For the ultrastructural observation on Babesia gibsoni(B gibsoni), the protozoa were challenged experimentally to splectomized dog. To examine the ultrastructure of the B gibsoni in the erythrocyte, the infected erythrocytes were collected at the cephalic or jugular vein of the dog. The results obtained by TEM(transmission electron microscopy) were as follows; 1. The sizes of protozoa in erythrocytes are $0.92{\pm}0.36{\mu}m{\times}0.67{\pm}0.21{\mu}m$, the sizes of nucleus of the protozoa are $0.55{\pm}0.24{\mu}m{\times}0.38{\pm}0.26{\mu}m$, and sizes of rhoptries in plasma of the protozoa are $0.33{\pm}0.05{\mu}m{\times}0.25{\pm}0.07{\mu}m$, respectively. 2. The tropozoite membrane in the erythrocyte was one, and it's nuclear membrane was made up of double. But the protozoa of initial stage in infected erythrocyte had double clear mambranes, and distinguished from plasma membrane of red blood cell. 3. The mitochondrialike structures covered with two membranes were observed in the protozoa. 4. Mitochondria and vesicles of the reticulocyte were observed near protozoa in the erythrocyte. 5. There are rhoptry, coiled structure and single nucleous in the merozoite. 6. The shape of rhoptry was round or ovoid form and in occasionally, the content of rhoptry was lost partially. 7. There was able to observe the dividing process of the protozoa. 8. Maurer's cleft-like structure was observed.
Kim, Wan-Sik;Jung, Seung-Hyun;Shin, Gil-Jo;Moon, Il-Soo;Lee, Won-Chol
Journal of Life Science
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v.17
no.1
s.81
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pp.143-149
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2007
Scutellaria baicalensis GEORGI(SB) is used in oriental medicine for the treatment of incipient strokes. Although it has been reported that SB is neuroprotective in a hypoxia model, its mechanism is poorly understood. Here, we investigated the effect of SB on the modulation of retinoic acid receptor a (RARa). Rat cerebrocortical cells were grown in neurobasal medium. On DIV12 cells were treated with SB $(20{\mu}g/ml)$ and given a hypoxic shock $(2%\;O_2/5%\;CO_2,\;3hr)$ on DIV14. In situ hybridization using cRNA probe revealed that RARa mRNA punctae are distributed, in addition to nucleus, throughout neuronal dendrites, where SB upregulated its density by 69.8% (p=0.001) and 129.8% (p=0.001) in both normoxia and hypoxia, respectively. At the protein level, SB upregulated RARa in the neuronal soma by 78.8% (p=0.004) and 23.6% (p=0.001) in both normoxia and hypoxia, respectively. These results indicate that SB upregulates RARa in both normoxia and hypoxia, which might contribute to the neuroprotection.
Infection of Vero cells with herpes simplex virus type-1 (HSV-1) resulted in a series of changes in intra-cellular free calcium concentration $([Ca^{2+}]_i)$. A significant and maximal decrease $[Ca^{2+}]_i$ was observed at 4 hours postinfection (hr p.i.) in HSV-1-infected in Vero cells. Inactivation of HSV-1 with UV irradiation and heat treatment abolished HSV-1-induced decrease in $[Ca^{2+}]_i$ at 4 hr p.i. in Vero cells. And the degree of the decrease in $[Ca^{2+}]_i$ was dependent on the amount of input virus. Taxol, which stabilizes the polymerization of microtubule blocked HSV-1-induced decrease in $[Ca^{2+}]_i$ at 4 hr p.i., suggesting that microtubule may mediate the transport of HSV-1 nucleocapsid to the nucleus of infected cell. Treatment of HSV-1-infected Vero cells with metabolic inhibitors such as cycloheximide, cordycepin, or acyclovir partially reversed the decrease in $[Ca^{2+}]_i$ at 4 hr p.i.. Thus, it is suggested that HSV-1 induced decrease in $[Ca^{2+}]_i$ at 4 hr p.i. in Vero cells may play an important role in the multiplication of HSV-1.
PARK In-Seok;KIM Hyung-Sun;KIM Eun-Sil;KIM Jung-Hye;PARK Chul-Won
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.30
no.3
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pp.408-412
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1997
The cytogenetic analysis of river puffer, Takifugu obscurus belongs to Family Tetraodontidae, was performed. The chromosome number of T. obscurus was 44 and the fundamental number was 64. Heteromorphic sex chromosomes were not found. The mean cellular size and nuclear size were $11.01\times7.95{\mu}m$ and $4.05\times3.15{\mu}m$, respectively. The mean surface area and volume in cell and nucleus were $68.76{\mu}m^2\;and\;366.00{\mu}m^3,\;10.06{\mu}m^2\;and\;21.36{\mu}m^3$, respectively. The number of erythrocyte of both female and male was $12\~13\times10^5/m\ell$. Gill tissues from diploid individuals had cells with one or two nucleoli. These cytogenetic studies should be used for cytotaxonomy and as a valuable estimation of polyploidy to come in T. obscurus.
Docosahexaenoic acid (DHA), a principal of mackerel-derived fermented fish oil, increases the proliferation of dermal papilla cells (DPCs) via the upregulation of cell cycle-associated proteins such as cyclin D1 and cdc2 p34, and might promote hair-growth. However, the intracellular mechanisms that underlie the action of DHA in the proliferation of DPCs have not been investigated fully. In this study, we addressed the action mechanisms of DHA to trigger the activation of anagen in DPCs. DHA activated β-catenin signaling by the increased phosphorylation at serine 552 and serine 675 as well as the translocation and accumulation of activated β-catenin into the nucleus. In the other hand, DHA inhibited canonical TGF-β/Smad signaling by the decreased phosphorylation of Smad2/3. Taken together, the results indicate that DHA might stimulate anagen signaling via the activation of Wnt/β-catenin pathway, while the inactivation of canonical TGF-β signaling pathway in DPCs.
The chromosome numbers of bagrid catfish, Pseudobagrus fulvidraco was 52, nine pairs (No. 1 to 9) were metacentrics with the range of relative length 2.89~6.22 and arm ratio 1.09~1.58 ; thirteen pairs (No. 10 to 22) were submetacentrics with the range of relative length 2.88~5.88 and arm ratio 1.80~3.65 ; and all other pairs (No. 23 to 26) were acrocentrics with the range of relative length 2.63~3.30 and arm ratio 9.01~10.67, and fundamental number was 104. Heteromorphic sex chromosomes were not found. There was not exist significant difference in resultant erythrocyte measurements and parameters between female and male (p<0.05). The mean sizes of cell and nucleus, were $11.03{\times}9.67{\mu}m$ and $4.18{\times}3.66{\mu}m$ respectively. The number of erythrocytes of both females and males were $6{\sim}7{\times}10^5/ml$. Gill tissues from diploid individuals had cells with one or two nucleoli.
Itoh, Ken;Wakabayashi, Nobunao;Katoh, Yasutake;Ishii, Tetsuro;Igarashi, Kazuhiko;Engel, James Douglas;Yamamoto, Masayuki
Proceedings of the Korea Environmental Mutagen Society Conference
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2002.05a
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pp.25-35
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2002
Transcription factor Nrf2 is essential for the antioxidant responsive element (ARE)-mediated induction of phase II detoxifying and oxidative stress enzyme genes. Detailed analysis of differential Nrf2 activity displayed in transfected cell lines ultimately led to the identification of a new protein, which we named Keap1, that suppresses Nrf2 transcriptional activity by specific binding to its evolutionarily conserved amino-terminal regulatory domain. The closest homolog of Keap1 is a Drosophila actin-binding protein called Kelch, implying that Keap1 might be a Nrf2 cytoplasmic effector. We then showed that electrophilic agents antagonize Keap1 inhibition of Nrf2 activity in vivo, allowing Nrf2 to traverse from the cytoplasm to the nucleus and potentiate the ARE response. We postulate that Keap1 and Nrf2 constitute a crucial cellular sensor for oxidative stress, and together mediate a key step in the signaling pathway that leads to transcriptional activation by this novel Nrf2 nuclear shuttling mechanism. The activation of Nrf2 leads in turn to the induction of phase II enzyme and antioxidative stress genes in response to electrophiles and reactive oxygen species.
Park, Jun-Young;Jo, Jae-Beom;Kim, In-Ryoung;Kim, Gyoo-Cheon;Kwak, Hyun-Ho;Park, Bong-Soo
International Journal of Oral Biology
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v.36
no.3
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pp.155-162
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2011
Eugenol (4-allyl-2-methoxyphenol) is a naturally occurring phenolic compound that is widely used in dentistry as a component of zinc oxide eugenol cement that is commonly applied to the mouth environment. Cisplatin is one of the most potent known anticancer agents and shows significant clinical activity against a variety of solid tumors. This study was undertaken to investigate the synergistic apoptotic effects of co-treatments with eugenol and cisplatin on human melanoma (G361) cells. To investigate whether this co-treatment efficiently reduces the viability of G361 cells compared with each single treatment, an MTT assay was conducted. The induction and augmentation of apoptosis were confirmed by DNA electrophoresis, Hoechst staining and an analysis of DNA hypoploidy. Western blot analysis and immunofluorescent staining were also performed to evaluate the expression levels and the translocation of apoptosis-related proteins following this co-treatment. Furthermore, proteasome activity and mitochondrial membrane potential (MMP) changes were also assayed. The results indicated that a co-treatment with eugenol and cisplatin induced multiple pathways and processes associated with an apoptotic response in G361 cells including nuclear condensation, DNA fragmentation, a reduction in MMP and proteasome activity, the increase and decrease of Bax and Bcl-2, a decreased DNA content, the release of cytochrome c into the cytosol, the translocation of AIF and DFF40 (CAD) into the nucleus, and the activation of caspase-9, caspase-7, caspase-3, PARP and DFF45 (ICAD). In contrast, separate treatments of 300 ${\mu}M$ eugenol or 3 ${\mu}M$ cisplatin for 24 h did not induce apoptosis. Our present data thus suggest that a combination therapy of eugenol and cisplatin is a potential treatment strategy for human melanoma.
Cancer-inducing PMA stimulates cells to increase the expression of transcription factor c-Jun/c-fos and then increase the activity of AP-1 in the nucleus. The activity of AP-1 has been reported to cause cancer. In this study, We conducted cytotoxicity experiments to assess the safety of natural marker compounds and also observed inhibition of activator protein(AP-1) activity to predict cancer-preventing effects. The results of this experiment indicated that arctigenin, manassantin A, and B can predict the development of cancer prevention agents.
Most living organisms exhibit the circadian rhythm in their physiology and behavior. Recent identification of several clock genes in mammals has led to the molecular understanding of how these components generate and maintain the circadian rhythm. Many reports have implicated the photic induction of either mPer1 or mPer2 in the hypothalamic region called the suprachiasmatic nucleus (SCN) to phase shift the brain clock. It is now established that peripheral tissues other than the brain also express these clock genes and that the clock machinery in these tissues work in a similar way to the SCN clock. To determine the role of the two canonical clock genes, mPer1 and mPer2, in the peripheral clock shift, stable HEK293EcR cell lines that can be induced and stably express these proteins were prepared. By regulating the expression of these proteins, it could be shown that induction of the clock genes, either mPer1 or mPer2 alone is not sufficient to cause clock phase shifting in these cells. Our real-time PCR analysis on these cells indicates that the induction of mPER proteins dampens the expression of the clock-specific transcription factor mBmal1. Altogether, our present data suggest that mPer1 and mPer2 may not function in clock shift or take part in differential roles on the peripheral circadian clock.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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