• 제목/요약/키워드: Biological Synthesis

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Biochemical Reactions on a Microfluidic Chip Based on a Precise Fluidic Handling Method at the Nanoliter Scale

  • Lee, Chang-Soo;Lee, Sang-Ho;Kim, Yun-Gon;Choi, Chang-Hyoung;Kim, Yong-Kweon;Kim, Byung-Gee
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제11권2호
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    • pp.146-153
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    • 2006
  • A passive microfluidic delivery system using hydrophobic valving and pneumatic control was devised for microfluidic handling on a chip. The microfluidic metering, cutting, transport, and merging of two liquids on the chip were correctly performed. The error range of the accuracy of microfluid metering was below 4% on a 20 nL scale, which showed that microfluid was easily manipulated with the desired volume on a chip. For a study of the feasibility of biochemical reactions on the chip, a single enzymatic reaction, such as ${\beta}-galactosidase$ reaction, was performed. The detection limit of the substrate, i.e. fluorescein $di-{\beta}-galactopyranoside$ (FDG) of the ${\beta}-galactosidase$ (6.7 fM), was about 76 pM. Additionally, multiple biochemical reactions such as in vitro protein synthesis of enhanced green fluorescence protein (EGFP) were successfully demonstrated at the nanoliter scale, which suggests that our microfluidic chip can be applied not only to miniaturization of various biochemical reactions, but also to development of the microfluidic biochemical reaction system requiring a precise nano-scale control.

척추동물의 난황형성과 환경에스트로젠 (Vitellogenesis in Vertebrates and Environmental Estrogen)

  • 계명찬;한명수
    • 환경생물
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    • 제18권3호
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    • pp.291-298
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    • 2000
  • 난황형성(vitellogenesis)은 난생동물의 번식에서 매우 중요한 과정으로 간에서 난황전구물질(vitellogenin,Vg)의 생성과 단백질 수준에서 Vg의 변형과 난자내 축적 및 난황물질(vitellin)로의 전환을 포함한다. 난황은 경골어류의 배아의 영양물질 및 삼투압 조절을 통한 부유특성의 조절에 관여한다. 척추동물의 Vg유전자는 lipoprotein계열의 유전자로 복수의 Vg유전자가 존재하며 서로 다른 크기의 Vg단백질을 암호화한다. 에스트로젠에 의해 이들 단백질이 발현되는 정도에는 차이가 있다. 난생 척추 동물의 암컷에서 에스트로젠의 조절하에 생성되는 Vg은 천연 에스트로젠 및 합성에스트로젠에 의해 어류, 양서류, 파충류, 조류 등 다양한 척추동물의 수컷 체내에서도 형성되며 수온 및 생식주기에 의존적이다. 따라서 수컷에서 일어나는 난황전구물질의 생성은 환경오염물질 가운데 여성호르몬과 유사한 작용을 하는 물질의 규명과 위해성 여부를 판정할 수 있는 생물학적 지표로서 전세계적으로 이용되고 있다. 국내의 경우 Vg유도여부를 통한 야생생태계에서 환경호르몬 오염과 동물의 번식장애에 대한 연구에 있어서 번식주기, 동물의 지리적 분포와 생물다양성의 차이에 대한 고려가 중요하다.

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대장균에서 isorhamnetin 3-O-glucoside의 생합성 최적화 (Optimization of bioactive isorhamnetin 3-O-glucoside production in Escherichia coli)

  • 김봉규
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제62권4호
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    • pp.361-366
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    • 2019
  • Isorhamnetin 3-O-glucoside는 플라보놀 그룹에 속하는 물질로서 염증이나 궤양에 효과가 있을 뿐만 아니라 신경장해, 신장병증, 망막증과 같은 당뇨합병증을 완화하는 것으로 보고되었다. Isorhamnetin 3-O-glucoside는 Tetraena aegyptia, Salsola oppositifolia, Salicornia herbacea, Sambucus ebulus와 같은 몇몇 식물에서 발견된다. 생물전환은 저렴한 화합물로부터 고부가가치 물질을 생산할 수 있는 유용한 방법이다. 본 연구에서 생물전환을 통해 quercetin으부터 isorhamnetin 3-O-glucoside를 생합성 하기 위해 두 개의 유전자(PGT E82L과, ROMT-9)를 각각의 대장균에 도입하였다. 대장균의 공조배양시스템을 이용하여 isorhamnetin 3-O-glucoside 생산 배양법의 최적화를 위해 생물전환배지, 배양온도, 세포의 혼합비율, 재조합 단백질 유도시간, 기질 공급 농도 등을 테스트하였다. 최적화된 생물전환 조건하에서 생물전환을 실시하였으며, 배양의 12시간 후 181.2 mg/L의 isorhamnetin 3-O-glucoside가 생합성 되었다. 이는 이전의 연구에서 보고된 isorhamnetin 3-O-glucosie (39.6 mg/L)의 생합성보다 4.7배 높았다.

마키베리 추출물의 화장품 신규 원료로서의 가능성 (Potential uses of Aristotelia chilensis extracts as novel cosmetic materials)

  • 김미정;박세연
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제62권4호
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    • pp.339-345
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    • 2019
  • 본 연구는 마키베리 추출물이 화장품의 신규 원료로서 가능성이 있는지를 타진하는 것을 목적으로 진행되었다. 마키베리 조추출물을 클로로포름층과 에틸아세테이트층, 증류수층으로 분리하였다. 먼저, 마키베리 추출물들의 독성 여부를 피부각질세포주인 HaCaT 세포와 색소형성세포주인 B16F10 세포를 통해 확인하였다. 항산화 효과 실험에서 클로로포름층, 에틸아세테이트층 그리고 증류수층 추출물들은 모두 산화적 스트레스를 줄이는 효과를 보였고 그 중에 에틸아세테이트층 추출물은 양성대조군인 글루타치온에 비해서도 우수한 결과를 나타내었다. 마키베리 추출물들은 α-MSH에 의한 멜라닌 합성도 저해하였다. 또한, 마키베리 추출물들은 그람양성균인 황색포도상구균과 표피포도상구균, 그람음성균인 녹농균에 대해서도 항균 효과를 보였다. 특히, 에틸아세테이트층 추출물은 황색포도상구균에 대해서 뛰어난 항균 효과를 보였다. 본 연구를 통해서 마키베리 추출물들이 화장품의 항산화나 미백 기능성 원료로서뿐만 아니라 화장품의 천연방부제 원료로서도 잠재적인 가능성이 있음을 확인할 수 있었다.

생물전환으로 생리활성물질인 trifolin의 생합성 (Biosynthesis of trifolin, a bioactive flavonoid by biotransformation)

  • 노혜령;강주영;김봉규
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • 제64권3호
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    • pp.309-316
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    • 2021
  • Trifolin (kaempferol 3-O-galactoside)는 플라보놀 그룹에 속하는 물질로 아토피, 항균, 폐암에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. Trifolin은 다양한 식물에서 추출하여 사용하고 있지만 추출 과정이 복잡하고, 수율이 낮으며, 추출을 위한 바이오매스를 얻는데 계절적 어려움이 있다. 생물전환은 저렴한 화합물에서 고부가가치 화학물질을 생산할 수 있는 대체 수단으로 이용된다. 본 연구에서는 naringenin으로부터 trifolin을 생합성하기 위해 3개의 유전자(PeFLS 및 OsUGE-PhUGT)를 각각의 대장균에 도입한 BL-FLS균주와 BL-UGTE균주를 이용하여 공조배양시스템을 개발하였다. Naringenin으로부터 trifolin을 생합성하기 위해 세포의 밀도, 생물전환 온도, 재조합 단백질 유도의 적정 IPTG농도 및 시간, 기질 공급 농도 등의 최적화를 실시하였다. 최적화된 공동 배양 발효 시스템을 통해 67.3 mg/L의 trifolin을 성공적으로 생합성 하였다.

생체유리와 천연산호 골이식재가 치주인대 섬유아세포 활성에 미치는 영향 (Biological Effects of bioactive glass and natural coral on periodontal ligament fibroblast-like cell behavior)

  • 심성규;한수부
    • Journal of Periodontal and Implant Science
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    • 제29권1호
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    • pp.173-192
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    • 1999
  • The purpose of this study was to evaluate the effects of bioactive glass and natural coral on the human periodontal ligament fibroblast(HPLF) behaviors during the regeneration process of peridontium. To determine the cellular events occuring in the presence of the particles of bioactive glass and natural coral, HPLF were isolated from healthy premolar teeth extracted for orthodontic treatment. Cells were cultured in ${\alpha}$MEM at 37$^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 95% humidity incubator. Bioactive glass and natural coral were powdered, and each particles(<40${\mu}$m) were placed on the cultured cells at the concentration of 0.3mg/ml, and 1,0mg/ml for experimental group. In control group no particles were added. And each group was evaluated by examining the cell morphology under phase-contrast micrograph at 4 day and transmission electron micrograph(TEM) and scanning electron micrograph(SEM) at 14 day, alkaline phosphatase activity at 5 and 9 day, protain synthesis at 4 day, DNA synthesis at 1, 2, 3 and 4 day, cell proliferation at 1, 3, 5,7 and 9 day and the formation of bone nodule at 30 day after culturing all groups in mineralizing supplemented mediun, No significant changes in cell morphology by adding these two matirials were found under phase contrast microscopy and TEM. HPLF phagocytocized each particles suggesting that HPLF is involved in the process of resorbing each particles and that bioactive glass were more biocompatible than natural coral. The ALPase activity of bioactive glass 0.3 mg/ml was similar with control groups and all the rests of control groups were significantly low(P<0.01) indicating a transient dedifferentiation of HPLF in the presence of bioactive glass and natural coral particles. There were no significant differences of protein synthesis between all groups. The DNA synthesis in experimental groups were significantly lower than control groups at 1, 2 and 3 day (P<0.01) but became similar to control groups at 4 day. Between control groups, the DNA synthesis in bioactive glass O.3mglml group was significantly higher than other groups(P<0.01). Cell proliferation in natural coral 1.0mg/ml and bioactive glass 1.0mglml groups were significantly lower than control group at 3 day(P<0.05) and there were no differences at 5, 7, 9 day. There were more bone nodule formation in experimental groups than in control groups. In conclusion, these results indicated that bioactive glass and natural coral have some effects of a transient dedifferentiation on HPLF and regeneration of periodontal tissues, however any significant cytotoxic effect on HPLF by these two particles were not found.

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Therapeutic Effects of Resiniferatoxin Related with Immunological Responses for Intestinal Inflammation in Trichinellosis

  • Munoz-Carrillo, Jose Luis;Munoz-Lopez, Jose Luis;Munoz-Escobedo, Jose Jesus;Maldonado-Tapia, Claudia;Gutierrez-Coronado, Oscar;Contreras-Cordero, Juan Francisco;Moreno-Garcia, Maria Alejandra
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제55권6호
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    • pp.587-599
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    • 2017
  • The immune response against Trichinella spiralis at the intestinal level depends on the $CD4^+$ T cells, which can both suppress or promote the inflammatory response through the synthesis of diverse cytokines. During the intestinal phase, the immune response is mixed (Th1/Th2) with the initial predominance of the Th1 response and the subsequent domination of Th2 response, which favor the development of intestinal pathology. In this context, the glucocorticoids (GC) are the pharmacotherapy for the intestinal inflammatory response in trichinellosis. However, its therapeutic use is limited, since studies have shown that treatment with GC suppresses the host immune system, favoring T. spiralis infection. In the search for novel pharmacological strategies that inhibit the Th1 immune response (proinflammatory) and assist the host against T. spiralis infection, recent studies showed that resiniferatoxin (RTX) had anti-inflammatory activity, which decreased the serum levels of IL-12, $INF-{\gamma}$, $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$, NO, and $PGE_2$, as well the number of eosinophils in the blood, associated with decreased intestinal pathology and muscle parasite burden. These researches demonstrate that RTX is capable to inhibit the production of Th1 cytokines, contributing to the defense against T. spiralis infection, which places it as a new potential drug modulator of the immune response.

저염 장류에서 증식하는 산막 효모에 길항 작용을 갖는 Bacillus 균주의 분리 (Isolation and Identification of Bacillus Strains with Antagonistic Properties against Film-forming Yeasts Overgrown in Low Salted Soybean Pastes)

  • 전새봄;류명선;김용상;조승화;정도연;엄태붕
    • 미생물학회지
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    • 제49권3호
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    • pp.286-291
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    • 2013
  • 한국인의 저염 섭취 필요성에 부응하기 위해 14% (w/w) 염도의 된장 대신 8% (w/w) 저염 된장을 제조하였다. 숙성 후 8% 저염 된장 시료들은 14% 염 된장과 달리 모두 산막을 형성하였고, 이 산막 형성균들을 동정한 결과 8종 모두 효모인 Pichia kudriavzevii에 속하였다. 장류 고유한 풍미를 유지하기 위해 발효 특성이 우수한 11종의 Bacillus 균들을 전통 장류에서 분리했고, 이들의 생화학적 특성 및 16S rRNA 염기 서열 분석 결과 B. subtilis, B. licheniformis, B. methylotrophicus로 동정되었다. 이 균주들은 8종의 산막 효모에 대해 증식 억제 능력을 보였으며, 항균 계면활성제인 lichenysin 또는 surfactin 유전자들을 함유하고 있었다.

방사선 중합에 의한 설폰화 POF-g-Styrene 이온교환 섬유의 합성 및 암모니아 흡착 (Synthesis of Sulfonated POF-g-Styrene ion Exchange Fibers by Radiation-Induced Polymerization and Properties of Ammonia Adsorption)

  • 조인희;백기완;이창수;노영창;윤수경;황택성
    • 폴리머
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    • 제31권1호
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    • pp.1-7
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    • 2007
  • 본 연구는 $Co^{60}\;{\gamma}-ray$ 선원을 이용한 그래프트 공중합 방법으로 설폰형 이온교환 섬유를 합성하였다. 공중합체 합성 시 스티렌 단량체의 농도가 50 v/v%에서 그래프트율이 가장 높게 나타났으며, 총 조사선량이 증가할수록 그래프트율은 증가하였다. 그래프트율과 반응온도가 증가함에 따라 설폰화율은 증가하였으며, 반응시간 20분에서 가장 높았다. 이온교환 섬유의 이온교환 용량과 함수율은 설폰화율이 증가함에 따라 모두 증가하였으며, 각각 최대 4.76 meq/g, 23.5%이었다. 암모니아 흡착량은 이온교환 용량 및 암모니아 농도가 증가함에 따라 증가하였으며, 10회 이상 반복 사용하여도 암모니아 흡착량은 변하지 않았다.

Synthesis and Characterization of Biodegradable Elastic Hydrogels Based on Poly(ethylene glycol) and Poly(${\varepsilon}-caprolactone$) Blocks

  • Im, Su-Jin;Choi, You-Mee;Subramanyam, Elango;Huh, Kang-Moo;Park, Ki-Nam
    • Macromolecular Research
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    • 제15권4호
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    • pp.363-369
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    • 2007
  • Novel biodegradable elastic hydrogels, based on hydrophilic and hydrophobic polymer blocks, were synthesized via the radical crosslinking reaction of diacrylates of poly(ethylene glycol) (PEG) and poly(${\varepsilon}-caprolactone$) (PCL). PEG and PCL diols were diacrylated with acryloyl chloride in the presence of triethylamine, with the reaction confirmed by FT-IR and $^1H-NMR$ measurements. The diacrylate polymers were used as building-blocks for the syntheses of a series of hydro gels, with different block compositions, by simply varying the feed ratios and molecular weights of the block components. The swelling ratio of the hydrogels was controlled by the balance between the hydrophilic and hydrophobic polymer blocks. Usually, the swelling ratio increases with increasing PEG content and decreasing block length within the network structure. The hydrogels exhibited negative thermo-sensitive swelling behavior due to the coexistence of hydrophilic and hydrophobic polymer components in their network structure, and such thermo-responsive swelling/deswelling behavior could be repeated using a temperature cycle, without any significant change in the swelling ratio. In vitro degradation tests showed that degradation occurred over a 3 to 8 month period. Due to their biodegradability, biocompatibility, elasticity and functionality, these hydrogels could be utilized in various biomedical applications, such as tissue engineering and drug delivery systems.