HPLC/MS를 이용하여 국내 자생 엉겅퀴(Cirsium japonicum)의 페놀성 화합물을 분석한 결과 제주지역 엉겅퀴가 가장 많은 페놀성 화합물을 함유하고 있었으며, chlorogenic acid가 73.15 mg/g dry weight, linarin이 76.67 mg/g dry weight 그리고 pectolinarin이 12.98 mg/g dry weight으로 확인되었다. 엉겅퀴의 기능성 식품으로서의 가치를 확인하기 위하여 산화방지 활성 및 신경세포 보호효과를 평가한 결과 DPPH, ABTS 및 FRAP assay에서 엉겅퀴의 강력한 산화방지 활성이 나타났다. 엉겅퀴 추출물이 DPPH 및 ABTS 라디칼의 50%를 저해하는 농도는 각각 $567{\mu}g/mL$와 $130{\mu}g/mL$으로 나타났다. DPPH, ABTS, FRAP법을 통한 총산화방지능은 각각 11.32, 100.15, $12.76{\mu}g/mL$ trolox equivalents 나타났다. 과산화수소로 산화적 손상을 유도한 PC12 세포에 대하여 MTT와 LDH assay를 이용하여 세포생존률을 측정한 결과 농도 의존적으로 세포 보호 활성이 나타났으며, 마찬가지로 활성산소종 생성률을 측정한 결과 농도 의존적으로 활성산소종 생성이 감소되어 세포 보호활성이 확인되었다. 본 연구를 통하여 엉겅퀴의 우수한 산화방지 활성 및 신경세포 보호효과가 검증되었다. 따라서 엉겅퀴는 안전한 식품 재료로서 꾸준히 섭취하였을 때 천연 산화방지제로 작용하여 신경퇴행을 예방함으로써 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴병 등의 질병 위험을 줄일 수 있을 것으로 판단된다.
Myelophycus caespitosus, a brown alga belonging to genus Myelophycus, has been traditionally used as a food and medicinal resource in Northeastern Asia. However, few studies have been conducted on its pharmacological activity. In this study, we evaluated whether methanol extract of M. caespitosus (MEMC) could protect against oxidative damage caused by hydrogen peroxide (H2O2) in C2C12 murine myoblasts. Our results revealed that MEMC could suppress H2O2-induced growth inhibition and DNA damage while blocking the production of reactive oxygen species. In H2O2-treated cells, cell cycle progression was halted at the G2/M phase, accompanied by changes in expression of key cell cycle regulators. However, these effects were attenuated by MEMC. In addition, we found that MEMC protected cells from induction of apoptosis associated with mitochondrial impairment caused by H2O2 treatment. Furthermore, MEMC enhanced the phosphorylation of nuclear factor-erythroid-2 related factor 2 (Nrf2) and expression and activity of heme oxygenase-1 (HO-1) in H2O2-treaetd C2C12 myoblasts. However, such anti-apoptotic and cytoprotective effects of MEMC were greatly abolished by HO-1 inhibitor, suggesting that MEMC could increase Nrf2-mediated activity of HO-1 to protect C2C12 myoblasts from oxidative stress.
Purpose: Gene therapy (ex vivo) has recently been used as a means of delivering bone morphogenetic proteins (BMPs) to sites of tissue regeneration. In the present study, we investigated the effect of co-transduction of adenoviruses expressing BMP-2 and BMP-7 on osteogenesisof C2C12 cells in vitro. Methods: A replication-defective human adenovirus 5 (Ad5) containing a cDNA for BMPs in the E1 region of the virus (Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7) was constructed by in vivo homologous recombination. Functional activity of Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 were evaluated in mouse stromal cells (W20-17cells). C2C12 cells are transduced with various MOI (multiplicity of infection) of Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 to assess most effective and stable titer. Based on this result, C2C12 cells were transduced with Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 alone or by combination. BMPs expression, alkaline phosphatase (ALPase) activity, cell proliferation, and mineralization were assessed. Results: Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 are successfully transduced to W20-17 cells, and secreted BMPs stimulated cell differentiation. Also, C2C12 cells transduced with Ad5BMPs showed expression of BMPs and increased ALPaseactivity. In all groups, cell proliferation was observed over times. At 7days, cells co-transduced with Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 showed lower proliferation than the others. C2C12 cells co-transduced with Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 had greater ALPaseactivity than that would be predicted if effect of individual Ad5BMPs were additive. Little mineralized nodule formation was detected in cells transduced with individual Ad5BMPs. In contrast, Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7 combination stimulated mineralization after culturing for 10 days in mineralizing medium. Conclusions: Present study demonstrated that adenoviruses expressing BMPs gene successfully produced BMPs protein and these BMPs stimulated cells to be differentiated into osteoblastic cells. In addition, the osteogenic activity of Ad5BMPs can be synergistically increased by co-transduction of cells with Ad5BMP-2 and Ad5BMP-7.
Yang Hye-Young;Lee Hong-Sub;Ko Jong-Hee;Yeon Seung-Woo;Kim Tae-Yong;Hwang Bang-Yeon;Kang Sang-Sun;Chun Jae-Sun;Hong Soon-Kwang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권9호
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pp.1384-1391
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2006
The signal transduction system is one of the most important devices involved in maintaining life, and many protein kinases are included in the cellular signal transduction system. Finding a protein kinase inhibitor is very valuable, as it can be used to study cell biology and applied to pharmaceuticals. For the efficient and rapid screening of protein kinase inhibitors, two assay systems were combined; the nonradioactive protein kinase assay system that uses an FITC-labeled IRS-2 peptide and the cell-based paper disc assay system that uses Streptomyces griseus as the indicator strain. Among 330 kinds of herb extracts tested, the extract of Dalbergia odorifera exhibited the strongest inhibitory activity in the two assay systems and was selected for further isolation. Based on solvent extraction and many steps of chromatography, seven compounds were finally separated to homogeneity and their structures determined by $^{1}H$ and $^{13}C$ NMR spectroscopies. Four were to be flavonoids and identified as butin ($C_{15}H_{12}O_5$, Mw=272.07), 3'-hydroxymelanetin ($C_{16}H_{12}O_6$, Mw=300.06), liquiritigenin ($C_{15}H_{12}O_4$, Mw=256.07), and 2'-hydroxyformononetin ($C_{16}H_{12}O_{5}$, Mw=284.07). 3'-Hydroxymelanetin inhibited the phosphorylation of the GSK3 protein by Akt to 37% at a concentration of $10{\mu}g/ml$ and showed the strongest cytotoxicity ($ED_{50}<50{\mu}g/ml$) against the human cancer cell line HCT116. Under the same conditions, liquiritigenin also inhibited the phosphorylation of GSK3 by Akt to 26%, and its cytotoxicity against the HCT116 cell line was lower than $100{\mu}g/ml$.
Menadione induced cell death in cultured C2 myoblasts. By screening synthetic peptide libraries composed of random sequence of hexapeptides, we identified the hexa-peptides pool of(Ala/Ile)-(Ile/Met)-Val-Ile-Asp-(Met/Ser)-$NH_2$ that protected the myoblasts against menadioneinduced cell death. Pre-incubation with the hexapeptide pool reduced the number of cells detached from culture dish substrate and increased the ratio of relative viability against menadione. In addition, the peptides strongly increased the expression of Bcl-2, an anti-apoptotic protein. These results suggest that the hexapeptides might enhance the resistance to cell death against menadione by increasing the expression of Bcl-2.
The different weight ratios of Pd to Pt, i.e., 16:4, 10:10, 4:16 in Pd-Pt/C and Pd (20 wt. %) /C electrocatalysts with low metal loading were synthesized for glycerol electrooxidation in an air breathing microfluidic fuel cell (MFC). The cell performance on Pd-Pt (16:4)/C anode electrocatalyst was found best among all the electrocatalysts tested. The single cell when tested at a temperature of 35℃ using Pd-Pt (16:4)/C, showed maximum open circuit voltage (OCV) of 0.70 V and maximum power density of 2.77 mW/㎠ at a current density of 7.71 mA/㎠. The power density increased 1.45 times when cell temperature was raised from 35℃ to 75℃. The maximum OCV of 0.78 V and the maximum power density of 4.03 mW/㎠ at a current density of 10.47 mA/㎠ were observed at the temperature of 75℃. The results of CV substantiate the single cell performance for various operating parameters.
It has been reported that vitamin C plays an effective role in the treatment and prevention of cancer, but its specific mechanisms are still largely unknown. The incidence of colon cancer is now increasing in Korea. Therefore, we have examined here the effect of vitamin C on the induction of the apoptosis on colon cancer and its related mechanisms. We have found that remarkable increase of the apoptosis and the calcium influx in endoplasmic reticulum (ER) in human colon cancer cell line, HCT-8. However, vitamin C-induced apoptosis was effectively inhibited by the pre-treatment of BAPTA-AM (1,2-bis(o-aminophenoxy) ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid), which is well-known as a calcium specific chelator. During the apoptosis, we found the increase of the translocation of Bad to mitochondria from cytosol, after releasing from 14-3-$3{\beta}$. In this process, the expression of Bax, a well-known pro-apoptotic protein, was also increased. Taken together, vitamin C induces apoptosis of colon cancer cell line, HCT-8 through the increase of 1) the calcium influx in endoplasmic reticulum (ER), 2) the translocation of Bad to mitochondria, and 3) the expression of Bax.
Kim, Jy-Yeon;Han, Sang-Beom;Oh, Sang-Eun;Park, Kyung-Won
전기화학회지
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제14권2호
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pp.71-76
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2011
Fe-tetramethoxyphenylporphyrin on carbon black (Fe-TMPP/C) is examined and compared with carbon (C) and Pt-coated carbon (Pt/C) for oxygen reduction reaction in a two chambered microbial fuel cell (MFC). The Fe-TMPP/C is prepared by heat treatment and characterized using SEM, TEM, and XPS. The electrochemical properties of catalysts are characterized by voltammerty and single cell measurements. It is found that the power generation in the MFC with Fe-TMPP/C as the cathode is higher than that with Pt/C. The maximum power of the Fe-TMPP/C is 0.12 mW compared with 0.10 mW (Pt/C) and 0.02 mW (C). This high output with the Fe-TMPP/C indicates that MFCs are promising in further practical applications with low cost macrocycles catalysts.
Kim, Hyung Woo;Cho, Su In;Bae, Seyeon;Kim, Hyemin;Kim, Yejin;Hwang, Young-Il;Kang, Jae Seung;Lee, Wang Jae
IMMUNE NETWORK
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제12권6호
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pp.277-283
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2012
Vitamin C is an essential water-soluble nutrient which primarily exerts its effect on host defense mechanisms and immune homeostasis, but the mechanism related to immune-potentiation is poorly understood. Since dendritic cells (DCs) are known as a potent antigen presenting cell (APC) that could enhance the antigen specific immune responses, we investigate the effects of vitamin C on activation of DCs and its related mechanism by using dendritic cell lines, DC-1. First, we found that there was no damage on DC-1 by 2.5 mM of vitamin C. In the presence of vitamin C, the expression of CD80, CD86, and MHC molecules was increased, but it was decreased by the pre-treatment of SB203580, p38 MAPK-specific inhibitor. We confirmed the phosphorylation of p38 MAPK was increased by the treatment of vitamin C. Taken together, these results suggest that vitamin C could enhance the activity of dendritic cells via the up-regulation of the expression of CD80, CD86, and MHC molecules and the activation of p38 MAPK is related to this process.
Jae-Hyung Lee;Jae-Min Yuk;Guang-Ho Cha;Young-Ha Lee
Parasites, Hosts and Diseases
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제61권2호
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pp.138-146
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2023
Toxoplasma gondii is an intracellular protozoan parasite which can infect most warm-blooded animals and humans. Among the different mouse models, C57BL/6 mice are more susceptible to T. gondii infection compared to BALB/c mice, and this increased susceptibility has been attributed to various factors, including T-cell responses. Dendritic cells (DCs) are the most prominent type of antigen-presenting cells and regulate the host immune response, including the response of T-cells. However, differences in the DC responses of these mouse strains to T. gondii infection have yet to be characterized. In this study, we cultured bone marrow-derived DCs (BMDCs) from BALB/c and C57BL/6 mice. These cells were infected with T. gondii. The activation of the BMDCs was assessed based on the expression of cell surface markers and cytokines. In the BMDCs of both mouse strains, we detected significant increases in the expression of cell surface T-cell co-stimulatory molecules (major histocompatibility complex (MHC) II, CD40, CD80, and CD86) and cytokines (tumor necrosis factor (TNF)-α, interferon (IFN)-γ, interleukin (IL)-12p40, IL-1β, and IL-10) from 3 h post-T. gondii infection. The expression of MHC II, CD40, CD80, CD86, IFN-γ, IL-12p40, and IL-1β was significantly higher in the T. gondii-infected BMDCs obtained from the C57BL/6 mice than in those from the BALB/c mice. These findings indicate that differences in the activation status of the BMDCs in the BALB/c and C57BL/6 mice may account for their differential susceptibility to T. gondii.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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