Seo, Joo-Hyun;Min, Won-Ki;Lee, Jung-Hoo;Lee, Sun-Mee;Lee, Choul-Gyun;Park, Jin-Byung
한국해양바이오학회지
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제10권2호
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pp.44-52
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2018
A synthetic pathway, which consisted of fatty acid double bond hydratase, alcohol dehydrogenase, and Baeyer-Villiger monooxygenase, was applied to Chlorella oil to produce ester fatty acids, which can be hydrolyzed into medium chain fatty acids. Since linoleic acid is a major fatty acid constituent of Chlorella oil, a fatty acid double bond hydratase from Lactobacillus acidophilus NBRC13951, which is able to convert linoleic acid into 13-hydroxyoctadec-9-enoic acid, was used. Recombinant Escherichia coli expressing the fatty acid double bond hydratase from L. acidophilus NBRC13951 successfully transformed linoleic acid in Chlorella oil hydrolysates into 13-hydroxyoctadec-9-enoic acid with approximately 60% conversion yield. 13-Hydroxyoctadec-9-enoic acid was further converted into ester fatty acids by the recombinant E. coli expressing a long chain secondary alcohol dehydrogenase and a Baeyer-Villiger monooxygenase. The resulting ester fatty acids were then hydrolyzed into medium chain fatty acids by a lipase. Overall, industrially relevant medium chain fatty acids were produced from Chlorella oil hydrolysates. Thereby, this study may contribute to biosynthesis of medium chain fatty acids from microalgae oils as well as long chain fatty acids.
Three different types of extraction processes, which used supercritical carbon dioxide ($SCCO_2$) and organic solvent, were attempted to improve the extraction yield of oil from Chlorella vulgaris: cosolvent-modified $SCCO_2$ extraction, $SCCO_2$ extraction with ultrasonic sample treatment in organic solvent, and static extraction with organic solvent followed by dynamic $SCCO_2$ extraction. Among these, the last $SCCO_2$ extraction process was found to be most effective in the extraction of oil. Compared with pure $SCCO_2$ extraction, the extraction yield of oil was observed to increase about 7 times.
In this study, two different extraction techniques, organic solvent extraction and supercritical carbon dioxide ($SCCO_2$) extraction, were employed to evaluate the extraction efficiency of oil from Chlorella vulgaris. In the organic solvent extraction, the effects of various organic solvent on the extraction yield were investigated. The $SCCO_2$ extraction was carried out while varying such operating parameters as temperature, pressure, $SCCO_2$ flow rate, and cosolvent. About 4.9 wt% of oil was extracted from ground Chrollera vulgaris for 18 h when dichloromethane/methanol (2:1, v/v) was used as an extraction solvent. The oil yield of the $SCCO_2$ extraction was found to be very low (0.53 wt%) and to increase up to about 0.86 wt% with the addition of cosolvent.
The focus of this study was to observe the growth of Chlorella sp., Nannochloris sp., and Botryococcus braunii under mixotrophic conditions (i.e., added glycerol) with the aim of increasing the growth of biomass and algae oil content. A significant growth of biomass was obtained when grown in glycerol rich environment comparing to autotrophic conditions. 5 g/L glycerol yielded the highest biomass concentration for these strains. Mixotrophic conditions improved both the growth of the microalgae and the accumulation of triacylglycerols (TAGs). The maximum amount of TAG in Botryococcus braunii was reached in the growth medium with 10 g/L glycerol and Chlorella sp., Nannochloris sp. with 2 g/L glycerol. The content of saturated fatty acids of Chlorella sp., Nannochloris sp., and Botryococcus braunii was found to be 34.94, 14.23 and 13.39%, and the amount of unsaturated fatty acids was 65.06, 85.78 and 86.61% of total fatty acids, respectively. The fatty acid profiles of the oil for the culture possibility met the necessary requirements and are, therefore, promising resource for biofuel production.
Various single solvents were tested to find the effective solvent for the extraction of algae oil from wet-form Chlorella minutissima. In the case of single solvents, their extractabilities for algae oil were increased with their polarity because the water in wet algae cell is to form a solvent shell around the lipids. Based on these results, the wet-form algae samples were treated with a polar alcohol solvent and then a nonpolar solvent was added in algae residue. In the algae oil extraction by ethanol/n-hexane, total lipid contents were 40-50% and composition of triglyceride in extracted oil was 46.50%. Considering solvent toxicity of conventional solvent mixture such as chloroform and methanol for algae oil extraction, the ethanol/n-hexane system was identified as the effective one for the oil extraction from wet-form Chlorella minutissima.
This study examined the effect of formulated diets (composed of condensed freshwater $Chlorella$ or $Schizochytrium$ sp., $Crypthecodinium$ sp., and EPA oil sources derived from baker's yeast) on the population growth and fatty acid composition of the brackish water flea ($Diaphanosoma$$celebensis$) to determine diet effectiveness for mass production. Results indicated that the highest maximum density, fecundity, and population specific growth rate (SGR) of the flea were observed using a diet of $Tetraselmis$$suecica$ (control). However, results using condensed freshwater $Chlorella$ and the mixed treatment of $Schizochytrium$ sp.+$Crypthecodinium$ sp.+EPA oil did not significantly differ from the control treatment ($P$>0.05). Thus, $T.$$suecica$ could be replaced with a combination diet of $Schizochytrium$ sp., $Crypthecodinium$ sp., and EPA oil in condensed freshwater $Chlorella$ without growth interruption of $D.$$celebensis$. As the percentage of combination diet (mix of $Schizochytrium$ sp., $Crypthecodinium$ sp., and EPA oil) in condensed freshwater $Chlorella$ increased, the level of ARA, EPA, DHA, and n-3 HUFA in $D.$$celebensis$ also increased. However, the population density of $D.$$celebensis$ sharply decreased with the use of treated supplements C5M5 (CHL [50%] and $Crypthecodinium$ sp.+ $Schizochytrium$ sp. + EPA oil [MIX 50%]). The optimum proportions of CHL and MIX for $D.$$celebensis$ within the mixture were 70% and 30%, respectively. Based on the results, the combination of $Schizochytrium$ sp., $Crypthecodinium$ sp., and EPA oil in condensed freshwater $Chlorella$ appears to be a stable and effective food source for mass production of $D.$$celebensis$.
본 연구에서는 Chlorella saccharophila의 배양을 통하여 바이오에너지 자원을 대량으로 확보하고자 배지 최적화 실험을 진행하였다. 최적화 인자로는 배양 형태, 초기 접종량, 탄소원 종류 및 농도, 질소원 종류 및 농도, 배양시간이다. 실험 결과, 배양 형태는 광원과 외부탄소원을 모두 공급하는 mixotrophic 배양이 적절하였다. 초기 접종량은 3% (v/v), 탄소원은 glucose 30 g/L, 질소원은 $NaNO_3$ 0.95 g/L를 첨가하는 것이 우수하였다. 최적 배지 조건으로 배양한 결과, oil의 함량은 12일에서 가장 높았으나, 회수되는 C. saccharophila의 biomass양과 chlorophyll의 양은 10일에서 가장 높았다. 위의 결과는 미세조류의 배지 최적화를 통하여 대량배양을 위한 기초자료로 사용될 수 있으리라 판단된다.
해산 어류나 갑각류의 유생 사육시 초기 동물 먹이 생물인 rotifer, Brachionus plicatilis를 oil의 종류와 함량을 서로 다르게 첨가한 유지효모로 배양한 결과와, 이 rotifer와 Artemia nauplius에 위에 각 유지효모와 다른 여러 영양강화제로 영양강화한 후 넙치 자어에 공급하여 자어의 성장과 생존을 비교해 본 결과, 다음과 같이 요약할 수 있다. 1. 12종의 유지효모로 rotifer를 배양했을 때 오징어 간유 $15\%$가 첨가된 유지효모의 경우가 가장 좋았다. 2. 오징어 간유 $15\%$의 유지효모로 rotifer를 배양했을 때, rotifer.의 최대성장이 Chlorella ellipsoidea의 경우와 비슷하였고 (140 inds./ml) 나머지 유지효모는 현저히 낮았다. 3. 그러나 오징어 간유 $15\%$의 유지효모로 배양된 rotifer를 넙치 자어에 공급했을 때 자어의 성장과 생존율은 Chlorella의 경우보다 좋았다. 4. 또 영양강화제로 영양강화된 rotifer와 오징어 간유 $15\%$ 유지효모로 배양된 것을 넙치 자어에 공급하여 자어의 성장과 생존율을 비교했을 때도 오징어 간유 $15\%$의 유지효모가 가장 좋았다. 5. 오징어 간유$5\%,\;15\%,\;25\%$ 첨가된 유지효모로 영양강화된 Artemia nauplius를 넙치 자어에 공급했을 때 intact nauplius의 경우보다 자어의 높은 성장과 생존율을 나타냈고, 그 중에서 $25\%$ 함량의 유지효모가 가장 좋았다. 6. Artemia nauplius에 대한 유지효모의 적정 영양강화 시간과 농도는 각각 6시간과, 1.5g/g cyst였으며, 유지효모(오징어 간유 $5\%,\;15\%,\;25\%$)와 여러 영양강화제를 비교했을 때도 오징어 간유 $25\%$의 경우가 자어의 가장 높은 성장과 생존율을 나타냈다.
Rotifer culture fed on five types of artificial microparticle diets were evaluated to substitute the natural diets such as Chlorella or w-yeast. These microparticle diets including solidified blood using squid oil (SBSO), solidified blood using soybean oil (SBSB), nylon protein walled particle (NPW) simple coacervation oil capsule (SCO), complex coacervation oil capsule(CCO), were tested for the evaluation of feeding efficiency. The prepared micro particle diets had diameters ranging from 3 to 30 Jim. Rotifer culturing experiments were carried out in 3-liter beakers for 13-16 days. The initial inoculum density of rotifers was 10 ind./ml. The rotifers fed on Chlorella or $\omega-yeast$ showed maximal densities of 2,000 ind./ml in 9 days or 500 ind./ml in 7 days, respectively. Those fed on SBSO, SBSB or NPW showed maximal densities of 1568 ind./ml, 586 ind./ml or 503 ind./ml, respectively and the reproductive rates for those diets were equivalent to or better than w-yeast. However, the coacervated oil capsule showed lower maximal densities of 400 ind./ml for SCO and less than 100 ind./ml for CCO due to the unbalanced diet formulation and indigestibility.
바이오디젤과 바이오디젤을 기반으로 생산된 neopentyl polyol ester (NPE)계 윤활유 베이스, 디젤유 윤활유와 석유디젤을 분석대상으로 하여 독성을 평가하였다 조류를 이용하여 수용액 상에서 화학물질의 독성시험을 조사하는 OECD 201에 근거하여 Chlorella vulgaris를 96시간 동안 배양하면서 독성시험 분석한 결과, 바이오디젤과 NPE계 윤활유 베이스의 반수저해농도 $(EC_{50})$ 값은 각각 84와 69mg/L로서 두 물질이 독성 이 적은 경독성 (slightly toxic)물질인 것으로 판명되었다. 디젤유 윤활유와 석유디젤의 경우 반수저해농도 $(EC_{50})$ 값이 각각 42와 24 mg/L로서 중등독성 (moderately toxic) 물질로 판정 되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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