Son, Kyeong-Ae;Im, Geon-Jae;Hong, Su-Myeong;Kim, Chan Sub;Gil, Geun-Hwan;Jin, Yong-Duk;Kim, Jinba;Ihm, Yang Bin;Ko, Hyeon Seok;Kim, Jang Eok
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.17
no.4
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pp.293-301
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2013
This study was carried out to investigate the pesticide residue pattern among different leafy vegetables applied with foliar spraying under greenhouse and to check extrapolating from some residue trial data to other minor crops. Leafy vegetables used in this study were: Mustard greens (Brassica juncea L.), Kale (Brassica oleracea L.), Dacheongchae (a kind of pak-choi (Brassica rapa subsp. chinensis L.)), Leaf broccoli (Brassica oleracea var alboglabra), Perilla leaf (Perilla frutescens (L.) Britton var. Frutescens), Leaf lettuce (Lactuca sativa L.), Swiss chard (Beta vulgaris L. subsp. vulgaris) and Red leaf chicory (Cichorium intybus L. var. foliosum Hegi). These are cultivated all year under indoor or outdoor and cut the leaf from plant continuously during harvest time. The amounts of pesticide deposit in/on the continuous harvesting leafy vegetables were affected by the ratios of leaf area to weight. Ratio of perilla leaf was the largest among crops as 58 $cm^2/g$. The residue levels of 7 pesticides in/on perilla leaf were the highest than those of other crops through the statistical analysis from zero day to fifth day after last application. The representative crop in 8 crops was perilla leaf selected based on the amounts of daily consumption and the high residues. This study suggest that the continuous harvesting leafy greens should be separated from the one time harvesting leafy vegetables for the pesticide recommendations because of different harvesting habits and pre-harvest intervals.
Kim, Jin A;Yang, Tae-Jin;Kim, Jung Sun;Park, Jee Young;Kwon, Soo-Jin;Lim, Myung-Ho;Jin, Mina;Lee, Sang Choon;Lee, Soo In;Choi, Beom-Soon;Um, Sang-Hee;Kim, Ho-Il;Chun, Changhoo;Park, Beom-Seok
Molecules and Cells
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v.23
no.2
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pp.145-153
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2007
Elucidation of the roles of circadian associated factors requires a better understanding of the molecular mechanisms of circadian rhythms, control of flowering time through photoperiodic pathways, and photosensory signal transduction. In Arabidopsis, the APRR1 quintet, APRRs 1, 3, 5, 7, and 9, are known as central oscillator genes. Other plants may share the molecular mechanism underlying the circadian rhythm. To identify and characterize these circadian response genes in Brassica crops whose genome was triplicated after divergence from Arabidopsis, we identified B. rapa BAC clones containing these genes by BLAST analysis of B. rapa BAC end sequences against the five corresponding Arabidopsis regions. Subsequent fingerprinting, Southern hybridization, and PCR allowed identification of five BAC clones, one for each of the five circadian-related genes. By draft shotgun sequencing of the BAC clones, we identified the complete gene sequences and cloned the five expressed B. rapa circadian-associated gene members, BrPRRs 1, 3, 5, 7, and 9. Phylogenetic analysis revealed that each BrPRR was orthologous to the corresponding APRR at the sequence level. Northern hybridization revealed that the five genes were transcribed at distinct points in the 24 hour period, and Southern hybridization revealed that they are present in 2, 1, 2, 2, and 1 copies, respectively in the B. rapa genome, which was triplicated and then diploidized during the last 15 million years.
With the increasing advances in Brassicaceae genetics and genomics, considerable progress has been made in the transformation of Brassicaceae. Transformation technologies are now being exploited routinely to determine the gene function and contribute to the development of novel enhanced crops. $Agrobacterium$-mediated transformation remains the most widely used approach for the introduction of transgenes into Brassicaceae. In $Brassica$, the transformation relies mainly on $in$$vitro$ transformation methods. Nevertheless, despite the significant progress made towards enhancing the transformation efficiencies, some genotypes remain recalcitrant to transformation. Advances in our understanding of the genetics behind various transformations have enabled researchers to identify more readily transformable genotypes for use in routine high-throughput systems. These developments have opened up exciting new avenues to exploit model $Brassica$ genotypes as resources for understanding the gene function in complex genomes. Although many other Brassicaceae have served as model species for improving plant transformation systems, this paper summarizes on the recent technologies employed in the transformation of both $Arabidopsis$ and $Brassica$. The use of transformation technologies for the introduction of desirable traits and a comparative analysis of these as well as their future prospects are also important parts of the current research that is reviewed.
For molecular breeding purpose, genetic transformation of Brassica napus cultivars has been extensively performed using Agrobacterium method. B. napus cv. napus, one of major oil crops, can be transformed via Agrobacterium-based method. We demonstrated that Agrobacterium-mediated transformation via vacuum infiltration slightly worked for the seedlings of B. napus cv. napus according to fluorometric GUS enzyme analysis. In contrast, transformation efficiency was highly enhanced when the seedlings, prior to agroinfiltration, were treated with sodium hydrosulfite solution as a chemical wounding agent. GUS gene expression in transformed seedlings that was confirmed by RT-PCR suggests their usefulness for the development of transient expression system.
Plasmodiophora brassicae, the causal agent of clubroot disease, does the most serious damage to the Brassica crops. The limited control approaches make that the identification of clubroot resistance (CR) is more important for developing CR cultivars of the Brassica crops. So far, 8 CR loci were mapped. However, the variation of P. brassicae leads to the rapid erosion of its resistance. To identify novel CR genes, we employed three mapping population, derived from crosses between Chinese cabbage and turnip inbred lines ($59-1{\times}ECD04$ and $BJN3-1{\times}Siloga$) or between Chinese cabbage inbred lines ($BJN3-1{\times}85-I-II$), to perform QTL analysis. Totally, 8 CR loci were indentified and showed race-specific resistance. Physical mapping of these 8 loci suggested that 4 were located previously mapped position, indicating they might be the same allele or different alleles of the same genes. Other 4 loci were found to be novel. Further, CR near isogenic line carrying each CR locus was developed based on the marker assisted selection. Verification of these CR loci was underway. Identification of these novel CR genes would facilitate to breed broad-spectrum and durable CR cultivars of B. rapa by pyramiding strategies.
Homology-specific transcriptional and post-transcriptional silencing, an intrinsic mechanism of gene regulation in most eukaryotes, can be induced by anti-sense, co-suppression, or hairpin-based double-stranded RNA. Hairpin-based RNA interference (RNAi) has been applied to analyze gene function and genetically modify crops. However, RNAi vector construction usually requires high-cost cloning steps and large amounts of time, or involves methods that are protected by intellectual property rights. We describe a more effective method for generating intron-spliced RNAi constructs. To produce intron-spliced hairpin RNA, an RNAi cassette was ligated with the first intron and splicing sequences of the Brassica rapa ssp. pekinensis histone deacetylase 1 gene. This method requires a single ligation of the PCR-amplified target gene to SpeI-NcoI and SacI-BglII enzyme sites to create a gene-specific silencing construct. We named the resulting binary vector system pKHi and verified its functionality by constructing a vector to silence DIHYDROFLAVONOL 4-REDUCTASE (DFR), transforming it into tobacco plants, and confirming DFR gene-silencing via PCR, RT-qPCR, and analysis of the accumulation of small interfering RNAs. Reduction of anthocyanin biosynthesis was also confirmed by analyzing flower color of the transgenic tobacco plants. This study demonstrates that small interfering RNAs generated through the pKHi vector system can efficiently silence target genes and could be used in developing genetically modified crops.
Brassica rapa is considered an ideal candidate to act as a reference species for Brassica genomic studies. Among the three basic Brassica species, B. rapa (AA genome) has the smallest genome (529 Mbp), compared to B. nigra (BB genome, 632 Mbp) and B. oleracea (CC genome, 696 Mbp). There is also a large collection of available cultivars of B. rapa, as well as a broad array of B. rapa genomic resources available. Under international consensus, various genomic studies on B. rapa have been conducted, including the construction of a physical map based on 22.5X genome coverage, end sequencing of 146,000 BACs, sequencing of >150,000 expressed sequence tags, and successful phase 2 shotgun sequencing of 589 euchromatic region-tiling BACs based on comparative positioning with the Arabidopsis genome. These sequenced BACs mapped onto the B. rapa genome provide beginning points for genome sequencing of each chromosome. Applying this strategy, all of the 10 chromosomes of B. rapa have been assigned to the sequencing centers in seven countries, Korea, UK, China, India, Canada, Australia, and Japan. The two longest chromosomes, A3 and A9, have been sequenced except for several gaps, by NAAS in Korea. Meanwhile a China group, including IVF and BGI, performed whole genome sequencing with Illumina system. These Sanger and NGS sequence data will be integrated to assemble a draft sequence of B. rapa. The imminent B. rapa genome sequence offers novel insights into the organization and evolution of the Brassica genome. In parallel, the transfer of knowledge from B. rapa to other Brassica crops would be expected.
Brassica rapa is one of the most valuable vegetable crops worldwide. Cultivated varieties of B. rapa exhibit diverse developmental and morphological appearances, which includes important vegetables, oilseeds, and fodder crops. In this study, various phenotypes of recombinant inbred lines (RILs) of B. rapa were investigated, including their responses to five different pathogenic Botrytis cinerea isolates, responses to aphid and thrips during flowering stages, days to flowering, and plant heights. Responses of 113 RILs to five different B. cinerea isolates showed variations, suggesting that genetic factors controlling resistance or tolerance against each isolate were dependent on isolate/genotype pairs. Correlation analysis was performed to understand the nature of genetic factors and the relationship among these phenotypes. Although high levels of correlation were not detected between phenotypes assessed in this study, statistically significant correlation was detected for several combinations. Significant positive correlations were found for different B. cinerea isolates, supporting that certain levels of commonality could exist in genetic components controlling resistance against different B. cinerea isolates. Based on correlation analysis using numbers of insects counted on plants, it was speculated that genetic factors responsible for aphid tolerance or repellence might be also involved in the response against thrips. Relationship between vegetative growth and tolerance against B. cinereal or insects is rather more complicated. However, it was observed that shorter plants appeared to have a certain level of tolerance or repellence against both aphids and thrips. Data presented in this study could be used to assist further genetic studies and breeding efforts to obtain Botritis and insect resistance for B. rapa.
As a scientific curiosity to understand the structure and the function of crops and experimental efforts to apply it to plant breeding, genetic maps have been constructed in various crops. Especially, in the case of Brassica crop, genetic mapping has been accelerated since genetic information of model plant $Arabidopsis$ was available. As a result, the whole $B.$$rapa$ genome (A genome) sequencing has recently been done. The genome sequences offer opportunities to develop molecular markers for genetic analysis in $Brassica$ crops. RFLP markers are widely used as the basis for genetic map construction, but detection system is inefficiency. The technical efficiency and analysis speed of the PCR-based markers become more preferable for many form of $Brassica$ genome study. The massive sequence informative markers such as SSR, SNP and InDels are also available to increase the density of markers for high-resolution genetic analysis. The high density maps are invaluable resources for QTLs analysis, marker assisted selection (MAS), map-based cloning and comparative analysis within $Brassica$ as well as related crop species. Additionally, the advents of new technology, next-generation technique, have served as a momentum for molecular breeding. Here we summarize genetic and genomic resources and suggest their applications for the molecular breeding in $Brassica$ crop.
This review summarises the biology, discovery and applications of single nucleotide polymorphisms in complex polyploid crop genomes, with a focus on the important oilseed crop $Brassica$$napus$. $Brassica$$napus$ is an allotetraploid species, and along with soybean and oil palm is one of the top three most important oilseed crops globally. Current efforts are well underway to $de$$novo$ assemble the $B.$$napus$ genome, following the release of the related $B.$$rapa$ 'A' genome last year. The next generation of genome sequencing, SNP discovery and analysis pipelines, and the associated challenges for this work in $B.$$napus$, will be addressed. The biological applications of SNP technology for both evolutionary and molecular geneticists as well as plant breeders and industry are far-reaching, and will be invaluable to our understanding and advancement of the $Brassica$ crop species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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