This study was carried out to investigate the antifungal activities of the extracts from various parts of three pinus species, P. densiflora, P. rigida and P. koraiensis to pathogenic fungus Collectotrichum gloeosporioides. The EtOAc fraction from the bark of P. koraiensis stem and root showed 98.8 and 100% of activity, respectively to the fungus. Median effective doses $(ED_{50})$ of above two fractions were 469 and 588 ${\mu}g/ml$, respectively in the bioassay with the fungus. $ED_{50}$ of the EtOAc fraction from the bark of P. koraiensis stem against Alternaria brassicicola and Fusarium oxysporum was 533 and 2,277 ${\mu}g/ml$, respectively. This means that the fraction was more sensitive to the C. gloeosporioides and A. brassicicola than the fungus F. oxysporum. The EtOAc fraction from the leaves of P. densiflord showed 39.6% of activity to C. gloeosporioides, but all the fractions from the leaves of two species showed no activity. The active compounds in the bark of P. koraiensis stem and root are being identified.
It is difficult to distinguish melanose and melanoses-like symptoms with the naked eye because they appear similar. To accurately detect melanose symptoms caused by Diaporthe citri from melanose-like symptoms, we developed PCR-based specific primers Dcitri by aligning the internal transcribed spacer (ITS) region of D. citri with the ITS of Diaporthe cytosporella, Diaporthe foeniculina, Colletotrichum gloeosporioides, Botrytis cinerea, Alternaria citri, and Fusarium oxysporum found on citrus peel. PCR results showed that the specific product was amplified in D. citri but not in other isolates including, C. gloeosporioides, B. cinerea, A. citri, F. oxysporum. In addition, specific products were observed in melanose symptoms caused by D. citri but not in melanose-like symptoms, such as copper-injury, sunscald, damages by yellow tea thrips, and pink citrus rust mite. Using the Dcitri primers developed in this study, it is expected that melanose caused by D. citri could be accurately distinguished from melanose-like symptoms.
Each of 48 monoconidial isolates of Colletotrichum gloeosporioides Penz. obtained from diseased fruits of pepper was classified into strain G or strain R based upon pathogenicity to green and red fruits, morphology of conidia, and cultural characteristics in potato dextrose agar. The strain G was designated for isolates to cause anthracnose symptoms both on green and red fruits. All isolates of the strain G produced conidia abundantly. but produced no perithecia and setae in PDA. Conidia of all isolates in the strain G were attenuated or round at one end. The optimum temperature for mycelial growth of strain G was $26-28^{\circ}C$. The mycelia of strain G in PDA appeared to be whitish when young, and turned to be dark in old culture. Symptoms on pepper fruits caused by the strain G were somewhat sunken to be circular to elliptical lesions. Yellowish conidial masse were observed at the center of lesions, and the lesions turned to irregular shape and to reddish brown color in the later stage of disease development. No setae were visible on the acervuli. The strain R was designated for isolates to cause anthracnose symptoms only on red fruits of pepper. All isolates of the strain R produce conidia, and perithecia of Glomerella cingulata (Stonem.) Spauld. & v. Sch. in PDA. Some isolates of the strain R produced setae in culture under fluorescent light. Conidia of all isolates in the strain R were round and blunt at the ends. The optimum temperature for mycelial growth of strain R was the same as that of strain G. The mycelial growth of strain R was faster than that of strain G in PDA. The mycelia of strain R in PDA appeared to be gray to dark. Symptoms on pepper fruits caused by the strain R were circular to irregular black ring-spots Short setae or no setae were visible on the acervuli.
An allosecurinine alkaloid was assayed against spore germination of some saprophytic and pathogenic fungi e.g., Alternaria alternata, A. solani, A. brassicicola, A. brassicae, Curvularia lunata, C. pallescens, C. maculans, Curvularia species, Colletotrichum species, C. musae, C. gloeosporioides, Erysiphe pisi, Fusarium udum, Helminthosporium echinoclova, H. pennisetti, H. spiciferum, and Heterosporium sp. It inhibited mild spore germination of all the fungi tested. Curvularia lunata, Curvularia sp., Collectotrichum sp., C. musae and Heterosporium sp. were most sensitive as complete inhibition of spore germination was observed at very low concentrations.
The inhibitory activity of ent-norsecurinine alkaloid was evaluated against spore germination of some plant pathogenic fungi(Curvularia maculans, Curvularia species, C. palliscens, Colletotrichum gloeosporioides, Colletotrichum species, Afternaria solani, A. brassicae, Fusarium udum, Helminthosporium echinoclova and H. penniseti). It inhibited spore germination of all the test fungi. C. maculans, C. species, and C. palliscens were the most sensitive as complete inhibition of spore germination was observed at 1000 ppm. A. solani was not inhibited by this chemical.
An endophytic fungus strain DYSJ3 was isolated from a stem of Aphanamixis grandifolia Blume, which was identified as Aspergillus versicolor based on the morphological characteristics, internal transcribed spacer (ITS) and calmodulin gene sequences analyses. A. versicolor DYSJ3 exhibited strong antagonistic activity against Colletotrichum musae, C. gloeosporioides and Fusarium oxysporum f. sp. cubense with the inhibition rates of 61.9, 51.2 and 55.3% respectively. The antifungal metabolites mainly existed in the mycelium of A. versicolor DYSJ3, and its mycelial crude extract (CE) had broad-spectrum antifungal activities against plant pathogenic fungi. The CE had a good thermal stability, and the inhibition rate of 100 mg/mL CE against C. musae was above 70.0% after disposing at 120 ℃ for 1 h. Five secondary metabolites were isolated from the CE and identified as averufanin, ergosterol peroxide, versicolorin B, averythrin and sterigmatocystin. Activity evaluation showed versicolorin B exhibited inhibitory effects on the mycelial growth and conidial germination of C. musae, and sterigmatocystin had a weak inhibitory effect on the mycelial growth of C. musae.
A fungal strain, R9, was isolated from the South Atlantic sediment sample and identified as Aspergillus fumigatus. An antifungal protein, AfAFPR9, was purified from the culture supernatant of Aspergillus fumigatus R9. AfAFPR9 was identified to be restrictocin, which is a member of the ribosome-inactivating proteins (RIPs), by MALDI-TOF-TOF-MS. AfAFPR9 displayed antifungal activity against plant pathogenic Fusarium oxysporum, Alternaria longipes, Colletotrichum gloeosporioides, Paecilomyces variotii, and Trichoderma viride at minimum inhibitory concentrations of 0.6, 0.6, 1.2, 1.2, and 2.4 μg/disc, respectively. Moreover, AfAFPR9 exhibited a certain extent of thermostability, and metal ion and denaturant tolerance. The iodoacetamide assay showed that the disulfide bridge in AfAFPR9 was indispensable for its antifungal action. The cDNA encoding for AfAFPR9 was cloned from A. fumigatus R9 by RT-PCR and heterologously expressed in E. coli. The recombinant AfAFPR9 protein exhibited obvious antifungal activity against C. gloeosporioides, T. viride, and A. longipes. These results reveal the antifungal properties of a RIP member (AfAFPR9) from marine-derived Aspergillus fumigatus and indicated its potential application in controlling plant pathogenic fungi.
Kim, Young-Ho;Jun, Ok-Kyoung;Sung, Mi-Joo;Shin, Jun-Sung;Kim, Jung-Ho;Jeong, Myoung-Il
The Plant Pathology Journal
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v.16
no.4
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pp.242-245
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2000
In 1999 and 2000, a rot of graft-cacti including Hylocereus trigonus (three-angled cactus), Gymnocalycium mihanovichii, and Chamaecereus silvestrii occurred in several greenhouses in major cactus-growing areas of Korea. Typical symptoms included a moist, light brown rot or a watery rot of the stems. A Colletotrichum sp. was isolated from the lesions. The fungus formed dark gray, dense or floccose colonies on potato dextrose agar, frequently forming many light pink acervuli often surrounded with setae. The hyaline, cylindrical conidia were one-celled with round ends. Appressoria were mostly semicircular or clavate. Thin-walled asci contained eight, one-celled, hyaline ascospores (biseriate in ascus). Ascopspores were strainht or curved, ellipsoidal or subcylindrical. Based on these characteristics, the fungus was identified as Glomerlla cingulata (anamorph : C. gloeosporioides). Wound inoculation of basal stems of the cactus by the mycelial plugs or conidia produced symptoms identical to those described above. Various cactus species were compared in susceptibility using stem disc inoculation. Cereus tetragonus, Eriocereus jusbertii, Myrtillocactus geomentrizans, and three-angled cacti from Mexico and Taiwan were susceptible, but C. peruvianus (Peruvian apple cactus) and Harrisia tortuosa not. This is the first report of G. cingulata causing stem rot of graft-cactus in Korea.
Hexanal, a C-6 aldehyde has been implicated to have antimicrobial properties. Hence, this study was conducted to determine the antifungal activities of hexanal vapor against major postharvest pathogens of banana viz., Colletotrichum gloeosporioides and Lasiodiplodia theobromae. The pathogens were cultured in vitro and exposed to hexanal vapor at 600, 800, 1,000 and 1,200 ppm. Mycelial growth of both fungal pathogens were inhibited completely at 800 ppm and the incidence of anthracnose and stem-end rot diseases reduced by 75.2% and 80.2%, respectively. The activities of peroxidase, polyphenol oxidase, phenylalanine ammonia-lyase and glucanase had transiently increased in hexanal vapor treated banana by 5 to 7 days and declined thereafter. Postharvest treatment of banana with hexanal vapor resulted in phospholipase D inhibition and also resulted in cell wall thickening of the treated fruit, which impeded the penetration of the pathogenic spores. This was further confirmed by scanning electron micrographs. The defense-related protein intermediaries had increased in hexanal vapor treated banana fruit, which suggests induced resistance against C. gloeosporioides and L. theobromae, via., the phenylpropanoid pathway which plays a significant role in hindering the pathogen quiescence. Delayed ripening due to inhibition of phospholipase D enzyme, inhibition of mycelial growth and induced systemic resistance by defense enzymes collectively contributed to the postharvest disease reduction and extended shelf life of fruit.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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