The objectives of this study were to investigate the effect of fermentation medium on the hydroxyl radical scavenging activity of exopolysaccharides from Inonotus obliquus by response surface methodology (RSM). A two-level fractional factorial design was used to evaluate the effect of different components of the medium. Corn flour, peptone, and $KH_2PO_4$ were important factors significantly affecting hydroxyl radical scavenging activity. These selected variables were subsequently optimized using path of steepest ascent (descent), a central composite design, and response surface analysis. The optimal medium composition was (% w/v): corn flour 5.30, peptone 0.32, $KH_2PO_4$ 0.26, $MgSO_4$ 0.02, and $CaCl_2$ 0.01. Under the optimal condition, the hydroxyl radical scavenging rate (49.4%) was much higher than that using either basal fermentation medium (10.2%) and single variable optimization of fermentation medium (35.5%). The main monosaccharides components of the RSM optimized polysaccharides are rhamnose, arabinose, xylose, mannose, glucose, and galactose with molar proportion at 1.45%, 3.63%, 2.17%, 15.94%, 50.00%, and 26.81%.
천궁 (Cnidium officinale)의 잎, 엽병 및 화기 외식편을 재료로 하여 2,4-D가 첨가된 배지에 배양하였을때 캘러스 형성은 어느 외식편에서나 비슷한 수준으로 유기되었지만 배형성능 캘러스는 화기유래 캘러스에서만 형성되었다. 체세포배발생의 유도는 2mg/L 2,4-D를 첨가한 MS배지에서 잘 일어났으며 2,4-D제거배지에서 계대배양하면 외식편당 78개의 체세포배가 형성되었다. 체세포배의 자엽수에 있어서 변이가 빈번하게 관찰되었으나 배지에 1% 활성탄을 첨가하면 비정상적인 자엽수를 갖는 체세포배의 발생률이 감소되는 효과를 얻을 수 있었다. 자엽기 체세포배는 MS 기본배지에서 저조한 발아율을 보이는 반면에 활성탄 첨가배지에서는 현저한 발아 향상을 보였다.
Kim Young-Sook;Choi Chang-Hak;Kim Hyun-Soon;Ko Jeong-Ae
Plant Resources
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제8권2호
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pp.81-86
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2005
An efficient plant regeneration system of Gentiana scabra through somatic embryogenesis was established. Leaves and roots of seedlings of Gentiana scabra excised after germination were cultured on MS basal medium with 2,4-D, NAA or BA. Embryogenic callus was obtained on MS medium with 0.5 mg/L 2,4-D alone or 0.1 mg/L 2,4-D combimation with 1.0 mg/L BA after 45 days of culture. These embryogenic calli gave rise to somatic embryos, which subsequently developed into plantlets on MS medium without PGRs. Also, shoots were effectively differentiated from embryogenic callus when root segments were cultured on MS medium supplement with 0.1 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L BA. Shoots were effectively rooted on MS medium without PGRs. In vitro flowers were formed from plantlets cultured on MS medium with $5\%$ sucrose after 60 days of culture.
Shoot proliferation was obtained from shoot tips and nodal explants of Vitex negundo L. on MS medium supplemented with either BAP or KIN (0.1-2.0 mg/L) alone or in combination with NAA (0.1 mg/L). The concentrations of cytokinins combined with NAA produced multiple shoots from shoot tips and nodal explants. The highest mean percentage (84.3$\pm$8.0) of shoot multiplication's were observed on nodal explants in the presence of BAP (1.5 mg/L) and NAA (0.1 mg/L) followed by shoot tips (65.0$\pm$5.0). The regenerated shootlets were rooted on MS basal medium IAA, IBA, NAA (0.1-1.5 mg/L). The maximum number of roots (51.0$\pm$2.6) was achieved on the medium containing IBA (1.0 mg/L) followed by other auxins (NAA, IAA). The regenerated plants were successfully transferred to a mixture of vermiculate and soil. About 95% of the plantlets survived when transferred to the field.
Mature seeds of Artemisia annua L. were placed onto Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with $4.52\;{\mu}M$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). After 6 weeks of culture, off-white, compact calluses were formed on the plumule of seedlings at a frequency of 5.9%. Calluses were subcultured on the same medium. After an additional 2 weeks of subculture, calluses produced a few somatic embryos at a frequency of 28.8%. Upon transfer to MS basal medium, calluses producing a few somatic embryos gave rise to numerous somatic embryos, which subsequently developed into plantlets. Plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to maturity in a greenhouse.
The influence of feedstock amino acids, salt, carbon and nitrogen sources on glutathione production by Saccharomyces cerevisiae FF -8 was investigated. Glucose, yeast extract, KH$_2$PO$_4$, and L-cysteine were found to be suitable feedstock. Highest glutathione production was obtained after cultivation with shaking for 72 h in a medium containing glucose 3.0% (w/v), yeast extract 3.0%, KH$_2$PO$_4$ 0.06% and L-cysteine 0.06%. The glutathione concentration achieved using this medium increased 2.27-fold to 204 mg/l compared to YM basal medium.
Efficient plant regeneration has been achieved via organogenesis in the red pepper plant (Capsicum annum L.). Shoots were induced from seed explants of cultivar 'Friendship' on Murashige and Skoog's (MS) basal medium supplemetned with; NAA or IAA, and BAP or zeatin. Seed explants on the medium supplemented with 0.1-0.3 mg/L IAA and 2-5 mg/L zeatin for 2 weeks vigorously formed normal shoots in more than 90% of the explants. When these were transferred to MS medium containing 0.5-1.0 mg/L GA, 90-100% of the shoots have elongated within 1-2 weeks. The elongated shoots rooted in media supplemented with 0.3 mg/L NAA. It was revealed that this method is very rapid and efficient regeneration system for red pepper and regenerated plants can be obtained after only 5-6 weeks of culture.
Plant regeneration depending on explant type was inves-tigated with cotyledon, hypocotyl, and leaf explants of garland chrysanthemum (Chrysanthemum coronarium L.) cultured on MS basal medium supplemented with various concentrations of SAP and NAA combination. Among the three different types of explants, hypocotyl explants grown on MS medium containing $1.0{\mu}M\;NAA,\;1.0{\mu}M\;BA\;and\;6{\mu}M\;AgNO_3$ produced the highest adventitious shoots (4.67 per explant). Hypocotyl explants not only produced more vigorous shoots, which regenerated aster than the cotyledon and leaf explants. An efficient root formation was observed in MS medium containing $3\%$sucrose. The concentration of NAA did not show significant effects on root formation. Results from this experiment suggested that hypocotyl explants were efficient for the regeneration of garland chrysanthemum.
Twenty two rhizobacteria were isolated from the roots and rhizosphere of radish, carnation, potato and tomato. There isolates produced a fluorescent pigment in King's B medium and identified as Pseudomonas spp. These isolates colonized roots and rhizosphere of the host plants. In the study of cultural characteristics of the bacteria, the pH of the culture broth was changed from neutral (7.0) to alkali (8.8∼9.41) and the numbers of cells were increased from 106 to 108 after 40 hr of incubation in basal standard succinate medium. The salicylic acid production identified by pink color reaction were observed in 7 bacteria. Out of these 7 salicylic acid producing bacteria, only 2 strains of bacteria such as Pseudomonas fluorescens RS006, and Pseudomonas sp. EN401 were confirmed as salicylic acid producers by optical density measurement. Therefore, for screening of salicylic acid producing bacteria from the roots and rhizosphere, color reaction of the culture medium should be done in the first step, and then optical density measurement of culture extract should be made for the confirmation of salicylic acid production.
To elucidate the effect of sucrose on cell growth and anthocyanin production, 1, 3, 5, and 7% sucrose were applied to liquid MS basal medium supplemented with 0.5 mg/L BA + 0.1 and 1 mg/L 2,4-D. Higher sucrose concentration decreased the cell growth regardless of the hormonal composition. Cain in fresh weight was gradual, showing the peak at day 12 in culture, and then decreased. Anthocyanin content increased with sucrose concentration in the medium, and practically there was no difference in anthocyanin content between the two media differing in 2,4-D content. Sucrose concentration for appropriate anthocyanin production was 7%, while 5% was more suitable for increase in total anthocyanin content. At higher sucrose levels, anthocyanin content was high due to the cessation of the cell growth. Medium pH decreased at the early stage and gradually increased thereafter.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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