Lee, Hyun Woo;Jung, Won Kyeong;Kim, Yong Ho;Ryu, Bum Han;Kim, T. Doohun;Kim, Jungho;Kim, Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.2
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pp.315-325
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2016
A novel esterase gene, est7K, was isolated from a compost metagenomic library. The gene encoded a protein of 411 amino acids and the molecular mass of the Est7K was estimated to be 44,969 Da with no signal peptide. Est7K showed the highest identity of 57% to EstA3, which is an esterase from a drinking water metagenome, when compared with the enzymes with reported properties. Est7K had three motifs, SMTK, YSV, and WGG, which correspond to the typical motifs of family VIII esterases, SxxK, Yxx, and WGG, respectively. Est7K did not have the GxSxG motif in most lipolytic enzymes. Three additional motifs, LxxxPGxxW, PLGMxDTxF, and GGxG, were found to be conserved in family VIII enzymes. The results of the phylogenetic analysis and the alignment study suggest that family VIII enzymes could be classified into two subfamilies, VIII.1 and VIII.2. The purified Est7K was optimally active at 40ºC and pH 10.0. It was activated to exhibit a 2.1-fold higher activity by the presence of 30% methanol. It preferred short-length p-nitrophenyl esters, particularly p-nitrophenyl butyrate, and efficiently hydrolyzed glyceryl tributyrate. It did not hydrolyze β-lactamase substrates, tertiary alcohol esters, glyceryl trioleate, fish oil, and olive oil. Est7K preferred an S-enantiomer, such as (S)-methyl-3-hydroxy-2-methylpropionate, as the substrate. The tolerance to methanol and the substrate specificity may provide potential advantage in the use of the enzyme in pharmaceutical and other biotechnological processes.
Rhodococcus sp. JDC-11, capable of utilizing di-n-butyl phthalate (DBP) as the sole source of carbon and energy, was isolated from sewage sludge and confirmed mainly based on 16S rRNA gene sequence analysis. The optimum pH, temperature, and agitation rate for DBP degradation by Rhodococcus sp. JDC-11 were 8.0, $30^{\circ}C$, and 175 rpm, respectively. In addition, low concentrations of glucose were found to inhibit the degradation of DBP, whereas high concentrations of glucose increased its degradation. Meanwhile, a substrate utilization test showed that JDC-11 was also able to utilize other phthalates. The major metabolites of DBP degradation were identified as monobutyl phthalate and phthalic acid by gas chromatography-mass spectrometry, allowing speculation on the tentative metabolic pathway of DBP degradation by Rhodococcus sp. JDC-11. Using a set of new degenerate primers, a partial sequence of the 3,4-phthalate dioxygenase gene was obtained from JDC-11. Moreover, a sequence analysis revealed that the phthalate dioxygenase gene of JDC-11 was highly homologous to the large subunit of the phthalate dioxygenase from Rhodococcus coprophilus strain G9.
The gas-phase formation of polychlorinated naphthalenes (PCNs) and dibenzofurans (PCDFs) was experimentally investigated by slow combustion of the three chlorophenols (CPs): 2-chlorophenol (2-CP), 3-chlorophenol (3-CP) and 4-chlorophenol (4-CP), in a laminar flow reactor over the range of 550 to $750^{\circ}C$ under oxidative condition. Contrary to the a priori hypothesis, different distributions of PCN isomers were produced from each CP. To explain the distributions of polychlorinated dibenzofuran (PCDF) and PCN congeners, a pathway is proposed that builds on published mechanisms of PCDF formation from chlorinated phenols and naphthalene formation from dihydrofulvalene. This pathway involves phenoxy radical coupling at unsubstituted ortho-carbon sites followed by CO elimination to produce dichloro-9, 10-dihydrofulvalene intermediates. Naphthalene products are formed by loss of H and/or Cl atoms and rearrangement. The degree of chlorination of naphthalene and dibenzofuran products decreased as temperature increased, and, on average, the naphthalene congeners were less chlorinated than the dibenzofuran congeners. PCDF isomers were found to be weakly dependent to temperature, suggesting that phenoxy radical coupling is a low activation energy process. Different PCN isomers, on the other hand, are formed by alternative fusion routes from the same phenoxy radical coupling intermediate. PCN isomer distributions were found to be more temperature sensitive, with selectivity to particular isomers decreasing with increasing temperature.
Jun, Ye Lee;Bae, Chang-Hwan;Kim, Dongsoo;Koo, Sungtae;Kim, Seungtae
Journal of Ginseng Research
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v.39
no.2
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pp.148-154
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2015
Background: Ginseng is known to have antiapoptotic, anti-inflammatory, and antioxidant effects. The present study investigated a possible role of Korean Red Ginseng (KRG) in suppressing dopaminergic neuronal cell death and the cleavage of p35 to p25 in the substantia nigra (SN) and striatum (ST) using a 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induced Parkinson's disease mouse model. Methods: Ten-week-old male C57BL/6 mice were injected intraperitoneally with 30 mg/kg of MPTP at 24-h intervals for 5 d, and then administered KRG (1 mg/kg, 10 mg/kg, or 100 mg/kg) once a day for 12 consecutive days from the first injection. Pole tests were performed to assess the motor function of the mice, dopaminergic neuronal survival in the SN and ST was evaluated using tyrosine hydroxylase-immunohistochemistry, and the expressions of cyclin-dependent kinase 5 (Cdk5), p35, and p25 in the SN and ST were measured using Western blotting. Results: MPTP administration caused behavioral impairment, dopaminergic neuronal death, increased Cdk5 and p25 expression, and decreased p35 expression in the nigrostriatal system of mice, whereas KRG dose-dependently alleviated these MPTP-induced changes. Conclusion: These results indicate that KRG can inhibit MPTP-induced dopaminergic neuronal death and suppress the cleavage of p35 to p25 in the SN and the ST, suggesting a possible role for KRG in the treatment of Parkinson's disease.
Background: Black ginseng (Ginseng Radix nigra, BG) refers to the ginseng steamed for nine times and fine roots (hairy roots) of that is called fine black ginseng (FBG). It is known that the content of saponin of FBG is higher than that of BG. Therefore, in this study, we examined antitumor effects against MCF-7 breast cancer cells to target the FBG extract and its main component, ginsenoside Rg5 (Rg5). Methods: Action mechanism was determined by MTT assay, cell cycle assay and western blot analysis. Results: The results from MTT assay showed that MCF-7 cell proliferation was inhibited by Rg5 treatment for 24, 48 and 72 h in a dose-dependent manner. Rg5 at different concentrations (0, 25, 50 and $100{\mu}M$), induced cell cycle arrest in G0/G1 phase through regulation of cell cycle-related proteins in MCF-7 cells. As shown in the results from western blot analysis, Rg5 increased expression of p53, $p21^{WAF1/CIP1}$ and $p15^{INK4B}$ and decreased expression of Cyclin D1, Cyclin E2 and CDK4. Expression of apoptosiserelated proteins including Bax, PARP and Cytochrome c was also regulated by Rg5. These results indicate that Rg5 stimulated cell apoptosis and cell cycle arrest at G0/G1 phase via regulation of cell cycle-associated proteins in MCF-7 cells. Conclusion: Rg5 promotes breast cancer cell apoptosis in a multi-path manner with higher potency compared to 20(S)-ginsenoside Rg3 (Rg3) in MCF-7 (HER2/ER+) and MDA-MB-453 (HER2+/ER) human breast cancer cell lines, and this suggests that Rg5 might be an effective natural new material in improving breast cancer.
Kim, Dongsoo;Kwon, Sunoh;Jeon, Hyongjun;Ryu, Sun;Ha, Ki-Tae;Kim, Seungtae
Journal of Ginseng Research
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v.42
no.4
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pp.429-435
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2018
Background: Recent studies have shown that Korean Red Ginseng (KRG) successfully protects against dopaminergic neuronal death in the nigrostriatal pathway of a Parkinson's disease (PD) mouse model induced by 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) administration; however, the mechanism has yet to be identified. Therefore, in this study we used two-dimensional electrophoresis to investigate the effects of KRG on the changes in protein expression in the substantia nigra (SN) of MPTP-treated mice. Methods: Male C57BL/6 mice (9 wk old) were intraperitoneally administered MPTP (20 mg/kg) four times at 2-h intervals, after which KRG (100 mg/kg) was orally administered once a day for 5 d. Two hours after the fifth KRG administration, a pole test was conducted to evaluate motor function, after which the brains were immediately collected. Survival of dopaminergic neurons was measured by immunohistochemistry, and protein expression was measured by two-dimensional electrophoresis and Western blotting. Results: KRG alleviated MPTP-induced behavioral dysfunction and neuronal toxicity in the SN. Additionally, the expression of eight proteins related to neuronal formation and energy metabolism for survival were shown to have changed significantly in response to MPTP treatment or KRG administration. KRG alleviated the downregulated protein expression following MPTP administration, indicating that it may enhance neuronal development and survival in the SN of MPTP-treated mice. Conclusion: These findings indicate that KRG may have therapeutic potential for the treatment of patients with PD.
We give a detailed description of the installation and operation of a double-station meteor detection system which formed part of a research & education project between Korea Astronomy Space Science Institute (KASI) and Daejeon Science Highschool. A similar system is currently not existing in South Korea. A total of six light-sensitive CCD cameras were installed with three cameras at SOAO and three cameras at BOAO observatory. A double-station observation of a meteor event enables the determination of the three-dimensional heliocentric orbit in space. This project was initiated in response to the Jinju fireball event in March 2014. The cameras were installed in October/November 2014. The two stations are identical in hardware as well as software. Each station employes sensitive "Watec-902H2" cameras in combination with relatively fast f/1.2 lenses. Various fields of views were used for measuring differences in detection rates of meteor events. We employed the SonotaCo UFO software suite for meteor detection and their subsequent analysis. The system setup as well as installation/operation experience is described and first results are presented. We also give a brief overview of historic as well as recent meteor (fall) detections in South Korea. For more information please consult http://meteor.kasi.re.kr.
This study was carried out to check changes of components in the slaughter waste by the bacteria isolated from slaughter wastes from Gyungnam Province from May to June 2000, and to find usefu] organism for treatment of the waste. Bacteria used in this study were Aeromonas hydrophila, as the dominant of the waste. Optimum conditions for bacterial culture were obtained as the temperature of 35$^{\circ}C$, pH 6.5, and shaking of 120 rpm in nutrient broth. The mean values of dissolved oxygen was 4.14 mg/1; biochemical oxygen demand, 1731.21 mg/1; ratio of BOD/COD, 0.53-0.64; ratio of T-P/T-N, 1.0-1.41; and viable counts of the waste, 5.47${\times}$10$\^$7/ CFU. Little change in total nitrogen observed by 36 hr of the culture. The largest amount of increasing NH$_4$$\^$+/-N was observed in the sample that 10% of the waste added in nutrient broth with A. hydrophila showing the value of 29.19 mg/l at the beginning to 570.36 mg/1 by 36 hr of culture. However, the highest increasing ratio between initial amount and finals at 36 hr of culture showed as 41.6 times when 3% of the waste added. NO$_3$ -N was decreased showing the value of 71.27 mg/1 to 32.14 mg/1 by 24 hr of culture with the organism when 10% of the waste added in nutrient broth. Total phosphorus was decreased showing the value from 188.74 mg/1 to 101.41 mg/1 after 12 hr of culture with the organism when 5% of the waste added in nutrient broth, while T-P was decreased gradually by 24 hr of culture from 193.8 to 101.4 mg/1 when 10% of the waste added.
Objective: In our previous study, glass-fiber-reinforced plastics (GFRPs) made from polycarbonate and glass fibers were prepared for esthetic orthodontic wires using pultrusion. These laboratory GFRP wires are more transparent than the commercially available nickel-titanium wire; however, an investigation of the color stability of GFRP during orthodontic treatment is needed. Accordingly, in the present study, the color stability of GFRP was assessed using colorimetry. Methods: Preparation of GFRP esthetic round wires (diameter: 0.45 mm [0.018 inch]) using pultrusion was described previously. Here, to investigate how the diameter of fiber reinforcement affects color stability, GFRPs were prepared by incorporating either $13-{\mu}m$ (GFRP-13) or $7-{\mu}m$ glass (GFRP-7) fibers. The color changes of GFRPs after 24 h, and following 1, 2, and 4 weeks of coffee immersion at $37^{\circ}C$, were measured by colorimetry. We evaluated the color stability of GFRPs by two evaluating units: the color difference (${\Delta}E^*$) and National Bureau of Standards (NBS). Results: After immersion, both GFRPs showed almost no visible color change. According to the colorimetry measurements, the ${\Delta}E^*$ values of GFRP-13 and GFRP-7 were 0.73-1.16, and 0.62-1.10, respectively. In accordance with NBS units, both GFRPs showed "slight" color changes. As a result, there were no significant differences in the ${\Delta}E^*$ values or NBS units for GFRP-13 or GFRP-7. Moreover, for both GFRPs, no significant differences were observed in any of the immersion periods. Conclusions: Our findings suggest that the GFRPs will maintain high color stability during orthodontic treatment, and are an attractive prospect as esthetic orthodontic wires.
Eleven novel oxiranyl and thiiranyl phenolic compounds were synthesized as potential antitumor agents using epichlorohydrin and epithiohydrin in the presence of $K_2CO_3$. Cytotoxicities were found in range of I$C_{50}$ values of 2.5-14.8 $\mu$M, which was partially attributed to topoisomerase II inhibition. Bis-thiiranyl anthraquinone analog, 19 showed more cytotoxicity against MDA-MB-231 (breast cancer cell) and PC3 (prostate cancer cell) after 24 and/or 48 h and more potent topoisomerase II inhibitory activity than etoposide.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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