated if deastringent peel extracts of persimmon cv. Cheongdo-Bansi had antioxidative and neuroprotective properties. Two different extracts were prepared: thermally and nonthermally treated persimmon peel extracts (TPE and NTPE, respectively). Both TPE and NTPE were fractionated sequentially in n-hexane, chloroform, ethyl acetate, n-butanol, and water. The TPE and NTPE ethyl acetate fractions had the highest total phenolic and flavonoid contents as well as antioxidant capacities among all the fractions. Pretreatment of neuronal PC-12 and SH-SY5Y cells with the TPE and NTPE ethyl acetate fractions increased cell viability after exposure to oxidative stress. The ethyl acetate fraction of TPE attenuated oxidative stress inside both PC-12 and SH-SY5Y cells more effectively than that of NTPE. Furthermore, the TPE and NTPE ethyl acetate fractions inhibited acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase. Analysis of ultra-high-performance liquid chromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometry results revealed gallic acid, kaempferol, kaempferol-3-O-galactoside, kaempferol-3-O-glucoside, quercetin, quercetin3-O-galactoside, quercetin-3-O-galactoside-2'-O-gallate, and quercetin-3-O-glucoside as the major phenolics of the TPE and NTPE ethyl acetate fractions. Taken together, these results suggest that the ethyl acetate fraction of deastringent persimmon peel is rich in antioxidants and has potential as a functional food to reduce oxidative stress.
야생 잎새버섯 추출물을 이용하여 심혈관계 질환과 관련된 기능성 식품 개발을 위한 기초자료를 얻기 위해 준비한 물 추출물과 유기용매 분획물의 혈전용해활성과 트롬빈저해활성, acetylcholinesterase 저해활성, 항산화활성을 확인하였다. 10 mg/mL의 농도에서 물 추출물과 물 분획물은 각각 0.93 plasmin unit와 0.73 plasmin unit의 높은 혈전용해활성을 나타냈으며, 부탄올 분획물은 79.60%의 트롬빈저해활성을 나타냈다. 클로로포름 분획물은 85.88%의 높은 acetylcholinesterase 저해활성을 나타냈고, 물 추출물의 항산화 활성은 39.81%로 비교적 낮게 나타냈다. 부분 정제된 효소를 포함하고 있는 물 분획물은 섬유소원의 Bβ chain를 모두 분해시켰지만, Aα chain은 느리게 분해시키고 γ chain 과는 반응하지 않았다. 실험 결과로부터 야생 잎새버섯 추출물은 높은 혈전용해활성과, 트롬빈저해활성, acetylcholinesterase 저해활성을 나타내 심혈관계 질환 예방을 위한 제약과 기능성식품 개발에 이용 가능할 것으로 기대된다.
유색미 쌀겨가 화학적 변이원에 의한 유전독성을 억제하는 작용기작을 유색미 품종인 수원415호 쌀겨의 유기용매추출물과 변이원인 mitomycin C를 이용하여 조사하였다. 70%에탄올 분획 및 클로로포름분획에서 수원 415호는 대조구로 사용된 추청에 비하여 변이원에 대한 억제활성이 월등히 높았음에도 불구하고 항산화활성은 추청보다 다소 낮은 결과로 보아 항산화작용과는 다른 억제기작이 존재함을 추정할 수 있었다. E. coli를 지시세포로 유색미 쌀겨 추출물의 mitomycin C에 대한 변이원성 억제기작을 조사한 결과, desmutagen으로 작용할 가능성이 크다는 사실을 알았고, 쌀겨 추출물과 mitomycin C를 반응시킨 후 반응액 중에 존재하는 유리상태의 mitomycin C를 정량한 결과, 유색미의 쌀겨 추출물이 mitomycin C에 직접 결합하여 변이원을 흡착함으로써 세포에 대한 유전독성을 억제할 것으로 생각되었다.
항균 활성이 우수한 예덕나무의 75% 에탄올 추출물을 용매 분획 후 일정 수준의 농도로 액체 배지(tryptic soy broth)에 첨가하여 L. monocytogenes 5 균주를 배양시킨 결과 헥산분획물 20 ppm에서 72시간 동안 증식 저해 효과를 나타내었다. 항균 활성이 우수한 예덕나무 헥산 분획물을 silica gel column chromatography로 1회 분획하여 항균 활성이 우수한 획분 M34를 얻었으며 M34 획분은 50 ppm 수준의 농도에서 실험 균주 모두 증식을 저해했다. 획분 M34를 2회 연속 분리하여 소 획분 M34-4-4를 얻은 후 액체 배지에 첨가하여 L. monocytogenes 2 균주를 접종한 후 72시간 배양한 결과 50 ppm 수준의 농도에서 증식 저해 효과가 나타났으며, M34-4-4을 구조 동정한 결과 linolenic acid로 확인되었다.
본 연구에서는 야관문의 열수 및 ethanol추출조건에 따른 항산화활성의 변화를 비교평가 하고자 하였다. 야관문에 존재하는 항산화물질은 용매분획 과정 중에서 열수추출조건에 비해 ethanol 추출조건에서 항산화 성분이 잘 이행되었고, 열수추출조건에서는 상대적으로 활성이 낮게 나타났다. Silica gel adsorption column chromatography 상의 chloroform-methanol의 용매계에서 각 획분에 대해 DPPH-radical scavenging 효과를 측정한 결과, 열수 추출한 경우는 methanol함량이 50% 부근을 중심으로 활성이 나타났다. 반면 ethanol 추출한 경우는 methanol함량이 50-60% 부근을 중심으로 활성이 나타나, 열수 추출물과 ethanol 추출물의 항산화활성 물질의 성질은 약간의 차이를 나타냄을 알 수 있었다. Sephadex LH-20의 gel filtration으로 분획한 결과 두가지 처리조건 모두 bed volumn에 대한 elution volumn의 비(Ve/Vt)가 1.25-1.52의 용출범위(1.1-2.2 g)에 활성이 인정되었다. 열수추출 및 ethanol 추출 조건의 경우 항산화 활성물질의 HPLC retention time은 각각 7.25분 그리고 7.41분으로 나타났지만 두 peak의 HPLC상의 거동이 일치하여 동일한 성분일 것으로 추정하였다.
The antioxidant potential of a $75\%$ methanolic extract of highbush blueberry (Vaccinium corymbosum L.) and its different fractions was investigated using different reactive oxygen species (ROS), nitric oxide (NO.), metal chelating and lipid peroxidation assays. Methylene chloride and $75\%$ methanol fractions showed equally high activities $(IC_{50} 0.010 mg/mL)$ for hydroxyl radical (HO) scavenging. Higher hydrogen peroxide $(H_2O_2)$ scavenging values were reported for the ethyl acetate and methylene chloride fractions and their $IC_{50}$ values were 0.20 and 0.15 mg/mL, respectively. Nitric oxide (NO.) and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (DPPH) scavenging activities were higher in ethyl acetate and methylene chloride fractions. Chloroform and water fractions showed higher activities in superoxide $(O_2.)$ scavenging. All fractions showed strong metal chelating capacities compared with the commercial antioxidants tested. The $0.1\%$ ethyl acetate fraction showed notable capacity to suppress lipid peroxidation in both fish oil and linoleic acid. Phenolic content was measured in all the fractions and methanolic extract. Among the fractions, ethyl acetate fraction showed the highest phenolic content.
Dioscorea japonica Thunb its effects has been used in f31k remedies f9r various purposes including treatment of diabetes, on hypoglycemic actiity and energy metabolism were investigated. The plant was extracted with methanol(MeOH) and fractionated into four layers hexane, chloroform(CHCI$_3$), butanol(BuOH), and $H_2O$. Diabetes mellitus was induced in male Sprague-Dawley rats by the injection of streptozotocin(STZ) into tail vein at a dose of 45mg/kg body weight(BW). Sprague-Dawley male rats weighing 160-200g were divided into five groups a diabetic control and four experimental groups such as hexane group, CHCl$_3$ group, BuOH group, and $H_2O$ group. The rats of all groups were fed on a AIN-76 diet and the four experimental groups were orally administered each fraction(500mg/kg BW) for 12 days. The diabetic control group was orally administered 5% carboxymethyl cellulose. The body weights were monitored and the concentrations of blood glucose were determined. The levels of glycogen and protein in liver were also measured. The plasma levels of cholesterol, triglyceride (TG), and fee fatty acid(FFA) were also analysed. The body weight gain was higher in the $H_2O$ group than in the control group. Heart weight was significantly reduced by administrations of Dioscorea japonica Thunb. The extents of blood glucose decrement in BuOH and $H_2O$ group were greater than that found in the control group. The muscle protein levels showed significantly higher amounts in all experimental groups. Glycogen levels were higher in the BuOH group than in the control group. The levels of TG were decreased in all experimental groups and the levels of plasma FFA were lower in the BuOH group. The plasma cholesterol levels were not influenced by these four fractions in diabetic rats. These results suggest that the orally administered H2O fraction of Dioscorea japonica Thunb exhibited hypoglycemic effects in STZ induced diabetic rats. (Korean J Nutrition 31(7) : 1093-1099, 1998)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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