The present study was to determine the influence of micro-macro biphasic calcium phosphate(MBCP) on proliferation and differentiation of human marrow-derived mesenchymal stem cells. Primary stem cells were cultured from bone marrow and 3-4 passaged cells were used. This study tested the proliferative effects by cell counting. Collagen sythensis, alkaline phosphatase activity, expression of osteocalcin and bone sialoprotein by Western blot analysis were evaluated. The cellular proliferation of ASC was not influenced by MBCP. Collagen synthesis of ASC cultured on MBCP significantly increased at 5th and 7th days(p<0.05). The ALP activity in ASC cultured on MBCP significantly increased at 5th and 7th days(p<0.05). The expression of OC and BSP incresaed in ASC cultured on MBCP. These results suggest that MBCP may stimulates the osteoblastic activity of ASC.
Objectives : There is a pressing need to determine the clinical and scientific validity of herbal therapies for animal model with atopic dermatitis since some differences in systemic cytokine polarization between in animal model and in patients with atopic dermatitis has been reported. New studies for tang, medicinal herb itself or effective ingradients of medicinal herb showing anti-atopic dermatitis effectiveness are reviewed in terms of cytokine regulation. Methods : Those herbal therapies used to treat atopic dermatitis in animal model were introduced and the expression pattern of cytokine and the activity of mast cell were compared in both animal model and patients with atopic dermatitis. Results : In case of atopic dermatitis in human, there is a biphasic pattern of cytokine expression in atopic dermatitis, with acute skin inflammation associated with a predominance of IL-4 and IL-13 expression from Th2 cells, and chronic inflammation associated with increased IL-5 from Th2-cells and IFN-${\gamma}$ from Th1-cells. However, a pattern of cytokine expression in animal model with atopic dermatitis is not matched well to the biphasic pattern of cytokine expression in patients with atopic dermatitis. In addition, a kind of cytokine is different by animal model with atopic dermatitis. These differences would make herbal medicines, showing their effectiveness on atopic dermatitis, difficult to apply to patients with atopic dermatitis. Conclusion : The pattern of local cytokine expression plays an important role in modulating tissue inflammation, and in atopic dermatitis this pattern depends on the acuity or duration of the skin lesion. Thus, in order to develop medicinal herb itself or effective ingradients of medicinal herb showing anti-atopic dermatitis effectiveness, biphasic pattern of cytokine expression should be considered in animal model with atopic dermatitis.
Biosilica is a silica-based substance derived from the cell walls (frustules) of diatoms. Recently, research into biosilica's biological functions is underway, but little has been reported on the effects of biosilica on immune cells. In this study, we investigated the effect of ionized biosilica water (iBW) on dendritic cells (DCs), which play crucial roles as antigen (Ag)-presenting cells. Treatment with iBW increased the expression of immune response-related markers, closely connected to the maturation of DCs, and the production of tumor necrosis factor-alpha. In addition, iBW-treated DCs (iBW-DCs) had a lower uptake of fluorescein isothiocyanate-dextran than that of control DCs. Mixed leukocyte response analysis used for measuring the Ag-presenting capability of DCs, showed iBW-DCs had a higher capability than that of control DCs. Interestingly, DCs treated with lipopolysaccharide (LPS) and iBW had a lower level of Ag-presenting capability than that of LPS-treated DCs. Taken together, the results indicate that iBW alone can mature DCs, but it decreases the Ag-presenting capability of DCs in the presence of LPS, a representative agent of inflammation. This study may provide valuable information regarding the effect of iBW on immune cells. Further research is needed to investigate how iBW induces the observed biphasic immunomodulatory activity.
비생물학적 스트레스로 $H_2O_2$를 이용하여 산화적 스트레스와 고염분 스트레스를 처리한 후 ROS의 생성을 확인한 결과 스트레스 처리 후 30분에 일시적으로 1차 peak를 형성하였다가 거의 basal level까지 감소하고 다시 증가하여 3시간에 매우 다량의 2차 peak를 형성한 후 거의 basal level로 다시 낮아지는 biphasic 양상을 나타내게 된다. 따라서 ROS의 생성은 초기 30분 내에 일시적으로 발생한 Phase I의 ROS와 Phase II의 좀 더 장기적으로 다량의 고농도로 발생된 ROS의 생리적 역할이 다를 것으로 여겨진다. 본 논문에서는 스트레스 처리 시 생성되는 ROS를 확인한 후 ROS 생성 유전자인 RbohD와 RbohF 유전자 발현이 억제된 RbohD-AS, RbohF-AS 형질전환 식물체를 이용하여 실험을 수행하였다. 스트레스에 의해 생성되는 ROS의 생성을 억제시킴으로써 스트레스에 대한 ethylene 생성이 더 적은 것으로 나타났다. 또한, 이들 형질전환 식물체에서 ethylene 생성과 $H_2O_2$ 억제 효과를 확인하였으며 고염분 등의 스트레스에 대한 저항성은 ROS와 ethylene의 생성이 저하되어 나타난 것으로 판단된다. 산화적 스트레스와 고염분 스트레스에서 후기 ethylene이 다량으로 생성되는 시기, 즉 세포손상이 초래되는 후기에서 DNA fragmentation 분석을 통해서 ROS와 ethylene의 생성이 높은 식물체일수록 PCD가 높게 나타난 것으로 여겨지며, 이 과정에서 작용하는 유전자는 RbohD와 RbohF인 것으로 보이며, RbohD가 더 효과적으로 작용하는 것으로 생각된다. 따라서 스트레스에 반응하는 신호전달과정에서 초기에 ROS가 생성이 되고 후기에 ethylene이 다량으로 생성되어 결국 세포죽음에 이르게 하는 상호 synergism을 일으켜 반응을 나타내며, 이러한 반응 과정에서 RbohD와 RbohF 유전자 발현의 억제가 스트레스에 대한 식물체의 저항성을 높이는 것으로 사료된다.
Background: Synovial sarcoma is a mesenchymal neoplasm that accounts for around 10% of all soft tissue sarcomas. The diagnosis of synovial sarcoma can be a challenging task, particularly with small biopsy specimens. Aim: We investigated transducer-like enhancer of split 1 (TLE1), monoclonal antibody, expression by immunohistochemical analysis in a group of 74 synovial sarcoma cases, 20 cases of MPNST, 12 cases of neurofibroma, 15 cases of schwannoma, 5 cases of MFH, 10 cases of lieomyosarcoma and 10 cases of solitary fibrous tumor. Materials and Methods: Whole tissue sections were examined: (39 biphasic and 35 monophasic). Nuclear immunoreactivity was scored as negative (<5% of cells positive), 1+(mild /5-25%), 2+ (moderate/25-50%), and 3+ (strong >50%). Results: Overall, 71 (96%) of 74 synovial sarcomas were positive for TLE1, including 37 biphasic (95%) and 34 monophasic (97%) tumors. Other spindle cell tumors showed very low or absent staining of TLE1. Conclusions: We conclude that TLE1 is a sensitive marker and can be a useful diagnostic marker for synovial sarcoma, particularly the monophasic forms.
교정적 치아이동과 밀접한 관련이 있는 치주인대세포에서, 산화질소가 세포의 증식과 분화에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 인간 치주인대세포를 분주한 후에 산화질소의 donor인 SNP의 농도에 따라 실험군을 구분하고, 세포 활성 염기성 인산분해효소 활성, Western blot 분석을 통한 osteonectin과 bone sialoprotein의 발현 정도를 측정하였다. 0.2 mM 이하의 저농도 SNP를 처리한 실험군에서 대조군과 비교하여 세포 활성, 염기성 인산분해 효소의 활성, 그리고 osteonectin과 bone sialoprotein의 발현이 유의하게 증가하였다. 그러나 1 mM 이상의 고농도 SNP를 처리한 실험군에서는 오히려 감소하였다. 산화질소는 인간 치주인대세포에서 저농도는 세포의 증식과 분화에 촉진 효과를, 고농도는 억제 효과를 보이는 biphasic effect를 갖는다.
Genistein is a potent, plant-derived isoflavone that displays estrogenic activity at low concentrations but inhibits proliferation at high amounts. However, the molecular mechanism of genistein is not completely understood. In the present study, the biphasic effects (estrogenic and antiestrogenic activity) of genistein on the growth of MCF-7 cells were identified. Genistein within a low range of concentration, $1-10\;{\mu}M$, stimulated proliferation, while $50-100\;{\mu}M$ caused apoptotic cell death. Additionally, genistein at a low concentration induced estrogen receptor (ER)-mediated gene expression and ER phosphorylation. When pre-treated with PD98059, an MEK inhibitor, ER-mediated gene expression and ER phosphorylation by genistein were noticeably increased. However, the increased gene expression and phosphorylation did not enhance cell proliferation. Moreover, it was observed that ER-mediated signaling performs an important role in the MAPK pathway. The proliferation and apoptosis in genistein-treated MCF-7 cells were partially dependent on the Bcl-2 level. The addition of IC1 182, 780, an estrogen receptor antagonist, inhibited Bcl-2 expression induced by genistein. This study suggests that there is a close relationship between Bcl-2 and the ER signaling pathways in MCF-7 cells.
Purpose : The purpose of this experiment was to evaluate the pre-application effect of low frequency electrical stimulation(LFES) on VEGF expression of atrophic muscle and to determine the optimal pre-application period of LFES for prevent muscle atropy Methods : Twenty-five adult sprague-dawley rats were randomly assigned to weight bearing group, hindlimb suspension for 14 days group, hindlimb suspension with pre-application of LFES for 14 days group, hindlimb suspension with pre-application of LFES for 11 dsys group and, hindlimb suspension with pre-application LFES for 7 dsys group. 16Hz of Biphasic pulse current was applied to gastrocnemius for 15min per days. Results : VEGF were decreased expression in HSG groups, whereas VEGF were significantly increased in HS+ES14G, HS+ES11G, HS+ES7G groups Conclusion : LFES during the hindlimb suspension showed a positive effect in VEGF induction and early application is strongly encourage VEGF induction. This indicated that pre-application of LFES could prevent muscle atrophy.
Klotho (KL) is a single transmembrane protein composed of KL1 and KL2 repeats possessing ${\beta}$-glucuronidase activity and maintains calcium homeostasis in physiological state. It has been implicated in pigs that calcium is important for the establishment and maintenance of pregnancy, and our previous study has shown that transient receptor potential vanilloid type 6 (TRPV6), a calcium ion transporter, is predominantly expressed in the uterine endometrium during pregnancy in pigs. However, expression and function of KL in the uterine endometrium has not been determined in pigs. Thus, the present study determined expression and regulation of KL in the uterine endometrium during the estrous cycle and pregnancy in pigs. Real-time RT-PCR analysis showed that levels of KL mRNA decreased between Days 12 to 15 of the estrous cycle, and its expression showed a biphasic manner during pregnancy. KL mRNA was expressed in conceptuses and in chorioallantoic tissues during pregnancy. Explant culture study showed that expression levels of KL were not affected by treatment of steroid hormones or interleukin-1beta during the implantation period. Furthermore, levels of KL mRNA in the uterine endometrium from gilts carrying somatic cell nuclear transfer (SCNT)-derived embryos were significantly lower than those from gilts carrying natural mating-derived embryos on Day 12 of pregnancy. These results exhibited that KL was expressed at the maternal-conceptus interface in a pregnancy status- and stage-specific manner, and its expression was affected by SCNT procedure, suggesting that KL may play an important role in the establishment and maintenance of pregnancy in pigs.
유전자의 재조합 균주의 생산성을 향상시키기 위한 발효시스템 개발을 목적으로 regulated promoter 인 SUC2 gene 갖는 유전자 재조합 S. cerebisiae를 모델로하여 유전자 산물인 Invertase 발현에 미치는 글루코오스 농도의 영향, 발효 중 플라스미드의 불안정성, 생육특성 및 continuous fed batch system을 연구하였다. 유전자 재조합 균주는 biphasic growth 현상을 보였으며 글루코오스 농도가 0.9g/$\ell$에서 2.2g/L로 증가함에 따라 비증식 속도는 0.224 h$^{-1}$에서 0.226 h$^{-1}$로 증가했으며 숙주효모보다 낮은 값을 나타내었다. 유전자 재조합 균주의 invertase 생산은 발효조내의 글루코오스 농도에 크게 영향을 받아 글루코오스 농도가 0.25~0.4g/L로 감소될 때 invertase 생산이 시작되었으며 회분발효중 플라스미드의 분리는 글루코오스 자화기간 동안에 빈번히 일어났으나 에탄을 자화기간에는 완만해지는 경향을 보였다. 또한 통기를 해주지 않고 배지의 용존산소만으로 배양시킨 결과 통기를 한 경우에 비하여 invertase의 비활성과 총활성이 각각 1.5 및 1.3 배 증가되었다. 균체의 증식단계와 유전자의 발현단계로 구분하여 발효시키기 위하여 영양분을 함유한 글루코오스 용액을 48m1/h(0.096g 글루코오스/48L의 유량으로 12시간 연속적으로 공급하여 fed batch 배양한 결과 invertase의 비활성과 총활성이 비통기적 회분배양 보다 각각 1.74, 2.74배 증가되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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