• 제목/요약/키워드: CHO cell

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초파리 Schneider2 세포와 Chinese hamster ovary-K1 세포에서 Aedes aegypti 5-Hydroxytryptamine7 수용체의 발현비교 (Comparative Expression of the Aedes aegypti 5-Hydroxytryptamine7 Receptor in Drosophila Schneider2 and Chinese Hamster Ovary-K1 Cells)

  • 이대원
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제43권2호
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    • pp.155-162
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    • 2004
  • 세로토닌 수용체는 세로토닌과 반응하여 세포막의 G단백질을 통해 중개단백질 (adenylyl cyclase, phospholipase C, cGMP phosphodiesterase, ion channel)을 활성화시켜, 이뇨, 기억, 발생 등의 다양한 생리적 반응에 관여한다. 곤충세포인 Schneider2 (S2)와 척추동물 세포인 Chinese hamster ovary (CHO)-Kl에서 Aedes 5-HT$_{7}$ 수용체 유전자 발현을 비교하기 위해, Aedes 5-HT$_{7}$ 수용체 유전자를 형질이입시켰다. 선발된 세포주들(Tr-S2, Tr-CHO)에서 세로토닌 수용체 유전자의 발현은 reverse transcription-PCR, Western blot, immunocytochemistry를 이용하여 확인하였다. 세로토닌 농도증가에 대한 Aedes 5-HT$_{7}$수용체의 기능을 세포 내 cAMP수준을 통해 조사한 결과,Tr-CHO 세포주는 Tr-S2 세포주보다 9배 이상 cAMP수준이 높게 나타났으며, 농도에 의존적이었다. 이 결과는 수용체 유전자가 세포에서 발현되었으나, 세포의 종류와 세포막에 존재하는 G단백질 차이에 따라 중개단백질 활성 차이가 있다는 것을 보여주었다. CHO-Kl 세포에서 Aedes 5-HT$_{7}$ 수용체의 기능이 S2 세포보다 더 효율적이며, Aedes 5-HT$_{7}$ 수용체를 발현하는 Tr-CHO 세포주는 동력제 또는 대립제 검정에 활용될 수 있을 것으로 기대된다. 것으로 기대된다.

고효율 단결정 실리콘 태양전지 (High Efficiency Crystalline Silicon Solar Cells)

  • 김동섭;조은철;조영현;;민요셉;이수홍
    • 태양에너지
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    • 제17권1호
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    • pp.17-26
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    • 1997
  • 단결정 실리콘 태양전지는 PESC(Passivated Emitter Solar Cell), PERC(Passivated Emitter and Rear Cell), Point Contact Cell, PERL(Passivated Emitter and Rear Locally-Diffused Cell) 형태로 기술적인 발전을 해왔다. BCSC(Buried Contact Solar Cell)는 낮은 제조 단가로 높은 효율을 얻을 목적으로 개발되었으며 개량된 형태인 DSBC(Double Sided Buried Contact Cell)는 양면으로 빛을 흡수할 수 있는 장점이 있다.

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Chinese hamster ovary세포에서 발현된 pres2 및 S부위 함유 HBsAg의 항체유발능 (Antibody productivity of HBsAg containing both preS2 and S regions expressed in Chinese hamster ovary cells)

  • 정성균;박정민;이상봉;박동우;김동연;김기호;김홍진
    • 약학회지
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    • 제45권6호
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    • pp.708-714
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    • 2001
  • Many studies have provided evidences that hepatitis B surface antigen (HBsAg) including preS region could be an ideal candidate for a new hepatitis B virus (HBV) vaccine with higher efficacy. We established CHO cell lines, IY-CHO-2 and IY-CHO-11 expressing high levels of HBsAg containing preS2 and S protein by stable transfection method. These cell lines expressed the correct size (about 1 kb in length) of HBsAg mRNA as expected. The purified protein from the culture supernatants of the clones showed the same sizes as those expressed in native hepatitis B virus (24 kDa, 27 kDa, 34 kDa and 36 kDa). Antibody productivity of CHO-derived HBsAg protein at lower dose challenge was higher than the protein containing S region alone expressed in yeast system. These results indicate that CHO-derived HBsAg protein containing preS2 and S region can be effectively used for a better immune response as a HBV vaccine.

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Development of High Density Mammalian CellCulture system for the Production of Tissue-Type Plasminogen Activator

  • Park, Byong-Gon;Chun, Joo-Mi;Lee, Chang-Jin;Chun, Gie-Taek;Kim, Ik-Hwan;Jeong, Yeon-Ho
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제5권2호
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    • pp.123-129
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    • 2000
  • A high cell density culture system for the anchorage dependent CHO cells was developed based on the combination of in removal of ammonium ion and microcarrier culture system, and semi-fed-batch feeding of glucose and glutamine was employed to the developed culture system. The glass bead was selected as an optimum microcarrier in terms of cell growth. An ammonium ion selective zeolite, Phillipsite-Gismondine, was packed in a dialysis menium ion. The semi-fed-batch operation was employer to the novel culture system for the high density cell culture, and the results showed the cell growth was improved by 32% and tPA productivity by 250%.

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민간약 신경초의 생약학적 연구 (Pharmacognostical Studies on a Folk Medicine "SinKyungCho")

  • 배지영;구영민;박종희;안미정
    • 생약학회지
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    • 제44권4호
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    • pp.326-331
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    • 2013
  • A Korean folk medicine, "SinKyungCho" has been used to cure common cold and rheumatis. While this crude drug has similar morphological feature to that of Rubia species, the botanical origin has never been studied pharmacognostically. Therefore, in order to clarify the botanical origin of "SinKyungCho", the morphological and anatomical characteristics of Rubia species growing in Korea, i.e. R. akane, R. chinensis var. glabrescens, R. cordifolia var. pratensis, R. cordifolia var. sylvatica were studied. Especially, differing from the other three species, R. cordifolia var. pratensis has 2-4 cork cell layers under the endodermal cell layer. R. cordifolia var. sylvatica showed the largest number of parenchyma cell layers in cortex by 8-17. While the average ratio of stele to root transverse section is over 45% for R. akane and R. cordifolia var. pratensis, the ratio is under 45% for R. chinensis var. glabrescens and R. cordifolia var. sylvatica. According to these morphological criteria, the folk medicine "SinKyungCho" from Korean traditional market was proved to be the underground part of R. akane.

형질전환 Chinese Hamster Ovary 세포에서 Albumin-erythropoietin의 생산시 Silkworm Gland Hydrolysate의 효과 (Effects of Silkworm Gland Hydrolysate on Albumin-erythropoietin Production in Transgenic Chinese Hamster Ovary Cells)

  • 최민호;차현명;김선미;최용수;김동일
    • KSBB Journal
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    • 제28권2호
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    • pp.86-91
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    • 2013
  • To date, various strategies have been studied to increase specific productivity in Chinese hamster ovary (CHO) cell cultures. Also, albumin-fusion platform is being applied to other important bioactive peptides with short half-lives. Here, we investigated the effects of silkworm gland hydrolysate (SGH) on the production of albumin-erythropoietin (Alb-EPO) in transgenic CHO cells. The viable cell density of CHO cells was increased by 13% in the medium containing 1 mg/mL SGH higher than in the control medium without SGH. In addition, the production of Alb-EPO was also 1.26- fold enhanced by reducing the early apoptosis of CHO cells. In conclusion, SGH could be used as a useful supplement for the enhancement of recombinant protein production.

Electroporation 방법을 이용한 포유동물 세포내 GFP 유전자 도입

  • 양병철;성환후;김동훈;이상기;오현주;임석기;박수봉;이은주;민관식
    • 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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    • 한국수정란이식학회 2002년도 국제심포지엄
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    • pp.70-70
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    • 2002
  • 형질전환 가축을 생산하기 위하여 최근 체세포 복제 기법을 이용하고 있다. 이러한 체세포를 이용한 형질전환 동물의 생산에는 체세포내에 유전자의 도입 효율이 직접적인 영향을 주게 된다. 따라서 본 연구는 세포내 유전자의 transfection 효율을 높이고자 한우의 체세포를 이용하여 여러 가지 조건에서 유전자 도입을 실시하였다. 세포내 유전자 도입 방법은 electroporation (EP) 방법을 이용하였다. 사용한 세포는 소의 귀세포(KbESF), 태아섬유아세포 (KbFF), 그리고 대조구로서 CHO cell을 이용하여 GFP 유전자를 도입하였다. EP는 0.4 cm cuvette을 사용하였고, voltage는 0.25 kV, 그리고 field strength 는 0.625 kV/cm 조건으로 실시하였으며, pulse times은 각각 1, 2, 또는 3회를 사용하였다. KbFF와 KbESF에서는 각각 pulse times을 증가시킬수록 유전자도입 세포수가 증가하였으나 (KbFF: 81, 634, 1,065 cells/$10^{6}$ cells, KbESF: 1,011, 5,567, 15,408 cells/$10^{6}$ cells), CHO cell에서는 pulse times을 증가시킬 수록 오히려 유전자도입 세포수가 감소하였다 (CHO: 1,591, 687, 297 cells/$10^{6}$ cells). 그리고 2주 동안 neo selection을 실시 한 결과 KbFF, KbESF, CHO에서 각각 93, 35, 184 colony가 선발되었으며, 이 중 65.6%, 8.6%, 4.3% 가 GFP 형광 발현 colony로 나타났다. 한편 CHO cell에서 transfection cell수가 감소된 것은 EP의 자극으로 인해 손상된 세포가 많이 발생한 것으로 나타났다. 또한 neo selection에서 선발된 colony중 GFP가 발현되지 않거나 일부만 발현되는 colony들이 많이 발생하였는데, 이것은 세포내 유전자가 transfection되지 않은 세포도 neo selection에서 선발된다는 것을 제시하고 있다. 따라서 체세포를 이용한 형질전환동물 생산을 위해서는 세포내 유전자 도입과 선발 과정에서 나타난 colony에 대하여 보다 엄격한 screen을 하는 것이 필요한 것으로 생각된다.

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삼전극으로 구성된 막전극접합체를 이용한 직접메탄올 연료전지의 실시간 과전압 분석 (In-Situ Analysis of Overpotentials in Direct Methanol Fuel Cell by Using Membrane Electrode Assembly Composed of Three Electrodes)

  • 정남기;조윤환;조용훈;성영은
    • 한국재료학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.330-336
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    • 2018
  • In this study, a membrane electrode assembly(MEA) composed of three electrodes(anode, cathode, and reference electrode) is designed to investigate the effects of methanol concentration on the overpotentials of anode and cathode in direct methanol fuel cells(DMFCs). Using the three-electrode cell, in-situ analyses of the overpotentials are carried out during direct methanol fuel cell operation. It is demonstrated that the three-electrode cell can work effectively in transient state operating condition as well as in steady-state condition, and the anode and cathode exhibit different overpotential curves depending on the concentration of methanol used as fuel. Therefore, from the real-time separation of the anode and cathode overpotentials, it is possible to more clearly prove the methanol crossover effect, and it is expected that in-situ analysis using the three-electrode cell will provide an opportunity to obtain more diverse results in the area of fuel cell research.

세포배양 유래 생물의약품 제조공정에서 Reovirus, Bovine Viral Diarrhea Virus, Bovine Parainfluenza Virus 동시 검출을 위한 Multiplex Reverse Transcription-PCR (Multiplex Reverse Transcription-PCR for Simultaneous Detection of Reovirus, Bovine Viral Diarrhea Virus, and Bovine Parainfluenza Virus during the Manufacture of Cell Culture-derived Biopharmaceuticals)

  • 오선환;배정은;김인섭
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제40권4호
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    • pp.339-347
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    • 2012
  • 동물세포배양 유래 생물의약품 생산 공정에서 다양한 외래성 바이러스가 오염된 사례가 있기 때문에 바이러스 안전성 보증을 위한 바이러스 검출시험이 필수적이다. Reovirus (Reo), bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine parainfluenza virus (BPIV)는 동물 세포주와 동물 세포 배양 공정에 오염되는 대표적인 RNA 바이러스이다. 세포배양 유래 생물의약품의 안전성을 확보하기 위해, 세포주, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 Reo, BVDV, BPIV를 동시에 검출할 수 있는 Multiplex Reverse Transcription (RT)-PCR 시험법을 확립하였다. Reo, BVDV, BPIV에 특이적인 primer를 선별하였으며, multiplex RT-PCR 시험법을 최적화하였다. Reo, BVDV, BPIV를 동시에 검출할 수 있는 multiplex RT-PCR 시험법의 민감도는 각각 $7.76{\times}10^2\;TCID_{50}/ml$, $7.44{\times}10^1\;TCID_{50}/ml$, $6.75{\times}10^1\;TCID_{50}/ml$이었다. 확립된 multiplex RT-PCR을 생물의약품 제조공정 검증에 적용할 수 있는지 확인하기 위하여 인위적으로 각 바이러스를 오염시킨 CHO 세포에서 검출 시험을 실시한 결과 각 바이러스를 감염시킨 CHO 세포와 세포배양 상청액에서 각 바이러스를 검출할 수 있었다. 위와 같은 결과에서 확립된 multiplex RT-PCR시험법은 세포주, 원료물질, 제조공정, 완제품에서 Reo, BVDV, BPIV를 동시에 검출할 수 있는 특이성과 민감성이 우수한 시험법임을 확인하였다.