• 한국식품영양과학회지
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• 제43권11호
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• pp.1791-1795
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• 2014

본 연구에서는 HPLC를 사용하여 채소류 식품군에서 비타민 K1의 분석법을 확립하고 이에 대한 분석법 검증하고자 하였다. 그 결과 본 시험법에서 표준용액의 피크유지시간과 부추 추출액의 피크유지시간이 일치하여 특이성을 확인하였다. 검량선의 상관계수($R^2$)는 0.9994 이상으로 높은 유의수준을 보여 분석에 적합함을 알 수 있었으며, 검출한계는 0.1335 ng/injection volume($50{\mu}L$)이었고 정량한계는 0.2784 ng/injection volume($50{\mu}L$)으로 설정되었다. 일내, 일간분석에서 정밀도를 나타내는 변동계수(coefficient variation, CV)는 표준용액에서 각각 1.979%, 2.107%로 나타내었고 정확성은 99.439%로 나타내어 채소류에서 비타민 K1의 분석법이 적합한 시험법임이 검증되었다. 본 분석법에 따라 채소류의 비타민 K1을 분석한 결과 식품공전의 효소를 이용한 분석법보다 더 높은 추출률을 나타내었으며 다른 물질의 간섭 없이 분석 가능하여 채소류의 비타민 K1의 검출에 응용되어 이용될 수 있을 것으로 판단된다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제54권1호
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• pp.47-50
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• 2011

본 연구에서는 천연 미백소재 탐색을 위하여 쪽(P. tinctoria) 꽃 추출물의 tyrosinase 저해활성을 검증하였으며, 쪽 꽃 추출물은 $70.8{\pm}2.2{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$ 값을 나타내었다. LH-20 chromatography와 HPLC분석을 통해 쪽으로부터 두 개의 활성물질을 정제하였고, 이 물질들의 구조 분석은 LC-MS와 NMR 데이터 해석을 바탕으로 진행하여 두 가지 화합물은 각각 quercetin-3-Orhamnoside (Q3R), myricetin-3-O-rhamnoside (M3R)로 밝혀졌다. Q3R과 M3R은 순서대로 $47.0{\pm}0.1$, $150.5{\pm}1.6{\mu}g/mL$의 $IC_{50}$ 값을 나타내었다. 이로 미루어 보아, 쪽 꽃 추출물과 두 활성물질의 멜라닌 생합성 저해활성을 확인할 수 있었으며, 쪽 꽃추출물의 미백소재로서의 적용 가능성을 확인할 수 있었다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제54권2호
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• pp.94-100
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• 2011

Bacillus licheniformis로 부터 phospholipase D (PLD)로 추정되는 유전자를 PCR 기술을 이용하여 분리하여 pGEM-T easy 운반체에 cloning 하였다. 분리된 유전자는 His6가 붙은 pET-21 운반체를 이용하여 E. coli BL21 (DE3)에서 발현시켰다. 재 조합된 PLD는 nikel-nitrilotriacetic acid (Ni-NTA) resin을 갖는 column을 이용하여 affinity chromatography로 분리하였다. SDS-PAGE 분석 결과 PLD로 추정되는 단백질은 약 44 kDa의 주요 단일밴드를 나타내었다. 분리된 효소의 최적 활성도는 pH 7.0에서 나타났으며 이 조건에서 또한 효소가 제일 안정되었다. 효소활성에 미치는 최적 온도는 $40-45^{\circ}C$의 온도에서 형성되어 비교적 높은 온도를 나타내었으며 비교적 넓은 범위의 온도에서 상당히 높은 효소 활성도를 나타내었다. 여러 가지 detergent 중에서 Triton X-100을 0.6 mM까지 첨가할 경우 PLD의 효소활성도는 점진적으로 증가하여 대조구 대비 최대 181%의 효소 활성도를 나타내었다.

• 대한환경공학회지
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• 제37권7호
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• pp.404-411
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• 2015

생물활성탄(BAC) 공정에서의 공탑 체류시간(EBCT) 및 수온의 변화에 따른 9종의 halonitromethanes (HNMs)류들의 생물분해 특성을 평가하였다. 수온 $10^{\circ}C$와 $25^{\circ}C$에서 EBCT를 5분~15분까지 변화시켜 실험하였다. 생물활성탄 공정에서 HNMs류 9종의 생물분해율은 EBCT와 수온에 따라 큰 영향을 받았으며 EBCT와 수온이 증가할수록 생물분해율이 증가하였으며, HNMs류들의 종류에 따른 생물활성탄 공정에서의 생물분해율은 DBCNM과 TBNM이 가장 높았고, CNM과 DCNM이 가장 낮았다. DBCNM과 TBNM을 제외한 HNMs류 7종에 대해 BAC 공정에서의 생물분해 속도상수($k_{bio}$)는 수온이 $10^{\circ}C$에서 $25^{\circ}C$로 상승하였을 경우, $0.0797{\sim}0.7657min^{-1}$에서 $0.1245{\sim}1.8421min^{-1}$로 증가하여 1.6~2.4배 정도 증가하였다.

• 농약과학회지
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• 제17권2호
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• pp.107-116
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• 2013

액-액 분배법을 이용한 pymetrozine의 잔류분석방법을 다양한 작물에 적용이 가능하도록 작물의 특성과 대상농약의 물리화학적 특성을 고려하여 간섭물질을 최소화한 방법을 확립하였다. 확립된 분석법의 validation을 진행하였으며 정확성 및 정밀성, 검출한계, 정량한계, 직선성(표준물질의 검량선)을 기준으로 진행하였다. 대표 농산물로 쌀, 현미, 감자, 고추, 배추, 브로콜리, 수박, 쑥갓, 블루베리, 사과 및 체리를 선정하였으며, 농산물 시료에 borax 완충용액과 1N-NaOH 수용액을 가하여 pH를 조절하고 methanol로 추출된 pymetrozine 잔류분은 dichloromethane 액-액 분배법과 silica SPE cartridge를 이용한 silica 흡착크로마토그래피법으로 정제하여 분석대상 시료로 하였다. Pymetrozine의 정량적 분석을 위한 최적 HPLC 분석 조건을 확립하였고, $C_8$ 칼럼을 이용한 HPLC 분석 시 불순물의 간섭은 없었으며, 11종의 대표 농산물 중 pymetrozine의 분석정량한계(MQL)는 0.01 mg/kg이었다. 전체 농산물에 대한 회수율은 83.1~98.5%였으며, 농산물 시료 및 처리수준에 관계없이 반복 간 분석오차는 10% 미만을 나타내어 잔류분석 기준이내를 만족하였다. 검출한계, 회수율 및 분석오차 면에서 국제적 분석기준을 충분히 만족하였으므로, 본 연구에서 확립된 분석법은 기존의 hydromatrix 분배법을 대체하여 농산물 중 pymetrozine의 잔류분석법으로 사용이 가능할 것으로 판단된다.

• 대한환경공학회지
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• 제36권12호
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• pp.858-864
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• 2014

생물활성탄(BAC)과 안트라사이트 biofilter에서의 공탑 체류시간(EBCT) 및 수온의 변화에 따른 8종의 합성 향물질류의 생물분해 특성을 평가하였다. 수온 $7^{\circ}C$와 $18^{\circ}C$에서 EBCT를 5분~15분까지 변화시켜 실험하였다. 생물활성탄 공정에서 합성 향물질류 8종의 생물분해율은 EBCT와 수온에 따라 큰 영향을 받았으며 EBCT와 수온이 증가할수록 생물분해율이 증가하였으며, 합성 향물질류의 종류에 따른 생물활성탄 공정에서의 생물분해율은 대환 사향류인 pentalide와 ambrettolide가 가장 높았으며, 다환 사향류인 DPMI와 ADBI가 가장 낮았다. 합성 향물질류 8종에 대한 BAC 공정에서의 생물분해 속도상수($k_{bio}$)는 수온이 $7^{\circ}C$에서 $18^{\circ}C$로 상승하였을 경우, $0.1184{\sim}0.6545min^{-1}$에서 $0.3087{\sim}0.9173min^{-1}$로 증가하여 1.4~2.6배 정도 증가하였다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제24권7호
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• pp.885-890
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• 2017

살모넬라는 주요한 식중독균의 하나로 미생물학적 식품품질을 보증하기 위해 신속 정확하게 현장에서 관리되고 모니터링되어야 한다. 본 연구팀에서는 광학 현미경 기반의 이미징 시스템과 바이오센서가 결합된 모니터링 시스템을 개발하였고, 이를 살모넬라에 적용하기 위해서는 바이오센서에 적용되는 생물학적 수용체의 개발이 절대적으로 필요한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 살모넬라에 반응하는 특이적인 anti-Salmonella 다중클론 항체를 토끼로부터 성공적으로 생산 정제하였으며, 최종 항체의 농도는 2 mg/mL로 결정되었다. 또한, 정제된 anti-Salmonella 다중클론 항체의 역가가 상업용 anti-Salmonella 다중클론 항체보다 전 항체 농도 범위에서 우수함을 알 수 있었다. 정제된 항체 특이성 검토를 위해, 정제된 anti-Salmonella 다중클론 항체를 20 종의 살모넬라 serotypes과 20 종의 non-Salmonella strains과 반응시킨 결과, 20 종의 non-Salmonella strains과는 특이성을 보여주지 않은 반면 19 종의 살모넬라 serotypes와 유의적으로 높은 반응성으로 보여 주었다. 최종적으로, anti-Salmonella 다중클론 항체가 고정화된 골드센서를 살모넬라 현탁액에 노출시켰을 때, 수 백여 개의 살모넬라가 센서 표면에 capture되어 있음을 확인할 수 있었다. 따라서, 본 연구를 통해 생산 정제된 anti-Salmonella 다중클론 항체는 새로운 생물학적 수용체로서 충분한 역가와 특이성 그리고 센서에 적용 시 살모넬라와의 높은 결합력을 보여주었으므로 광학현미경 기반 이미징 시스템을 활용한 바이오센서 모니터링 시스템에 새로운 생물학적 수용체로 적용될 수 있으리라 판단된다.

• 분석과학
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• 제20권2호
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• pp.138-146
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• 2007

본 연구에서는 비글견 혈장 중의 파록세틴을 액체상추출법(LLE)으로 전처리하고 액체크로마토그래피-탠덤질량분석기(LC-MS/MS)로 신속하게 분석하는 방법을 개발하였다. 파록세틴과 내부표준물질로 사용한 플루오세틴을 TBME(tert-butyl methyl ether)로 추출하고 상층액을 취하여 건조시킨 후, 이동상 $100{\mu}L$로 재분산하여 LC-MS/MS에 주입하였다. HPLC 분석조건으로 Capcell Pak UG120($2.0{\times}150mm$, $5{\mu}m$) 컬럼을 사용하였으며, 이동상은 50% 아세토니트릴(pH 3, formic acid로 조정) 용액을 사용하였고, 유량은 0.2 mL/min으로 하였다. MS/MS의 SRM(selective reaction monitoring) 방법으로 파록세틴과 플루오세틴의 선구 이온, 생성 이온을 각각 m/z $330{\rightarrow}192$, m/z $310{\rightarrow}148$로 분석한 결과 0.02~5 ng/mL의 농도범위에서 상관계수($R^2$) 0.9993으로 좋은 직선성을 나타내었다. 또한 정량한계는 0.02 ng/mL이며, 정밀성은 일내 및 일간 변동계수가 7.67% 이하이고, 정확도는 92.96~102.99%로 비글견 혈장 중의 파록세틴의 약물동력학 연구에 이용될 수 있는 충분한 감도와 특이성, 직선성, 정밀성 및 정확성을 갖고 있음을 확인하였다.

• Toxicological Research
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• 제32권3호
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• pp.215-223
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• 2016

This study is to investigate the biological, biochemical and cytotoxic effects of puffer fish (Arothron stellatus) toxin extracts under in-vitro condition. Extracted toxins from various organs of puffer fish were purified by using active charcoal column, and Bio-gel-P2 column chromatography. The lethality of toxin was tested in crabs, which consists of neurotoxic compounds. The degree of the brine shrimp lethality assay was found directly proportional to the concentration of the toxin extracts, which was well supported by hemolytic assay. The experimental results suggested that the gonad was found higher toxins than the liver and muscles. The mortality rate of brine shrimp nauplii was increased with the raise of concentrations of toxin level. Among the different doses and time dependent cytotoxic effect of human cervical carcinoma (HeLa) cells were showed $4.0{\mu}g/mL$ of toxin, which was effectively inhibited cancer cell proliferation. HPLC and TLC analysis was revealed that the A. stellatus toxin contains tetrodotoxin (TTX), related compounds 4-epi TTX and anhydro-TTX. The present results suggested that the A. stellatus contain TTX as a major and anh-TTX as a minor toxin. It could be the potential candidate in the field of anticancer drug discovery against human cervical cancer cells. The present data is confirming that the puffer fish toxin as an interesting source of novel bioactive natural compounds with potent applications in pharmacology.

• Advances in Traditional Medicine
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• 제10권1호
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• pp.21-28
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• 2010

The objective of the present investigation is to evaluate the antimicrobial potency of the terpenoid fractions isolated from Luffa cylindrica seeds against various pathogenic microbes. The seeds were powdered and extracted with methanol in soxhlet appratus based on phytochemical screening. Three terpenoid components were isolated by column chromatography and identified by thin layer chromatography and chemical analysis which were designated as ${LCSF_4}^*$, ${LCSF_6}^*$ & ${LCSF_8}^*$ respectively. Disc diffusion method was employed to determine the antimicrobial effectiveness of test compounds I, II and III $({LCSF_4}^*,\;{LCSF_6}^*\;&\;{LCSF_8}^*)$ against 6 microbial species viz., Staphylococcus (S.) aureus, Bacillus (B.) subtilis, Escherichia (E.) coli, Pseudomonas (P.) aeruginosa, Candida (C.) albicans and Aspergillus niger. The disc was saturated with $100{\mu}l$ of each compound, allowed to dry and introduced on the upper layer of seeded agar plate. The plates were incubated overnight at $37^{\circ}C$. Microbial growth was determined by measuring the zonal inhibition diameters. Compound I showed maximum potency against gram positive S. aureus (21 mm) in comparison with standard ciprofloxacin (38 mm), whereas the same compound was completely devoid of activity against both the fungi tested. Compound II was found to be highly sensitive against both the gram negative E. coli (20 mm) and P. aeruginosa (22 mm). Compound II was found to exhibit maximum potency against the fungi C. albicans (15 mm) and A. niger (20 mm). Compound III was found to be very effective against both the gram positive S. aureus (20 mm) and B. subtilis (15 mm) respectively.