In order to find therapeutic agents for porcine pneumonia, we screened far antibacterial activities of methanol extracts of 81 higher plants against four pathogenic microorganisms of Heamophilus parasuis, Pasteurella multocida, Actinobacillus pleuropneumonia, and Bordetella bronchiseptica, and found the bark of Cinnamomi cortex showed potent activities. Since this was inexpensive, we purified active compounds from it. The structures of the final active fractions were obtained through an activity-guided fractionation and their antibacterial activities are reported here.
Park, Mi-Young;Jeon, Oh-Sook;Cho, Yun-Kyoung;Choi, Kyung-Mook;Woo, Jong-Tae
Korean Journal of Veterinary Service
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v.32
no.2
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pp.165-169
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2009
Suppuratives bronchopneumonia was found in a 3-month old domestic muskrat (Ondatra zibethicus). Dead muskrat showed hemorrhagic nasal discharge, severe hemorrhage and consolidation were observed in the lungs in necropsy. Histologically, severe polymorphic neutrophils and alveolar macrophages were infiltrated in the bronchus, bronchioles, alveoli. P. multocida and B. bronchiseptica were identified from the lungs, Klebsiella was isolated from the cecum. We demonstrated those organisms by biochemical test and confirmed P. multocida capsular type A by means of polymerase chain reaction (PCR).
Swine respiratory diseases have induced severe economic losses in swine industry worldwide. Several methods have been developed and applied to prevent and control the disease. However, those are still problematic in swine industry. Recently, the use of egg yolk antibodies with several advantages was introduced and applied to control diseases in animal as well as human. As the first step of the use of egg yolk antibodies in the control of the swine respiratory diseases, we investigated the immunogens of the causative agensts of the diseases and immune response in egg yolk of hens immunized with them. Bacterial antigens prepared from Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida 3A and 4D, and Actinobacillus pleuropneumaniae serotype 2 and 5 were analyzed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, Western blot and toxicity test in mice. The antigens were injected into laying hens in order to produce antibodies against them in egg yolk. After chickens were immunized three times in 2 weeks interval, the profile of antibody production was examined by ELISA. The production of antibody in egg yolk was started in 2 weeks after the first injection, reached peak in 6-8 weeks and maintained until 12 weeks. Of two adjuvants used in this study, ISA70 was more effective than aluminum hydroxide gel in enhancing immunogenecity, laying rates and safety in hens. These results suggested that egg yolk antibodies could be a good source for production of antibodies specific to pathogenic bacteria inducing respiratory diseases of swine.
For prevention of atrophic rhinitis of swine by Bordetella bronchiseptica and fowl typhoid by Salmonella gallinarum, bacterial strains showing antimicrobial activity against those pathogenic bacteria were isolated from various samples collected at animal farms. Among 372 bacterial isolates strain TK3 showed the highest antibacterial activity against both pathogens, and was identified as Bacillus amyloliquefaciens by 16S rRNA gene sequence analysis. B. amyloliquefaciens TK3 could inhibit growth of both pathogens by secretion of antibacterial compounds such as siderophore, rhamnolipid and antimicrobial peptide. Production radius of siderophore on Chrome azurol S agar plate by strain TK3 was 0.53 cm after 14 days of incubation, and concentration of siderophore in King's B medium was 1.06 mmol/ml. It also secreted 82.4 mg/L of rhamnolipid, and antimicrobial peptide that completely inhibited growth of both pathogens at concentration of $30{\mu}l/ml$ in LB medium.
돼지의 전염성위축성비염(傳染性萎縮性鼻炎)의 주요한 병원균(病原菌)이라고 생각되는 Bordetella bronchiseptica(이하(以下)B균(菌)) 자연감염돈분리유내균주(自然感染豚分離由來菌株)를 사용하여 mouse 비강내정착성(鼻腔內定着性)에 관(對)한 사균면역(死菌免疫)의 효과(效果)를 검토하고자, 먼저 상변리(相變異)에 따르는 균(菌)의 독역(毒力)과 감염방어성(感染防禦性)을 비교함과 동시에, I 상균불활화예방액(相菌不活化豫防液)의 면역원성(免疫原性)에 관(對)한 기초적인 검토를 실시하였고, 이에 계속하여 생균비강내접종(生菌鼻腔內接種)에 따르는 균(菌)의 정착성(定着性)과 혈중응집(血中凝集) 항체(抗體)의 경시적(經時的)인 추이(推移)를 검토하였다. 얻어진 성적을 요약하면 다음과 같다. 1. B균(菌) I 상균(相菌)(W-1029주(株))의 독역(毒力)은 III 상균(相菌)(H-969주(株))에 비하여 독역(毒力)이 강하였으며, I 상균(相菌)은 감염방어성(感染防禦性)을 보유하고 있었으나 III 상균(相菌)은 감염방어성(感染防禦性)이 전혀 없었다. 2. B균(菌) I 상균사균면역(相菌死菌免疫)에 있어서 formalin과 merthiolate 처리(處理) 및 불활화온도(不活化溫度)($0^{\circ}C$및 $37^{\circ}C$)간(間)에는 현저한 면역원성(免疫原性)의 차이는 인정할 수 없었다. 3. 사균면역(死菌免疫)을 실시한 mouse 군(群)에 생균(生菌)의 경비접종(經鼻接種)에 의하여 경시적(經時的)으로 균(菌)의 호흡기도내(呼吸氣道內)의 정착성(定着性)과 혈중응집항체가(血中凝集抗體價)의 추이(推移)를 보았던 바, 비면역대조군(非免疫對照群)에 비하여 면역군(免疫群)은 현저한 면역효과(免疫效果)를 나타내었으나, 면역군(免疫群)에서 간헐적(間歇的)인 배균(排菌)이 상당기간에 걸쳐 인정되었으며 또한 응집항체가(凝集抗體價)의 상승에 따르는 비강내정착균(鼻腔內定着菌)의 완전소실(完全消失)은 다소 곤난함이 인정되었다. 이상(以上)의 성적(成積)으로 B균사균항원(菌死菌抗原)을 사용하여 고도(高度)의 면역(免疫)을 시킴으로서 비강내(鼻腔內)에 있어서의 B균(菌)의 정착(定着)을 조지(阻止)할 수 있는 가능성(可能性)이 시사(示唆)되나 항체가(抗體價)의 상승(上昇)에 따르는 균(菌)이 비강내(鼻腔內)에서 완전 소실(消失)이 다소 곤난한 점은 본균(本菌)과 호흡기도점막감염(呼吸器道粘膜感染)의 실태(實態)를 시사(示唆)하는 것으로 보아진다.
Park, Ga Young;Lee, Hye Min;Yu, Hyun Jin;Son, Jee Soo;Park, Sang Joon;Song, Kyoung Seob
Genes and Genomics
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v.40
no.12
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pp.1383-1388
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2018
The development of therapeutic bacteriophages will provide several benefits based on an understanding the basic physiological dynamics of phage and bacteria interactions for therapeutic use in light of the results of antibiotic abuse. However, studies on bacteriophage therapeutics against microbes are very limited, because of lack of phage stability and an incomplete understanding of the physiological intracellular mechanisms of phage. The major objective of this investigation was to provide opportunity for development of a novel therapeutic treatment to control respiratory diseases in swine. The cytokine array system was used to identify the secreted cytokines/chemokines after Bordetella bronchiseptica infection into swine nasal turbinate cells (PT-K75). We also performed the real-time quantitative PCR method to investigate the gene expression regulated by B. bronchiseptica infection or bacteriophage treatment. We found that B. bronchiseptica infection of PT-K75 induces secretion of many cytokines/chemokines to regulate airway inflammation. Of them, secretion and expression of IL-$1{\beta}$ and IL-6 are increased in a dose-dependent manner. Interestingly, membrane-bound mucin production via expression of the Muc1 gene is increased in B. bronchiseptica-infected PT-K75 cells. However, cytokine production and Muc1 gene expression are dramatically inhibited by treatment with a specific B. bronchiseptica bacteriophage (Bor-BRP-1). The regulation of cytokine profiles in B. bronchiseptica-induced inflammation by B. bronchiseptica bacteriophage is essential for avoiding inappropriate inflammatory responses. The ability of bacteriophages to downregulate the immune response by inhibiting bacterial infection emphasizes the possibility of bacteriophage-based therapies as a novel anti-inflammatory therapeutic strategy in swine respiratory tracts.
Bordetella (B.) bronchiseptica, Mycoplasma (M.) felis, and Chlamydia (C.) felis are considered as main bacterial pathogens of feline upper respiratory tract disease (URTD). In this study, a new triplex quantitative real-time polymerase chain reaction (tqPCR) assay was developed for the rapid and differential detection of these bacteria in a single reaction. The assay specifically amplified three bacterial genes with the detection limit of below 10 copies/reaction. The assay showed high repeatability and reproducibility, with coefficients of intra-assay and inter-assay variation of less than 1%. Based on the diagnostic results of the assay using 94 clinical samples obtained from cats with URTD signs, prevalence of B. bronchiseptica, M. felis, or C. felis was 10.6%, 36.2%, or 6.4%, respectively, indicating that the diagnostic sensitivity was comparable to those of previously reported monoplex qPCR assays. The dual infection rates for B. bronchiseptica and M. felis or M. felis and C. felis was 2.1% or 3.2%, respectively. These results indicated that M. felis has been widely spread, and its co-infection with B. bronchiseptica or M. felis has been frequently occurred in Korean cat population. The developed tqPCR assay will serve as a promising tool for etiological and epidemiological studies of these three bacterial pathogens and the prevalence data obtained in this study will contribute to expanding knowledge about the epidemiology of feline URTD in Korea.
Bordetella bronchiseptica, the agent of swine atrophic rhinitis and kennel cough in dogs, is a mucosal pathogen and produces the hydroxamate type alcaligin siderophore under iron-limited conditions. Genes involved in alcaligin siderophore biosynthesis are contained in an alcABCDE operon. In order to provide direct evidence for the role of AlcA in alcaligin biosynthesis, we needed a B. bronchiseptica mutant carrying alcA gene deletion. A 0.6 kb alcA 5'-flanking and 0.7kb 3'-flanking DNA fragments were PCR amplified with the use of pCP1.11 as a template DNA. The 5'-and 3'-flanking DNA fragments were joined in a suicide plasmid, resulting in a recombinant suicide plasmid pDM1. After introduction of pDM1 into B. bronchiseptica by conjugation, the allelic exchange technique was performed and a B. bronchiseptica alcA deletion mutant, named B. bronchiseptica H1, was obtained. The mutant strain produced reduced amount of siderophore as expected. When a plasmid containing complete alcA gene was transformed back into the mutant, the complemented mutant recovered ability of siderophore production. These results indicated that AlcA is one of essential components for the alcaligin siderophore biosynthesis. The mutant strains obtained in this study will be used in the further studies for the biochemical function of AlcA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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