2005년과 2006년에 인삼 잿빛곰팡이병균을 각각 89개와 147개씩을 분리하여 실험에 사용하였다. Carbendazim은 $EC_{50}$값이 $10.0{\mu}g/ml$ 이상을, carbendazim/diethofencarb 합제는 $0.2{\mu}g/ml$ 이상을 저항성 검정의 기준으로 하였다. 이 기준을 가지고서 두 종류의 살균제에 대한 저항성 균주의 분리 빈도를 조사하면 carbendazim의 경우, 2005년에 87.6%, 2006년에는 96.6%로 나타나, 포장에서 분리되는 대부분의 Botrytis cinerea가 저항성균인 것으로 밝혀졌다. Carbendazim/diethofencarb 합제의 경우에는 저항성 균주의 분리빈도는 2005년과 2006년에 각각 23.6%와 24.5%로 나타났다. Carbendazim/diethofencarb 합제는 지역에 따라서 저항성균의 분리 빈도가 크게 달랐다. 경기도 연천 지역의 경우 저항성 균주의 분리빈도가 2005년에는 4.3%였고, 2006년에는 저항성 균주가 전혀 분리되지 않았다. 이에 비하여 다른 지역의 경우 저항성 균주의 빈도가 크게 높았는데, 2005년에는 경북 봉화와 예천 그리고 경기도 파주의 저항성 균주의 빈도가 각각 35.5%, 70.0% 및 40.0%였고, 2006년에는 전북 정읍의 저항성 균주의 빈도가 47.1%였다. 따라서 carbendazim/diethofencarb 합제에 대한 저항성 검정이 포장에서 지속적으로 수행되어야 한다.
Kim, Joo-Hyung;Min, Ji-Young;Bae, Young-Seok;Kim, Heung-Tae
The Plant Pathology Journal
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제25권4호
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pp.322-327
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2009
A total of 23 isolates of Botrytis cinerea causing the grey mold were collected from infected ginseng in several fields of Korea. The sensitivity to carbendazim and the mixture of carbendazim plus diethofencarb was determined through a mycelial inhibition test on PDA amended with or without fungicides. B. cinerea isolates were classified as 3 phenotypes, which were the first phenotype resistant to both of carbendazim and the mixture ($Car^RMix^R$), the second one resistant to carbendazim and sensitive to the mixture ($Car^RMix^S$), and the last one sensitive to both of them ($Car^RMix^S$). Carbendazim resistance correlated with a single mutation $\beta$-tubulin gene of B. cinerea amplified with primer pair tubkjhL and tubkjhR causing a change of glutamate to alanine at amino acid position 198. Furthermore, the substitution of valine for glutamate led the resistance to carbendazim and the mixture at the same position of amino acid. PCR-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis using the restriction endonuclease, Tsp451 and BstUI allowed differentiation of the PCR fragment of $\beta$-tubulin gene of $Car^SMix^S$ isolates from that of $Car^RMix^R$ and $Car^RMix^S$ isolates. This method will aid in a fast detection of resistance of carbendazim and the mixture of carbendazim plus diethofencarb in B. cinerea in ginseng field.
Three three hundred and ninety seven isolates of Botrytis cinerea were isolated from infected plants of strawberry, tomato and cucumber from several areas in Korea during 1994∼1996 and the resistance of these isolates against some fungicides were examined. The isolation frequency of phenotypes resistant to carbendazim, procymidone, and diethofencarb were found to be 69.9 43.7, and 31.8%, respectively. The isolates were divided into six phenotypic groups; SSR, SRR, RSS, RRS, RSR and RRR, representing sensitive (S) or resistant (R) to benzimidazole, dicarboximide, and N-phenylcarbamate fungicides in order. The percentage of six phenotypes were 28.2, 2.0, 27.2, 41.0, 0.9 and 0.8%, respectively. On the basis of the mycelial growth inhibition (%) B. cinerea isolates were divided into three classes (class 1; 0∼50%, class 2; 51-99%, class 3; 100% inhibition) on carbendazim and three classes (class 1; 0∼75%, class 2; 76∼99%, class 3; 100% inhibition) on procymidone and the mixture of carbendazim+diethofencarb, respectively. Changes in sensitivity levles to carbendazim and carbendazim+diethofencarb were affected by introduction and increasing ratio of the use of diethofencarb.
콩 검음뿌리썩음병의 방제를 위한 살균제 선발을 위하여 실내 및 온실 검정을 실시하였다. 한천희석법과 96-well microtiter plate법을 이용하여 총 25종의 살균제의 병원균에 대한 생육 억제 효과를 검정하였다. 보호용 살균제 중에서 iminoctadine을 제외한 dithianon, dichlofluanid, mancozeb, captan 등은 한천희석법에서 조사한 병원균의 생육을 억제하는 $EC_{50}$값은 $500{\mu}g\;mL^{-1}$ 이상으로 효과가 매우 낮았지만, 96-well microtiter plate법에서는 4.65, 0.61, 4.64, $0.29{\mu}g\;mL^{-1}$로, 병원균의 포자 발아에 대하여 매우 높은 활성을 보였다. 그러나 ergosterol 생합성을 저해하는 살균제 (EBI) 그룹은 물질에 따라 매우 다른 살균활성을 보였다. Difenconazole의 경우에는 균사생육보다는 포자발아 억제활성이 높았고, prochloraz의 경우에는 균사 생육활성과 포자 발아억제활성이 서로 유사하였다. 이에 비하여 다른 EBI 살균제들은 포자발아보다는 균사생육저해활성이 큰 것으로 나타났다. Carbendazim과 diethofencarb의 혼합제와 dazomet만이 두 가지의 실내 검정법 모두에서 우수한 효과를 보였다. Carbendazim과 diethofencarb의 혼합제를 비롯한 8종의 살균제를 선발하여 온실검정을 실시한 결과, carbendazim과 diethofencarb의 혼합제만이 병원균을 접종하기 2일 전과 후에 토양에 처리하였을 때, 75와 76.7%의 효과를 보였고, tebuconazole은 병원균을 접종하고 2일 후에 관주처리 하였을 때, 83.3%의 효과를 보였다.
46종 식물의 에탄올 추출물을 대상으로 기주식물상의 주요 식물병 6종에 대하여 방제효과를 온실실험으로 조사하였다. 46종의 시험식물 추출물을 pot당 5, 10 mg씩 처리하였을 때 해바라기꽃과 옥수수잎 추출물이 벼도열병에 80% 이상의 방제효과를 나타내었다. 5 mg의 농도에서 해바라기 잎과 꽃, 쑥갓 호박씨, 토마토 옥수수와 옥수수익의 추출물이 잿빛곰팡이병에 80% 이상의 방제효과를 나타내었고, 밀녹병에 대해서는 피망, 호박씨, 해바라기씨, 토마토 및 아욱의 추출물이 80% 이상의 방제효과를 나타내었다. 보리흰가루병에 대해서는 오이, 해바라기씨, 감자 및 옥수수와 잎의 추출물이 10 mg의 농도에서 80% 이상의 방제효과를 나타내었다. 그러나 토마토역병과 벼잎집무늬마름병에 대해서는 모든 시료가 활성을 나타내지 않았다. 살균치 carbendazim, diethofencarb, procymidone 저항성 균주에 대해서는 해바라기잎과 꽃의 추출물이 모든 균주에 높은 방제효과를 나타내었고, 쑥갓과 해바라기씨의 추출물은 SSR(carbendazim 감수성, diethofencarb 감수성, procymidone 저항성 균주) 및 RSR(carbendazim 저항성, diethofencarb 감수성, procymidone 저항성 균주)에 90% 이상의 방제효과를, 옥수수와 잎은 SSR(carbendazim 감수성, diethofencarb 감수성, procymidone 저항성 균주)에 강한 방제효과를 보였다. 그러나 RROS(carbendazim 저항성, diethofencarb 저항성, procymidone 감수성 균주)에 대해서는 사용된 시료 중 토마토 추출물만이 방제효과를 보였다.
Kim, Joon-Tae;Park, Sook-Young;Choi, Woo-Bong;Lee, Yong-Hwan;Kim, Heung-Tae
The Plant Pathology Journal
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제24권1호
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pp.17-23
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2008
A total of 33 isolates of Colletotrichum species obtained from pepper, apple, and strawberry in 2001 and 2002 were identified based on mycological characteristics, responses to fungicides carbendazim and the mixture of carbendazim and diethofencarb, and nucleotide sequence analysis of internal transcribed spacer (ITS) regionMost of the Colletotrichum isolates from pepper could be identified as C. acutatum. The pepper isolates produced grey white mycelia that gradually changed to dark gray. The conidia were variable in size, and almost cylindrical in shape with at least one rounded end. They could grow on PDA amended with carbendazim or with the mixture of carbendazim and diethofencarb at $10{\mu}g/ml$, to which the isolates from apple and strawberry were very sensitive. A part of the ITS regions from the Colletotrichum isolates was amplified with the specific primers designed for C. acutatum (Ca1-1) or C. gloeosporioides (Cg1-3). A primer pair of Ca1-1 and a universal primer (ITS4) amplified a 496-bp DNA fragment from all of the pepper isolates examined and one apple isolate. Taken together, it is conclusive that the Colletotrichum isolates causing the typical lesion of anthracnose on pepper fruits are C. acutatum.
Thirty-six isolates of Colletotrichum spp. were obtained from infected grapes in two different locations of Korea; 18 isolates from Cheonahn, where carbendazim (MBC) and the mixture of MBC and diethofencarb (NPC) had been applied to control grape ripe rot, and 18 isolates from Cheongju, where no fungicides had been used. Sequences analysis of the internal transcribed spacer (ITS) and the $\beta$-tubulin gene identified 34 of the 36 isolates as Colletotrichum gloeosporioides. The remaining two isolates from Cheongju were identified as C. acutatum. Of the 18 isolates from Cheonahn, 12 were resistant to both MBC and the mixture (MBC+NPC), and six were sensitive to them. All C. gloeosporioides isolates from Cheongju, but not the two C. acutatum isolates, were sensitive to these fungicides. Sequence analysis of the $\beta$-tubulin gene in all isolates revealed that C. gloeosporioides resistant to MBC and MBC+NPC had a tyrosine instead of phenylalanine at the amino acid position 200. The appearance of resistance to MBC and the mixture in C. gloeosporioides correlated with the history of fungicide application in Korea.
다양한 작물로부터 분리한 4종의 탄저병균, C. gloeosporioided, C. acutatum, C. coccodes 및 C. dematium 등의 균주들에 대하여 여러 가지 살균제, 즉 carbendazim, carbendazim과 diethofencarb와의 혼합제, 4개의 보호용 살균제 및 3개의 ergosterol 생합성 저해(EBI) 살균제 등에 대한 약제 반응을 조사하였다. Benzimidazole계에 속하는 carbendazim에 대해서 4종의 Colletotrichum의 반응은, C. acutatum은 사용한 6개의 균주 모두 $EC_{50}$값은 $0.001{\sim}3.04{\mu}g/ml$ 사이에 있었으며, 모든 균주의 MIC 값은 $100{\mu}g/ml$ 이상이었다 고추와 사과, 딸기에서 분리한 C. gloeosporioides는 carbendazim에 대해서 저항성과 감수성 반응이 뚜렷하게 구별되었는데, 고추의 두 균주는 $EC_{50}$값은 0.24와 $0.01{\mu}g/ml$이었으며 MIC 값 역시 $1.0{\mu}g/ml$ 이었다. 이러한 반응은 사과와 딸기에서 분리한 균주 중에서 감수성 반응을 보이는 균주인 B13과 138, 그리고 CGF89와 94, 252에서도 비슷한 경향을 보였다. 그러나 저항성 균주로 판명된 B90, 92, 147과 CGF50, 54, 222는 $EC_{50}$값과 MIC 값 모두가 $100{\mu}g/ml$를 상회하였다. C. gloeosporioides는 carbendazim과 역상관 교차 저항성을 보이는 diethofencarb와 carbendazim의 혼합제에 대해서는 모두 $1{\sim}100{\mu}g/ml$의 MIC값을 보였지만, C. acutatum은 $100{\mu}g/ml$이상의 MIC값을 보였다. Carbandazim에 대하여 C. coccodes는 C. acutatum과 그리고 C. dematium는 C. gloeosporioides의 감수성 균주들의 반응과 유사한 반응을 보였다. 4종의 보호용 살균제에 대해서는 C. acutatum은 C. gloeosporioides보다도 높은 저항성인 반응을 보였다. 그러나 ergosterol 생합성 저해 살균제에 대해서는 4종의 탄저병균이 일정한 경향을 보였다.
국내 나리 주산단지에서 분리한 Botrytis elliptica 48개 균주와 Botrytis cinerea 23개 균주를 대상으로 농가포장에서 사용되고 있는 살균제에 대한 약제저항성 검정을 실시하였다. 살균제 benomyl과 mancozeb에 대한 $EC_{50}$ 값은 $500-1,000{\mu}g/ml$로 시험에 사용된 모든 약제 중에서 가장 높게 나타나 이 약제들은 나리재배 포장에서 잎마름병에 대한 방제 효과가 거의 없을 것으로 판단되었다. 또한 나리 재배농가에서 잎마름병 방제약제로 가장 많이 사용되고 있는 dicarboximide계 procymidone 살균제와 iprodione 살균제의 경우, $EC_{50}$ 값 $5-50{\mu}g/ml$은 각각 93.7%와 100%이었고, diethofencarb/carbendazim 합제와 fludioxonil 살균제의 $EC_{50}$ 값 $0-0.1{\mu}g/ml$ 범위는 각각 98.0%와 93.8%이었다. 한편, 비가림 포장 재배에서의 잎마름병 방제 효과는 발병 직후 iprodione 약제, diethofencarb/carbendazim 합제, fludioxonil 약제를 교호적으로 4회 살포하였을 때 가장 우수하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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