It is already well known that castration improves marbling quality but exact timing of castration is still highly debated in beef cattle production industry. After castration, blood hormonal changes occur in steer and objective of this study was to investigate the effects of growth hormone (GH) levels on adipocyte differentiation in stromal vascular cells (SVCs) and transdifferentiation into adipocytes in C2C12 myoblasts. Total GH concentrations were measured via enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 24 male calves and 4 female calves. Cell proliferation, cellular triglyceride (TG) accumulation, and the cell's lipolytic capability were measured in C2C12 myoblasts and SVCs. Myogenic, adipogenic, and brown adipocyte-specific gene expression was measured via real-time polymerase chain reaction (PCR) using SYBR green. Serum GH levels were the highest in late-castrated calves. Treatment with 5 ng/mL GH resulted in greater TG accumulation as well as increased CCAAT-enhancer-binding protein (C/EBP)α and peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)γ expression compared to that after treatment with 15 ng/mL GH. Treatment with 5 ng/mL GH also resulted in lower myogenin (myo)G and myoD expression compared to that after treatment with 15 ng/mL GH. The expression of bone morphogenetic protein (BMP) 7 after treatment with 5 ng/mL GH was higher than that after treatment with 15 ng/mL GH. But carcass characteristics data showed no significant difference between early and late castrated steers. Therefore, our results indicate that castration timing does not seem to be inevitable determinate of carcass qualities, particularly carcass weight and marbling score in Hanwoo beef cattle.
In spite of the many attractive properties of (W,Ti)C, its low fracture toughness limits its wide application. To improve the fracture toughness generally a second phase is added to fabricate a nanostructured composite. In this regard, graphene was considered as the reinforcing agent of (W,Ti)C. (W,Ti)C-graphene composites that were sintered within 2 min using pulsed current activated heating under a pressure of 80 MPa. The rapid consolidation method allowed retention of the nano-scale microstructure by blocking the grain growth. The effect of graphene on the hardness and microstructure of the (W,Ti)C-graphene composite was studied using a Vickers hardness tester and FE-SEM. The grain size of (W,Ti)C was reduced remarkably by the addition of graphene. Furthermore, the hardness decreased and the fracture toughness improved with the addition of graphene.
An efficient synthetic route of novel 2′(${\alpha}$)-C-fluoro-2′(${\beta}$)-C-methyl carbocyclic nucleoside analogues is described. The key fluorinated intermediate 7 was prepared from the epoxide intermediate 5 via selective ring-opening of epoxide. Coupling of 7 with nucleosidic bases under the Mitsunobu reactions followed by deprotection afforded the target carbocyclic nucleoside analogues. The synthesized compounds were evaluated as inhibitors of the hepatitis C virus (HCV) in Huh-7 cell line in vitro.
조골 세포의 분화에 중요한 역할을 하는 전사 인자인 Runx2는 그 역할은 많이 알려져 있지만, 이를 조절하는 신호 전달체계에 대해서는 많이 알려지지 않았다. 이에 본 연구에서는 조골 세포의 분화 및 증식에 영향을 미친다고 알려진 PKC 및 MAPK pathway가 Runx2에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. PKC활성화에 따른 Runx2의 전사 활성 및 발현 양상을 관찰하기 위해 6XOSE2-C2C12 cell에 PKC 활성제를 처리하여 luciferase assay와 Northern blot analysis를 시행하였다. MAPK 활성화에 따른 Runx2의 전사 활성을 관찰하기 위해 MAPK 활성제를 6XOSE2-C2C12 cell에 처리하여 luciferase assay를 시행하였다. 두 신호 전달 체계의 활성화에 따른 골 표지 유전자의 전사 양상을 관찰하기 위해 osteocalcin과 osteopontin을 transient transfection한 C2C12 cell에 각 신호 전달 체계의 활성제를 처리하여 luciferase assay를 시행하였다. 또한 각 신호 전달 체계가 상호 작용하는지 알아보기 위하여 MAPK 억제제를 전처리하여 MAPK pathway를 차단한 1 시간 뒤 PKC 활성제를 처리하고 luciferase assay를 시행하여 Runx2의 전사 활성을 관찰하였다. 이상의 실험으로 다음과 같은 결론을 얻었다. - PKC pathway의 활성화는 Runx2의 전사 활성 및 발현을 증가시키고 이로 인해 그의 영향을 받는 골 표지 유전자 (osteopontin, osteocalcin)의 전사도 증가한다. - MAPK pathway의 활성화는 Runx2 및 골 표지 유전자 (osteopontin, osteocalcin)의 전사활성을 증가시킨다. - PKC pathway는 MAPK pathway를 경유하여 Runx2의 전사 활성을 조절한다.
CS-2l lymphoma cells that preferentially metastasize to lymph nodes after s.c. inoculation into BALB/c mice were grown in vitro in the presence of CA- 12 stromal cells isolated from lymph nodes. In order to obtain fundamental data on the identification and characterization of the soluble factors produced by CA-12 stromal cells, the conditioned medium of CA-12 stromal cells that inhibited apoptosis of CS-21 cells was examined. Various analytical treatments revealed that the soluble factors in CA-12 conditioned medium are very sensitive to heat treatment and trypsinization. Moreover CA-12 conditioned medium has an affinity with heparin but not with Con-A. In addition to these, the activity of CA-12 conditioned medium was blocked by H-7, a PKC inhibitor, but the conditioned medium could not induce the differentiation of thymocytes. We concluded that CA-12 conditioned medium contains stromal cell-derived apoptosis-inhibitory molecules that play an important role in proliferation of CS-2l cells by suppressing cell apoptosis.
Jafari, Naser;Zargar, Seyed Jalal;Yassa, Narguess;Delnavazi, Mohammad Reza
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제17권12호
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pp.5189-5193
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2016
Objective: Dorema glabrum Fisch. & C.A. Mey is a perennial plant that has several curative properties. Anti-proliferative activity of seeds of this plant has been demonstrated in a mouse fibrosarcoma cell line. The aim of the present study was to evaluate cytotoxicity of D. glabrum root extracts in a human gastric adenocarcinoma (AGS) cell line and explore mechanisms of apoptosis induction, cell cycle arrest and altered gene expression in cancer cells. Materials and Methods: The MTT assay was used to evaluate IC50 values, EB/AO staining to analyze the mode of cell death, and flow cytometry to assess the cell cycle. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) amplification was performed with apoptosis and cell cycle-related gene primers, for cyclin D1, c-myc, survivin, VEGF, Bcl-2, Bax, and caspase-3 to determine alteration of gene expression. Results: Our results showed that n-hexane and chloroform extracts had greatest toxic effects on gastric cancer cells with IC50 values of $6.4{\mu}g/ml$ and $4.6{\mu}g/ml$, respectively, after 72 h. Cell cycle analysis revealed that the population of treated cells in the G1 phase was increased in comparison to controls. Cellular morphological changes indicated induction of apoptosis. In addition, mRNA expression levels of Bax and caspase-3 were increased, and of bcl-2 survivin, VEGF, c-myc and cyclin D1 were decreased. Conclusion: Our study results suggest that D. glabrum has cytotoxic effects on AGS cells, characterized by enhanced apoptosis, reduced cell viability and arrest of cell cycling.
1. 수온과 염분에 따른 부유유생의 성장과 생존율. 유생의 수온별 사육실험 결과, 3$0^{\circ}C$에서는 실험시작 6일 후 모두 폐사하였으며, 18$^{\circ}C$에서는 높은 생존율에 비하여 늦은 성장을 보였다. 24$^{\circ}C$와 27$^{\circ}C$에서 빠른 성장을 보였으나, 27$^{\circ}C$에서는 성장에 비하여 낮은 생존율을 보였다. 염분에 따른 유생의 사육시험 결과 0$\textperthousand$에서는 실험시작 10일 후 모두 폐사 하였으며, 성장은 6~9$\textperthousand$, 생존율은 3$\textperthousand$에서 가장 높게 나타났다. 2. 수용밀도에 따른 부유유생의 성장과 생존율. 유생의 수용밀도에 따른 사육실험 결과, 1$m\ell$당 1~5 개체의 저밀도에서는 성장과 생존율이 양호하였으며, 50개체/$m\ell$의 고밀도에서는 성장과 생존율이 낮았으며, 실험시작 12일째에 모두 폐사하였다. 3. 먹이생물 종류 및 공급량에 따른 부유유생의 성장과 생존율. 식물 먹이생물에 따른 유생사육 실험 결과, 혼합 공급구가 가장 빠른 성장을 보였으며, 단일 공급구에서는 I. galbana, P. lutheri, C. calcitrans 순으로 비슷한 성장을 보였으며, Chlorella sp.는 가장 늦은 성장을 보였다. 생존율 또한 혼합구가 가장 높고 I. galbana, P. lutheri, 가 비슷한 반면, Chlorella sp. 실험구가 가장 낮았다. 공급량에 따른 사육 실험에서는 먹이 공급량이 많을수록 유생의 성장은 양호하였으나, 8일 이후 50,000 cell/$m\ell$ 밀도에서 전량 폐사하였다. 실험 종료시인 12일째에는 20,000 cell/$m\ell$ 밀도에서 가장 빠른 성장과, 10,000 cell/$m\ell$ 밀도에서 높은 생존율을 보였으며, 5,000 cell/$m\ell$ 밀도에서는 성장과 생존율이 낮았다. 따라서 유생사육을 위한 기수재첩의 먹이생물의 밀도는 10,000~20,000 cell/$m\ell$가 효과적이었다.
Protein tyrosine kinase(PTK), protein kinase C(PKC), oxidase, as a mediator, take a significant role in signal transduction pathway of angiogenesis. The authors utilized the inhibitors, targeting the formation of three co-enzyme in signal transduction pathway in order to quantify the suppression of abnormal vascular endothelial cell proliferation induced by DMH, to compare the level suppression in each up-regulated growth factors, CTGF, CYR61, $ITG{\beta}1$, FHL2, and to identify the relationship between abnormal cell proliferation and signal transduction pathway. Five groups were established; Control group, Group of DMH, Group of DMH-mixed Herbimycin, inhibitor of protein tyrosine kinase, Group of DMH-mixed Calphostin C, inhibitor of protein kinase C, Group Of Dmh-Mixed 10U Catalase, Inhibitor Of oxidase. The rise of vascular endothelial cell was compared by MTT assay, and four growth factors were analysed with RT-PCR method, at pre-administration, 4, 8, 12, and 24 hours after administration. In comparison of abnormal proliferation of vascular endothelial cell induced by DMH, suppression was noticed in Herbimycin and Calphostin C group, and Calphostin C group revealed higher suppression effect. Nevertheless, Catalase group did not have any suppression. In manifestation of four growth factors, Herbimycin and Calphostin C group presented similar manifestation with control group, except in $ITG{\beta}$. Catalse group had similar manifestation with DMH group in all four growth factors. Abnormal proliferation of vascular endothelial cell induced by DMH have a direct relationship with PTK and PKC, more specifically to PKC. Oxidase was confirmed not to have any relevance.
Caesalpinia sappan L. (Leguminosae) is an oriental medicinal herb distributed in China and Taiwan, and its heartwood has been traditionally used as an analgesic, a therapy for thrombosis or tumor. This study was to investigate the proliferation and inhibition effects of Caesalpinia sappan extracts against human epithelial cell and cancer cell lines. The methanol extract of dried C. sappan heartwood was evaporated (KS-6), and then sequentially extracted by hexane (KS-01), chloroform (KS-02), ethyl acetate (KS-03), n-butanol (KS-04), and water (KS-05). After 48 hr of exposure, these fractions at a concentration of $50{\mu}g/ml$ significantly increased, and reduced cell proliferation in both human normal epithelial and cancer cell lines. The ethyl acetate fraction (KS-03) among organic solvent fractions was 120.2% of the most proliferation activity ($50{\mu}g/ml$) against HaCaT human epithelial cell. However, fractions from chloroform, butanolic and methanolic extract had 7.2, 28.7 and 20.8% of antiproliferative effect on HaCaT cell, respectively. In cell proliferation effects of C. sappan extract on HeLa, SiHa and C33A human cervical cancer cells, chloroform fraction (KS-2) was the most antiproliferative activity, its antiproliferative rate (dosage, $50{\mu}g/ml$) relative to control was 25.8, 12.2 and 17.4% for SiHa, HeLa and C33A, respectively. The results indicated that the six extract fractions could induce cell cycle stimulate or arrest in some way. Finally, further investigation is needed to assess the molecular mechanisms mediated anticancer activities of this plant.
An anode-supported SOFC single cell having $5{\mu}m$ thin electrolyte was fabricated cost-effectively by tape casting, laminating, and co-filing of anode (NiO-YSZ), cathode (LSM-YSZ), and electrolyte (YSZ) components. The optimal slurry compositions of the green tapes for SOFC components were determined by an analysis of the mean diameter, the slurry viscosity, the tensile strength/strain of the green tapes, and their green microstructures. The single cells with a dense electrolyte and porous electrodes could be co-fired successfully at $1325\sim1350^{\circ}C$ by controlling the contents of pore former and the ratio of coarse YSZ and fine YSZ in the anode and the cathode. The single cell co-fired at $1350^{\circ}C$ showed $100.2mWcm^{-2}$ of maximum power density at $800^{\circ}C$ but it was impossible to apply it to operate at low temperature because of low performance and high ASR, which were attributed to formation of the secondary phases in the cathode and the interface between the electrolyte and the cathode.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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