Random genes were screened in two transforming ways to investigate the new genes of a ladybug using the Harmonia axyridis cDNA library stock cell cloned in the LITMUS 28i vector in a previous study. Phenotypic variation was observed after injection of the synthesized double-stranded RNA through the in vitro transcription process. The cDNA library of H. axyridis was transformed into E. coli $DH5{\alpha}$ and 10B competent cells by heat shock. Analysis of the nucleotide sequences of the 42 clones with the insert DNAs revealed that 21 clones were homologous with the genes of insects, and only one clone had a gene from H. axyridis. Thirteen of the 21 insect genes were homologous with genes from coleopteran insects. Fourteen genes were selected, which were identified by the gene screening results, and were synthesized as double-stranded RNA through in vitro transcription. One microgram of the synthesized double-stranded RNA between segments T1 and T2 were injected using a syringe into each anesthetized fourth larvae which were under 2 days old. As a result, a phenotypic variation appeared in the larva injected with the two genes. While the eggs of H. axyridis injected with distilled water hatched out three days after oviposition, the eggs of H. axyridis injected with dsHma 06 did not hatch but become shrivel a week after oviposition. Most of the H. axyridis injected with dsHma 08 died and were unable to complete the pupation or eclosion during ecdysis.
Song-Ee Baek;Asad Ul-Haq;Dae Hee Kim;Hyoung Wook Choi;Myeong-Jin Kim;Hye Jin Choi;Honsoul Kim
Korean Journal of Radiology
/
제21권6호
/
pp.726-735
/
2020
Objective: Recent innovations in biology are boosting gene and cell therapy, but monitoring the response to these treatments is difficult. The purpose of this study was to find an MRI-reporter gene that can be used to monitor gene or cell therapy and that can be delivered without a viral vector, as viral vector delivery methods can result in long-term complications. Materials and Methods: CMV promoter-human organic anion transporting polypeptide 1B3 (CMV-hOATP1B3) cDNA or CMV-blank DNA (control) was transfected into HEK293 cells using Lipofectamine. OATP1B3 expression was confirmed by western blotting and confocal microscopy. In vitro cell phantoms were made using transfected HEK293 cells cultured in various concentrations of gadoxetic acid for 24 hours, and images of the phantoms were made with a 9.4T micro-MRI. In vivo xenograft tumors were made by implanting HEK293 cells transfected with CMV-hOATP1B3 (n = 4) or CMV-blank (n = 4) in 8-week-old male nude mice, and MRI was performed before and after intravenous injection of gadoxetic acid (1.2 µL/g). Results: Western blot and confocal microscopy after immunofluorescence staining revealed that only CMV-hOATP1B3-transfected HEK293 cells produced abundant OATP1B3, which localized at the cell membrane. OATP1B3 expression levels remained high through the 25th subculture cycle, but decreased substantially by the 50th subculture cycle. MRI of cell phantoms showed that only the CMV-hOATP1B3-transfected cells produced a significant contrast enhancement effect. In vivo MRI of xenograft tumors revealed that only CMV-hOATP1B3-transfected HEK293 tumors demonstrated a T1 contrast effect, which lasted for at least 5 hours. Conclusion: The human endogenous OATP1B3 gene can be non-virally delivered into cells to induce transient OATP1B3 expression, leading to gadoxetic acid-mediated enhancement on MRI. These results indicate that hOATP1B3 can serve as an MRI-reporter gene while minimizing the risk of long-term complications.
Park, Jae-Eun;Lee, Ki-Young;Do, Su-Il;Lee, Sang-Soo
BMB Reports
/
제35권3호
/
pp.330-336
/
2002
The lgtB genes that encode $\beta$-1,4-galactosyltransferases from Neisseria meningitidis ATCC 13102 and gonorrhoeae ATCC 31151 were isolated by a polymerase chain reaction using the pfu DNA polymerase. They were expressed under the control of lac and T7 promoters in Escherichia coli M15 and BL21 (DE3). Although the genes were efficiently expressed in E. coli M15 at $37^{\circ}C$ (33 kDa), most of the $\beta$-1,4-galactosyltransferases that were produced were insoluble and proteolysed into enzymatically inactive polypeptides that lacked C-terminal residues (29.5 kDa and 28 kDa) during the purification steps. When the temperature of the cell growth was lowered to $25^{\circ}C$, however, the solubility of the $\beta$-1,4-galactosyltransferases increased substantially. A stable N-terminal his-tagged recombinant enzyme preparation could be achieved with E. coli BL21 (DE3) that expressed lgtB. Therefore, the cloned $\beta$-1,4-galactosyltransferases were expressed under the control of the T7 promoter in E. coli BL21 (DE3), mostly to the soluble form at $25^{\circ}C$. The proteins were easily purified to homogeneity by column chromatography using Ni-NTA resin, and were found to be active. The galactosyltransferases exhibited pH optimum at 6.5-7.0, and had an essential requirement for the $Mn^{+2}$ ions for its action. The $Mg^{+2}$ and $Ca{+2}$ ions showed about half of the galactosyltransferase activities with the $Mn^{+2}$ ion. In the presence of the $Fe^{+2}$ ion, partial activation was observed with the $\beta$-1,4-galactosyltransferase from N. meningitidis(64% of the enzyme activity with the $Mn^{+2}$$Ni^{+2}$, $Zn^{+2}$, and $Cu^{+2}$ ions could not activate the $\beta$-1,4-galactosyltransferase activity. The inhibited enzyme activity with the $Ni^{+2}$ ion was partially recovered with the $Mn^{+2}$$Fe^{+2}$, $Zn^{+2}$, and $Cu^{+2}$ ions, the $Mn^{+2}$$\beta$-1,4-galactosyltransferase activity was 1.5-fold stimulated with the non-ionic detergent Triton X-100 (0.1-5%).
본 연구는 허브 부식토를 이용하여 첨가 수준별 in vitro 반추위 발효특성 평가와 젖소를 이용하여 급여시 유생산성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 시험 1에서는 티머시 건초를 기질로 하여 허브부식토(herbaceous peat)를 0,1 및 5%를 3반복으로 각각 첨가하여 in vitro 반추위내 pH, 가스발생량, VFA (volatile fatty acid), ammonia-N 및 건물분해율을 조사하여 반추위내 발효성상의 변화를 평가하였다. pH 변화는 0, 3, 12 및 24시간 배양에 있어서 모든 처리구에서 유의한 차이를 보이지 않았지만 6시간. 대조구에서 1 및 5% 첨가구와 비교하여 유의하게 낮은 pH를 나타냈다(p<0.05).가스 발생량은 배양 12시간까지 처리구에서 대조구와 비교하여 유의하게 증가 하였으며(p<0.05), 반추위액내 암모니아 농도는 모든 처리구에서 24시간까지 증가하는 경향을 나타냈으며, 처리간 유의한 차이는 없었다. 건물분해율은 모든 시간에서 5%구가 대조구 및 1%구와 비교하여 건물분해율이 높았다(p< 0.05) 따라서 허브부식토를 0, 1 및 5% 수준으로 각각 첨가하여 반추위내 in vitro 배양시간 별 반추위 발효특성은 대부분 조사항목에서 처리구가 대조구에 비해 개선효과를 나타냈으며, 시험 2에서는 젖소를 이용하여 사양시험을 통해 유생산성을 평가하였으며, 우유생산량 변화와 유성분 및 체세포 수 변화를 조사하기 위해 홀스타인 착유우 16두를 공시하여 4주간 사양 시험을 실시하였다. 산유량은 T3구가 25.0 kg으로 대조구(23.2 kg), 부식토 처리구(23.1 kg), 비타민 C 처리구(23.4 kg)와 비슷하여 수치적으로 증가하였다. 대조구와 처리구별 시험 시작 전 유성분(유지방, 유단백, 유당, MUN 및 SNF) 및 체세포 수의 변화는 일부 유의성이 인정되었다(p<0.05). 4주간의 시험 기간 중 전반기(1~2주)와 후반기(3~4주)의 유성분 변화를 보면 부식토 첨가구에 있어서 유단백질과 SNF가 유의적으로 증가하는 경향을 나타내었다. 대조구와 처리구의 시험 시작 전 의 혈액내 영양성분 (총단백질, 콜레스테롤, NEFA, BUN), 간기능 성분(AST, GGT) 및 무기물(Ca, P, Mg)에서 뚜렷한 변화를 나타내지 않았다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 착유우에 부식토를 급여하는 것이 유성분, 체세포 수 및 생리적으로 긍정적인 영향을 줄 것으로 판단된다.
Background: Transcription factor FOXP3 characterizes the thymically derived regulatory T cells. FOXP3 is expressed by cancer cell itself and FOXP3 expression was induced by TGF-${\beta}$ treatment in pancreatic cancer cell line. However, the expression of FOXP3 expression is not well known in patients with lung cancer. This study was conducted to investigate the expression of FOXP3 in patients with lung cancer and to investigate the regulation of FOXP3 expression by the treatment of TGF-${\beta}$ and DNA methyltransferase inhibitor in lung cancer cell lines. Methods: FOXP3 expression in the tissue of patients with resected non-small cell lung cancer (NSCLC) was evaluated by immunohistochemistry. The regulation of FOXP3 expression was investigated by Western blot and RT-PCR after lung cancer cell lines were stimulated with TGF-${\beta}1$ and TGF-${\beta}2$. The regulation of FOXP3 expression was also investigated by RT-PCR and flow cytometry after lung cancer cell lines were treated with DNA methyltransferase inhibitor (5-AZA-dC). Results: FOXP3 expression was confirmed in 27% of patients with NSCLC. In NCI-H460 cell line, TGF-${\beta}2$ decreased FOXP3 mRNA and protein expressions. In A549 cell line, both TGF-${\beta}1$ and TGF-${\beta}2$ decreased FOXP3 mRNA and protein expressions. 5-AZA-dC increased FOXP3 mRNA expression in NCI-H460 and A549 cell lines. Moreover, 5-AZA-dC increased intracellular FOXP3 protein expression in A549 cell lines. Conclusion: It was shown that FOXP3 is expressed by cancer cell itself in patients with NSCLC. Treatment of TGF-${\beta}2$ and DNA methyltransferase inhibitor seems to be associated with the regulation of FOXP3 expression in lung cancer cell lines.
In fascioliasis, T-helper 2 (Th2) responses predominate, while little is known regarding early immune phenomenon. We herein analyzed early immunophenotype changes of BALB/c, C57BL/6, and C3H/He mice experimentally infected with 5 Fasciola hepatica metacercariae. A remarkable expansion of $CD19^+$ B cells was observed as early as week 1 post-infection while $CD4^+/CD8^+$ T cells were down-regulated. Accumulation of $Mac1^+$ cells with time after infection correlated well with splenomegaly of all mice strains tested. The expression of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ mRNA in splenocytes significantly decreased while that of IL-4 up-regulated. IL-$1{\beta}$ expression was down-modulated in BALB/c and C57BL/6 mice, but not in C3H/He. Serum levels of transforming growth factor (TGF)-${\beta}$ were considerably elevated in all mice during 3 weeks of infection period. These collective results suggest that experimental murine fascioliasis might derive immune suppression with elevated levels of TGF-${\beta}$ and IL-4 during the early stages of infection.
Despite the presence of toll like receptor (TLR) expression in conventional $TCR{\alpha}{\beta}$ T cells, the direct role of TLR signaling via myeloid differentiation factor 88 (MyD88) within T lymphocytes on graft-versus-host disease (GVHD) and graft-versus-leukemia (GVL) effect after allogeneic stem cell transplantation (allo-SCT) remains unknown. In the allo-SCT model of C57BL/6 ($H-2^b$) ${\rightarrow}$ B6D2F1 ($H-2^{b/d}$), recipients received transplants of wild type (WT) T-cell-depleted (TCD) bone marrow (BM) and splenic T cells from either WT or MyD88 deficient (MyD88KO) donors. Host-type ($H-2^d$) P815 mastocytoma or L1210 leukemia cells were injected either subcutaneously or intravenously to generate a GVHD/GVL model. Allogeneic recipients of MyD88KO T cells demonstrated a greater tumor growth without attenuation of GVHD severity. Moreover, GVHD-induced GVL effect, caused by increasing the conditioning intensity was also not observed in the recipients of MyD88KO T cells. In vitro, the absence of MyD88 in T cells resulted in defective cytolytic activity to tumor targets with reduced ability to produce IFN-${\gamma}$ or granzyme B, which are known to critical for the GVL effect. However, donor T cell expansion with effector and memory T-cell differentiation were more enhanced in GVHD hosts of MyD88KO T cells. Recipients of MyD88KO T cells experienced greater expansion of Foxp3- and IL4-expressing T cells with reduced INF-${\gamma}$ producing T cells in the spleen and tumor-draining lymph nodes early after transplantation. Taken together, these results highlight a differential role for MyD88 deficiency on donor T-cells, with decreased GVL effect without attenuation of the GVHD severity after experimental allo-SCT.
Lactobacillus salivarius subsp. salivarius Nam27 with a high ${\beta}$-galactosidase activity was selected for enzymatic characterization. For purification, cell pellet was disrupted by Bead Beater, by DEAE-Sepharose and Mono-Q chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 5,312 units/mg. The molecular weight of native monomeric ${\beta}$-galactosidase was estimated to be 30,000 dalton (monomer) by the SDS-PAGE. The optimum temperature and optimum pH were $50^{\circ}C$ and 5.0, respectively. This enzyme was stable between 35 and $55^{\circ}C$. ${\beta}$-galactosidase activity was lost rapidly above pH 7.0. But ${\beta}$-galactosidase was more stable at pH 4.0 (acidic conditions). And ${\beta}$-galactosidase activity was lost rapidly above $65^{\circ}C$ after 10 min incubation. $Ca^{2+}$ and $Zn^{2+}$ metal ions enhanced ${\beta}$-galactosidase activity by 164.09% and 127.37% while $Cu^{2+}$, $Fe^{3+}$ and $Mn^{2+}$ lowered ${\beta}$-galactosidase activity by 58.29%,85.10% and 77.66% respectively. Other metal ions didn't affect ${\beta}$-galactosidase activity significantly.
본 연구에서는 봄철 저수온기 팔당호 수역의 식물플랑크톤을 이용하여 수온과 $CO_2$ 증가가 식물플랑크톤 군집에 미치는 영향을 분석하였다. 2012년 3월 팔당호 경안천하류 광동교 부근의 현장수를 이용하여 수온증가와 $CO_2$ 농도증가를 네 가지 실험군, (1) Control; 저온(현장수온)과 저농도(공기중) $CO_2$ ($6{\pm}2^{\circ}C$, 400 ppm), (2) T1; 저온과 고농도 $CO_2$ ($6{\pm}2^{\circ}C$, 800 ppm), (3) T2; 고온과 저농도 $CO_2$ ($20{\pm}2^{\circ}C$, 400 ppm), (4) T3; 고온과 고농도 $CO_2$ ($20{\pm}2^{\circ}C$, 800 ppm)으로 하여 각각 실험하였다. 가장 높은 조류성장을 보인 실험군은 T1으로 현장 온도조건에 적응한 조류 군집에 $CO_2$를 첨가한 결과이다. 현장수의 주요 우점종은 Cyclotella meneghiniana로 나타났고, 시간이 진행됨에 따라 고온 실험군(T2, T3)에서는 중심돌말류 Cyclotella meneghiniana에서 깃돌말류 Fragilaria capucina var. gracilis로 우점종의 천이가 나타났다. 모든 실험군에서 규조류가 우점하였고, 고온 실험군 T2, T3에서 배양 후반기에 남조류가 출현하였다. 결론적으로, 저수온기 수온증가는 팔당호 식물플랑크톤 군집구조 변화에 영향을 주었으며, $CO_2$ 농도 증가는 식물플랑크톤의 성장을 촉진시켰다. 본 연구의 결과는 기후변화에 따라 담수생태계의 식물플랑크톤의 성장과 군집변화의 잠재성을 보여주었으며, 앞으로 보다 심도 있는 연구의 필요성을 제기하였다.
Objectives This experimental study was designed to investigate the effects of Mulberry leaves contained herbal mixture (MLHM) on body weight, serum lipid level and adipocyte differentiation in high fat diet-fed obese mice. Methods Four-week old mice (wild-type C57/BL6) were used for all experiments. Cells were incubated with MLHM at the indicated concentration (0.04-4mg/ml) for 24h, and growth rate was assessed by MTT ((3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay. 3T3-L1 preadipocytes were incubated in DMEM for 2 days with the indicated concentrations of MLHM, and on Day 6, the cells were fixed and the cellular lipid contents were assessed by Oil-Red-O staining. The expression of peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ (PPAR ${\gamma}$) and cytidine-cytidine-adenosine-adenosine-thymine (CCAAT)/enhancer-binding proteins ${\alpha}$ (C/EBP ${\alpha}$) as adipocyte-specific proteins were determined by real time RT-PCR and western blotting. In addition, body weight gain and serum lipid levels were measured in the mice with obesity induced by the high fat-diet for four weeks. Results Though MLHM did not show toxicity even at the concentration of 4mg/ml, MLHM significantly inhibited the differentiation of 3T3-L1 preadipocites in a dose-dependent manner. Also, MLHM significantly reduced the expressions of PPAR ${\gamma}$ and C/EBP ${\alpha}$ in a dose-dependent manner. Furthermore, MLHM significantly reduced body weight gain and LDL-cholesterol contents in high fat diet-fed obese mice. Conclusions These results demonstrate that MLHM exerts anti-obesity effect in 3T3-L1 cells and mice with obesity by high-fat diet.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.