5종류의 식중독세균 (Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 196E, Salmonella typhimurium)에 대하여 솔잎 ethanol 추출물의 항균작용을 조사하였다. 솔잎 ehanol 추출물을 0-2% (w/v) 함유한 tryptic soy broth(TSB)에 각 식중독세균을 약 $10^4$-$10^{6}$ CFU/ml 정도 되게 접종하여 35$^{\circ}C$에서 48시간 배양하면서 증식억제 정도를 생균수 변화로서 비교하였다. Gram 양성균인 L. monocytogenes, S. aureus와 Gram 음성균인 A. hydrophila는 솔잎 ehanol 추출물에서는 0.5% 이상의 농도에서 증식이 억제되어 솔잎 ethanol 추출물의 항균활성이 우수하였다. 그러나 Gram 음성균인 E. coli O157:H7과 S. typhimurium은 2%의 솔잎 ethanol 추출물에서 약간 증식이 억제되었으나 대체로 두 균주 모두 솔잎 ethanol 추출물에 대하여 강한 내성을 나타내었다. 솔잎 ethanol 추출물에 의한 증식억제 효과는 S. aureus > A. hydrophila> L. monocytogenes > E. coli O157:H7의 순으로 나타났으며 S. typhimurium에서 가장 강한 내성을 나타내었다.
Background: Expression of recombinant antibodies and their derivatives fused with other functional molecules such as alkaline phosphatase in Escherichia coli is important in the development of molecular diagnostic reagents for biomedical research. Methods: We investigated the possibility of applying a well-known Fos-Jun zipper to dimerize $V_H$ and $V_L$ fragments originated from the Fab clone (SP 112) that recognizes pyruvate dehydrogenase complex-E2 (PDC-E2), and demonstrated that the functional zipFv-112 and its alkaline phosphatase fusion molecules (zipFv-AP) can be produced in the cytoplasm of Origami(DE3) trxB gor mutant E. coli strain. Results: The zipFv-AP fusion molecules exhibited higher antigen-binding signals than the zipFv up to a 10-fold under the same experimental conditions. However, conformation of the zipFv-AP seemed to be influenced by the location of an AP domain at the C-terminus of $V_H$ or $V_L$ domain [zipFv-112(H-AP) or zipFv-112(L-AP)], and inclusion of an AraC DNA binding domain at the C-terminus of VH of the zipFv-112(L-AP), termed zipFv-112(H-AD/L-AP), was also beneficial. Cytoplasmic co-expression of disulfide-binding isomerase C (DsbC) helped proper folding of the zipFv-112(H-AD/L-AP) but not significantly. Conclusion: We believe that our zipFv constructs may serve as an excellent antibody format bi-functional antibody fragments that can be produced stably in the cytoplasm of E. coli.
The destruction rate of microorganisms by heat follows the first order reaction. In this experiments, the calculated sterilization velocity constants of Escherichia Coli are 1.97 * $10^{-2}min^{-1}.(45{\deg}$ C), 9.53 * $10^{-2}min^{-1}.(55{\deg}$ C) and $1.858min^{-1}.(70{\deg}$ C), 2.89 * $10^{-2}min^{-1}.(80{\deg}$ C), 1.32 * $10^{-1}min^{-1}.(90{\deg}$ C), 2.87 * $10^{-1}min^{-1}.(95{\deg}$ C), 7.91 * $10^{-1}min^{-1}.(100{\deg}$ C) and $1.777min^{-1}.(105{\deg}$ C). In the results, the activation energy of E. Coli is 62.0 Cal $mole^{-1}.(45{\deg}-60-{\deg})$, that of B. Subtilis are 17.8 Cal $mole^{-1}(60{\deg}-80{\deg}$ C) and 47.1 Cal $mole^{-1}(90{\deg}-105{\deg}$ C).
Plasmid pBR322와 runaway Plasmid pSY343을 vector로 사용하여 E. stearothermophilus IAM 11062내의 $\alpha$-amylase 유전자를 E. coli내에 클로닝 하였다. 이때 얻어진 $\alpha$-amylase유전자는 제한효소 Hind III의 말단을 갖고 있는 4.7kb의 크기였으며 E. coli내에서 이들 유전자는 비교적 안정적 있게 유지되고 발현되었다. 재조합 $\alpha$-amylase유전자가 클로닝된 E. coli는 B. stearothermophilus IAM 11062보다 3배의 $\alpha$-amylase를 더 많이 생성하였다. EDTA를 사용한 osmotic shock 방법에 의하여 E. coli내에서 생성된 $\alpha$-amylase는 그 효소 생성량의 75%정도가 periplasm에 존재함이 밝혀졌다. 재조합된 $\alpha$-amylase 유전자에 의해서 E. coli에서 생성된 $\alpha$-amylase는 최적 작용온도가 55$^{\circ}C$로서 이들의 열안정성과 분자량(61,000)도 B. stearothermophilus IAM 11062의 $\alpha$-amylase와 거의 동일하게 나타나 E. coli와 B. stearothermophilus IAM 11062에서 생성된 $\alpha$-amylase는 효소학적 성질이 같음을 보여주었다.
Pathogenic microorganisms were monitored on the chicken carcasses in slaughterhouse of Jeonbuk area. It was conducted to evaluate the microbiological quality on 204 chicken carcasses. Staphylococcus (S.) aureus was isolated in largest number and its ration was 41.2%, Salmonella spp. 6.4%, Campylobacter (C.)jejuni 7.4%, C. coli 7.4%. Serotype of Salmonella (S.) spp. was identified as S. Infantis 46.1%, S. Enteritidis 23.1%, S. Typhimurium 7.7%, S. Montevideo 7.7%. In breed chickens, Salmonella spp. was detected broiler 4.1%, white semi-broiler 8.0% Korean native chicken 12.0%. C. jejuni was isolated broiler 7.4%, white semi-broiler 12.0%, Korean native chicken 0%, C. coli, broiler 7.4%, white semi-broiler 0%, Korean native chicken 18.1% and S. aureus, broiler 38.8%, white semi-broiler 40.0%, Korean native chicken 51.5%.
Campylobacter species are known to the high optimum growth temperature ($42^{\circ}C$) and the cause of enteritis in people. Erythromycin has a curative effect for enteritis caused by the bacteria. However, the rate of erythromycin-resistant bacteria was not well known until recently in Korea. Swine are one of sources of the infection with a Campylobacter species which cause the symptom of a high temperature. In this study, we cultured rectum fecal specimens of 100 pigs in an area of Buan-gun, Jeonbuk Province during July 2009. As a result, the detection rate of C. jejuni and C. coli and the rate of erythromycin-resistant bacteria for the separated Campylobacter species on the condition of high temperature were investigated. The possession or not of hipO and glyA gene and ciprofloxacin-resistant gene gyrA was also reviewed with biochemical characteristics and PCR.
GroEL is a typical molecular chaperone. GroEL synthesis patterns at various culture temperatures in Escherichia coli were investigated in this study. No significant differences in the amount of GroEL produced from the chromosome were found at 30 and 37$^{\circ}C$. However, GroEL production increased 3.4-fold at 42$^{\circ}C$. GroEL synthesis was not transient but continuous at 42$^{\circ}C$, although most heat shock gene expression is known to be transient. To understand the role of the groEL structural gene, a groE promoter-lacZ fusion was constructed. Interestingly , while transcriptional fusion is not thermally inducible, it is inducible by ethanol, suggesting that the secondary structure of the groEL transcript is involved in thermal regulation of the groEL gene. Secondary structures of groE mRNA at 37 and 42$^{\circ}C$ were compared using the computer program RNAdraw. Distinct structures at the two temperatures were found, and these structures may be related to a high level of GroEL expression at 42$^{\circ}C$.
A total of twenty-five norfloxacin resistant Escherichia coli were isolated from Joongrang-chun stream, a branch of the Han River in Seoul, Korea from May to July in 2000 and their norfloxacin resistance mechanism was characterized for target site mutation, permeability, and efflux pump. Fourteen iso- lates contained the same three mutations, Ser83→Leu and Asp87→Asn in GyrA and Ser90→ lle in ParC. Six isolates had Ser83→Leu and Asp87→Tyr in GyrA and Ser87→lle in ParC while one isolate had Ser83→Leu and Va1103→Ala in GyrA and Ser80→lle in ParC. Two isolates had mutation(s) in GyrA without any mutation in ParC. Two isolates had Ser80→Arg in ParC instead of the commonly found Ser80→lle. Every norfloxacin resistant isolate had an efflux system but the correlation between the efflux activity and MIC was not observed. The amount of OmpF for norfloxacin permeability decreased in resistant isolates compared to the susceptible strains. When amplified polymorphic DNA (RAPD) and pulse field gel electrophoresis (PFGE) were performed, these isolates showed no similarity to each other or clinical isolates.
To ensure the safety of domestic livestock products, the government made it obligatory to enforce the hazard analysis critical control point(HACCP) in all domestic slaughterhouses. Under the HACCP, most of the hazards generated in slaughterhouses are bio-hazards, especially pathogenic bacteria. In order to reduce to the pathogenic bacteria, critical control point (CCP) is established and controled in the process of slaughter. A study was carried out to measure the level of bacterial contamination of swine carcass in 6 slaughterhouses selected. As a result, the aerobic plate counts(cfu/$\textrm{cm}^2$) of all samples was $10^2$-10 in average, except slaughterhouse C. The level of the aerobic plate counts on the surface of lower loin in slaughterhouse C was $10^4$ and it was considered that slaughterhouse C should set the process of manual transport of carcass as the CCP. Escherichia coli level was the highest in middle line cut surface. Especially, E coli level of slaughterhouses C and D were about 6.5- and 3.0-fold higher than that of other 4 slaughterhouses. Thus, it was considered that the slaughterhouses C and D should set the process of the entrails treatment as the CCP. The air contamination was measured at two point in a slaughterhouse. The air contamination level was 4-13 times higher than that of the standard Japanese slaughterhouses.
PCBs를 분해하는 Pseudomonas sp. P20 균주의 pcbC gene이 재조합 된 E. coli CK1092 균주를 이용하여 2,3-dihydroxybiphenyl dioxygenase 생산에 미치는 배양조건을 검토하였다. E. coli CK1092를 2% sucrose가 포함된 LB 배지를 기본배지로 하여 질소원, 금속이온 등의 영향을 조사한 결과, $Fe^{3+}$와 $Fe^{2+}$이 $10^{-5}M$의 농도일때 효소생산이 증가되었으며 배양최적온도는 $37^{\circ}C$, 배양초기 pH 7.0일때 효소생산이 우수하였다. 배양조에서의 배양조건은 초기 pH 7.0, 통기량 1 v/v/m, 교반속도 200rpm에서 가장 효소생성이 우수하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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