In order to investigate the effect of chlorine disinfectant against white spot baculovirus (WSBV), 5, 10, or 30 ppm of sodium hypochlorite (NaOCl) was treated to the WSBV-infected shrimp, Penaeus chinensis. In contrast with the non-treated control, no shrimp was dead after of sodium hypochlorite treatment. This result indicated that WSBV was inactivated by chlorine treatment. No inactivation of WSBV was observed by 10, 20, 30 ppm of povidon-iodine treatment. WSBV was also inactivated by 2, 4 hr sunlight exposure and by 1, 2, 3 hr drying. WSBV was inactivated very effectively by addition of fresh water on sea water.
Baculovirus(WSBV) was isolated from infected Penaeide was collected from shrimp farm at southern sea of Korea from 1993 to 1995. The Infectious virus was purified and used for diagnosis of infected shrimp. Anti-viral serum were used for immunological detection as enzyme linked immunoabsorbent assay(ELISA) and indirect fluorescent antibody technique(IFAT). In IFAT, stomach, lymphoid organ and antenae gland of infected shrimp showed fluorescent reaction. In ELISA, tissues of spontaneously infected shrimp appeared higher O.D. values than in artificial infected shrimp. Primer set was constructed from sequence of 420bp of cloned Baculovirus(WSBV) genome. Specific band for infected shrimp was detected in Polymerase chain reaction(PCR)
Infection rates with white spot baculovirus(WSBV) in wild-caught shrimp spawners appeared to be 52% in Penaeus chinensis and 20% in Penaeus japonicus when diagnosed by polymerase chain reaction (PCR). Infection rates of WSBV from inhabitant organisms in shrimp farm showed 37% in Upogebia major and 29% in Calliamassa japonica. The viruses maintained their survivorship in seawater at $4^{\circ}C$, but lost it at $25^{\circ}C$.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2001.05a
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pp.519-520
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2001
1993년 초여름부터 발생한 양식대하의 WSBV에 의한 대량 폐사가 1996년에는 폐사율이 거의 75%에 이를 정도로 피해가 많이 발생하였다(허 등, 1998). WSBV에 감염된 새우는 두흉갑과 체표에 흰반점 증상이 나타나므로 병명을 일반적으로 White spot syndrome disease(WSSD)라고 하고 원인 바이러스를 WSBV라 일반적으로 명명하고 있고 이와 같은 증상으로 인한 새우의 대량 폐사는 아시아 전역에서 일어나고 있다(Chou 등, 1995; Inouye 등, 1996). (중략)
The pathogenicity of the extracted WSBV from the hepatopancreas, the lymphoid organ, the stomach and the heart of infected shrimps was examined after artificial infection in shrimps(Penaeus chinensis). In terms of the infection route, the strength of the pathogenicity of WSBV was in the order of intramuscular, oral and dipping method. The influence of rearing water temperature on the pathogenicity of WSBV was the strongest in the order of $30^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, $20^{\circ}C$, and $15^{\circ}C$. The isolated WSBV from the diseased shrimps showed very high pathogenicity regardless of their sizes, even though there was difference in time to reach 100% mortality. Degenerated cells characterized by hypertrophied nuclei were found in various tissues such as the lymphoid organ, the hematopoietic tissue and the epidermis in the stomach.
For the production of healthy shrimp(Penaeus chinensis, Penaeus japonicus) seedlings free from the white spot baculovirus(WSBV), we tried to disinfect shrimp eggs with iodine. A relative hatching rate of over 50% has resulted from the treatments of fertilized eggs of fresh shrimps(P. chinensis) with an effective povidon-iodine concentration of 20-200 ppm for 30 seconds and 60 seconds, respectively. The 60 sec treatment group with a 20 ppm effective povidon-iodine concentration showed nearly a 50% relative hatching rate. The over 50 ppm treatment group, however, did not result in hatching show a relative hatching rate. These hatching rates were similar to those in the fertilized eggs of kuruma prawns treated with povidon-iodine solutions. In case of washing fertilized eggs with UV-irradiated seawater 33.3% relative hatching rate in fresh shrimps was much lower than 55.2% in kuruma shrimps. Treatment fertilized eggs of 2 species of shrimp with 200 ppm iodine for 30 sec did not affect the survival rate of the larvae until the early stage of the post larvae even though the hatching rates were low. In order to produce healthy shrimp seedlings non-infected by WSBV, the shrimp eggs should be washed with UV-irradated seawater and sterilized with a low povidon-iodine concentration for a short time.
Kim, Chong-Kyung;Sohn, Sang-Gyu;Heo, Moon-Soo;Lee, Tae-Ho;Jun, Hong-Ki;Jang, Kyung-Lib
Journal of fish pathology
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v.10
no.2
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pp.87-95
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1997
Baculovirus associated with white spot syndrome (WSBV) is the causative agent of a disease with high mortalities and causes severe damage to shrimp cultures. In this study, we analyzed a recombinant clone (E3) obtained from a viral genomic library to characterize the causative agent in diseased shrimp Penaeus chinensis with white spot syndrome. According to the analysis of nucleotide sequence of E3, this clone did not showed considerable sequence homology with those of other known viruses, including baculovirus Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (AcNPV), indicating that WSBV is a novel virus causing a serious disease in P. chinensis. Based on the sequence of E3 clone, a pair of PCR primers was designed. After 30 cycles of amplification, a specific product of the expected size was detected only if the total nucleic acids extracted from the diseased shrimp was used as a template DNA, suggesting that this method can be used to diagnose the virus infection in diseased shrimp.
The virions of causative virus for white spot syndrome in cultured Fresh shrimp, Penaeus chinensis were rod-shaped, double envelope. An average size of the virion was 70 nm in diameter and $250\~300$ nm in length. Histopathological test of affected stomach, heart, and lymphoid organ revealed nuclear hypertrophy. Infectivity trials carried out by injection and feeding with purified virus revealed high cumulative mortality to healthy shrimp. The twenty one different protein species were detected in the analysis of virion. The length of total DNA from the purified virus particles were detected as a single band, double-stranded DNA molecule of approximately 114 kb.
Since 1993, sudden and massive death has occurred among penaeid shrimp, Penaeus orientalis cultured in Korea. We investigated the pathological characterizations on the spontaneously and experimentally infected penaeid shrimp. The major gross findings of the spontaneous cases were 2-6mm sized-white spots on the inside of the carapace and reddish discolorization. Histopathologically, massive necrosis of lymphoid organ, degeneration and necrosis of epithelia of epidermis and foregut were observed in both spontaneous and experimental cases. Amphophilic to basophilic intranuclear inclusion bodies were readly observed epithelia of epidermis, foregut and gills. Electron microscopy revealed enveloped, non-occuluded ellipsoid to rod shaped virus particles, within the nucleus, in the lymphoid organs and interstitial cells of hepatopancreas of both spontaneously and experimentally infected shrimps. The size of the virion was $375{\times}167nm$, and the nucleocapsid was $290{\times}75nm$. The causative agent causing massive death in penaeid shrimps in Korea resembles baculovirus associated with white spot syndrome (WSBV) occurred in Taiwan in virus morphology and gross and histological changes of the shrimps.
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