• 한국식품영양과학회지
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• 제33권3호
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• pp.560-565
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• 2004

배추김치로부터 식품유해균인 Listeria monocytogenes를 저해하는 박테리오신을 생산하는 유산균, Lactobacillus sakei P3-1이 분리되었다. 형태학적, 생화학적 특성조사와 최종적으로 PCR로 증폭하여 얻은 16S rDNA 염기서열 결정을 통해서 L. sakei로 동정되었다. L. sakei P3-1이 분비하는 박테리오신은 여러 그람 양성 및 음성균들 중에서 단지 L. monocytogenes만을 저해하는 그래서 저해범위가 매우 좁은 박테리오신으로 확인되었다. 이온교환 크로마토그래피에 의해서 박테리오신은 부분 정제되었으며 박테리오신의 열처리 안정성을 조사한 결과 121$^{\circ}C$에서 15분간 그리고10$0^{\circ}C$에서 10분간 열처리 후에도 각각 12.5%와 50%의 역가가 잔존하여 상당한 열안정성을 지니고 있음을 알 수 있었다. MRS배지에서 배양중 배양온도가 박테리오신 역가에 미치는 영향을 조사한 결과 3$0^{\circ}C$에서 배양할 때 그리고 18시간 이상 배양에서 가장 높은 1,000 AU/mL 역가를 보였다. 한편 SDS-PAGE 및 activity staining에 의해 측정된 박테리오신의 분자량은 4,000이었다. L. monocytogenes 생육 억제능, 작은 분자량 및 높은 열안정성 등의 성질들을 종합적으로 고려할 때 L. sakei P3-1이 생산하는 박테리오신은 박테리오신들 중에서 class II-a에 속하는 것으로 추정된다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 춘계학술발표대회
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• pp.558-561
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• 2000

Strain JW3 was isolated from commercial Swiss cheese products and identified as a bacteriocin producer. Lactococcus lactis JW3 showed a broad spectrum of activity against most of the non-pathogenic and pathogenic microorganisms tested by the modified deferred method. Lacticin JW3 also showed a relatively broad spectrum of activity against non-pathogenic and pathogenic microorganisms as assessed using the spot-on-lawn method. It demonstrated a typical bactericidal mode of inhibition against Leuconostoc mesenteroides KCCM 11324.

• Journal of Microbiology
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• 제39권3호
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• pp.177-180
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• 2001

Glycinecin A, a bacteriocin produced by Xanthomonas campestris pv. glycines, inhibits the growth of X. c. pv. vesicatoria. We have reported that purified glycinecin A is composed of two polypeptides, is active over a wide range of pH (6 to 9), and is stable at temperatures up to 60$\^{C}$. Glycinecin A is a heterodimer consisting of 39- and 14-kDa subunits; the two encoding genes, glyA and glyB, respectively, have been cloned (Heu et al. 2001. Appl. Environ. Microbiol. 67, 4105-4110). Co-expression of glyA and glyB in the same cell is essential for bacteriocin activity. We constructed and produced a chimeric glycinecin A connecting glyA and glyB in one open reading frame. The chimeric glycinecin A has the same bactericidal activity as the wild-type glycinecin A. However, the chimeric glycinecin A is more stable in a wider range of pH and temperature.

• 한국식품영양과학회지
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• 제26권6호
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• pp.1237-1245
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• 1997

Interspecific fusants were made from the cells of two strains of Lactobacillus genus, a streptomycin resistant Lactobacillus sp. JC-7 and a kanamycin resistant L. acidophilus 88. The morphological and physiological properties of the fusants were examined by determining bacteriocin productivity, acid-producing activity, ability of carbohydrates utilization and three important enzyme activities. The fusants produced a bacteriocin against indicator strains and fusant No. 1, 4 exhibited a larger inhibition zone compared to that of L. acidophilus 88. $\beta$-Galactosidase, phospho-$\beta$-galactosidase, lipase activities and resistance to NaCl of Lactobacillus sp. JC-7 were better than those of L. acidophilus 88. Fusant No. 3 and 7 exhibited excellent lipase activities. Protease activity and acid productivity of L. acidophilus 88 were better than those of Lactobacillus sp. JC-7. Proteasse activities of all fusants were higher than those of parental strains, and expecially fusant No. 5 and 7 exhibited excellent proteolysis ability.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제17권5호
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• pp.774-783
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• 2007

In the present study, acidocin 1B, a bacteriocin produced by Lactobacillus acidophilus GP 1B, exhibited profound inhibitory activity against a variety of LAB and pathogens, including Gram-negative bacteria, and its mode of action was to destabilize the cell wall, thereby resulting in bactericidal lysis. Acidocin 1B was found to be heat stable, because it lost no activity when it was heated up to $95^{\circ}C$ for 60 min. It retained approximately 67% of the initial activity after storage for 30 days at $4^{\circ}C$, and 50% of its initial activity after 30 days at $25^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$. The molecular mass of acidocin 1B was estimated to be 4,214.65 Da by mass spectrometry. Plasmid curing results indicated that a plasmid, designated as pLA1B, seemed to be responsible for both acidocin 1B production and host immunity, and that the pLA1B could be transformed into competent cells of L. acidophilus ATCC 43121 by electroporation. Our findings indicate that the acidocin 1B and its producer strain may have potential value as a biopreservative in food systems.

• 미생물학회지
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• 제47권1호
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• pp.74-80
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• 2011

Bacillus cereus에 항균활성을 갖는 박테리오신을 생산하는 유산균을 김치로부터 분리하였다. 선별한 균주는 Bergey's manual, 16S rDNA 분석을 통하여 Lactococcus lactis로 동정되었으며, L. lactis ET45로 명명하였다. ET45가 생산하는 박테리오신은 pH 3.0-11.0까지 안정하였고, 열 안정성 테스트결과 $40-121^{\circ}C$까지 안정함을 확인하였다. 박테리오신의 생산을 위한 최적 조건으로 MRS 액체배지에서 초기 pH 7.5, $30^{\circ}C$에서 18시간 배양하였을 때 최대생산을 보였다. 박테리오신의 항균활성이 proteinase K의 처리로 활성이 소실되어, 박테리오신이 단백질성 물질임을 확인하였다. 박테리오신의 분자량은 tricine sodium dodecyl sulfate polyacryamide gel electrophoresis (TSDS-PAGE)를 통하여 약 4.5 kDa임을 확인하였다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제1권2호
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• pp.269-277
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• 1996

Bacteriocins are proteins produced by a heterogeneous group of bacteria that have a bactericidal effect on closely related organisms. Recently, bacteriocins from lactic acid bacteria and other food-related organisms have been the subject of much research because of their potential as food biopreservatives. Various modifications of agar plate diffusion assays are the most widely used methods even though the limitations of such assays are generally recognized. The ability to obtain a concentrated crude preparation on bacteriocin by optimizing production parameters greatly simplifies recovery of bacteriocin on subsequent purification steps. Some studies performed to optimize bacteriocins have been purified to homogeneity, and the amino acid sequences of many of these purified bacteriocins have been determined. Obtaining characterization data on purified bacteriocin will minimize the risk of overlapping of research and confusion on identification of these compounds. Several me-chanisms leading to cell death have been hypothesized. These include depletion of the proton motive force(PMF) across the cell membrane: RNase and/or DNase activity within the sensitive cell; and pore formation and lysis of sensitive cells at the cell membrane.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제35권4호
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• pp.339-346
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• 2007

메주로부터 항곰팡이 활성을 보이는 균주 1종과 이에 감수성을 나타내는 곰팡이 3종을 분리하였다. 분리된 균주는 형태학적, 생화학적 특성 조사와 16S rRNA 염기서열 결정을 통한 균주 동정결과 Bacillus subtilis MJP1으로 명명하였고, 3종의 곰팡이는 ITS-5.85 rRNA염기서열 분석을 통하여 Aspergillus petrakii PF-1, A. ochraceus PF-2, 그리고 A. nidulans PF-3로 명명하였다 B. subtilis MJP1은 곰팡이 에 대한 강한 저해활성 뿐만 아니라 Candida 속 효모들과 그람 양성균에 대한 넓은 범위의 저해활성을 나타내었다. B. subtilis MJP1의 생육에 따른 항균 활성을 측정한 결과 항진균 활성은 배양 16시간부터 최대 활성(3,200 AU/ml)을 나타내어 균이 사멸기에 접어든 후에도 활성을 그대로 유지한 반면, 항세균 활성은 대수기 중반인 12시간부터 25시간까지 가장 높은 활성 (1,600 AU/ml)을 보이다가 72시간 이후에는 활성을 상실하였다. pH 안정성 실험에서 항진균 활성과 항세균 활성 모두 pH $6{\sim}10$ 구간에서 비교적 안정한 결과를 보였으나, 열처리 실험에서 항진균 활성은 영향을 받지 않은 반면, 항세균 활성은 $30^{\circ}C$ 이상의 온도에서는 불안정한 결과를 보였다. 각종 효소에 대한 안정성 실험에서 항진균 활성은 어떠한 효소에도 영향을 받지 않았으나, 항세균 활성은 단백분해효소 처리 후에 활성이 실활 됨으로써 항균 물질이 단백질성 물질임을 추정하였다. $C_{18}$ Sep-Pak column으로 부분 정제한 항균 물질이 항진균 활성과 항세균 활성을 나타내므로 소수성을 가지는 물질임을 알 수 있으며, Tricine-SDS-PAGE및 direct detection을 통하여 항진균 물질의 분자량은 약 2.4 kDa 정도이며, 항세균 물질의 분자량은 약 4.5 kDa으로_ 확인되었다. 따라서 B. subtilis MJP1은 항진균 활성과 항세균 활성을 가진 bacteriocin-like substances를 생산함을 알 수 있고 이와 같은 새로운 항미생물 물질은 천연 식품보존제 및 사료보존제 뿐만 아니라 항생제 대체 의약품으로도 활용이 기대되며, 이를 위하여 향후 이 물질들의 보다 정확한 구조 및 특성 규명 등의 연구가 필요하다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권3호
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• pp.221-227
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• 2006

박테리오신 BSCX1은 Bacillus subtilis cx1에 의해 생산되는 항균성 peptide이다. B. subtilis cx1의 박테리오신(BSCX1)은 Bacilius subtilis ATCC6633, Listeria monocytogenes KCTC3569를 포함한 그람양성균과 Salmonella typhi ATCC19430, Escherichia coli ATCC25922와 같은 그람음성균에 대해서도 비교적 넓은 항균활성 범위를 가진다. 박테리오신 생산균주인 B. subtilis cx1과 그것의 감수성 균주인 B. subtilis ATCC6633을 공동 배양한 결과, 박테리오신 BSCX1의 생산이 증가됨을 확인할 수 있다. 이 결과는 박테리오신 생산균주 B. subtilis cx1의 성장 배지내에 박테리오신 감수성 균주가 존재함이 BSCX1 생산을 촉진시키는 것을 의미한다. 감수성 균주의 박테리오신 유도 작용을 확인하였으므로 유도물질이 감수성 균주의 어느 위치에 존재하는지 밝히기 위해 B. subtilis ATCC6633을 분획하여 실험한 결과 세포내 분획과 세포파쇄물에 모두 유도물질이 존재함을 확인하였다. BSCX1 유도물질의 유도활성은 pH 2.5에서 pH 9.5에 걸쳐 전 구간에서 유지되었으며, $50^{\circ}C$이상에서는 3시간 이내에 불활성화 되었다. 유도물질에 단백분해효소인 proteinase K를 처리한 결과 유도활성이 사라져 단백질성 물질임을 알 수 있었다.

• 생명과학회지
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• 제14권4호
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• pp.683-688
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• 2004

API test를 통해서 김치에서 분리한 유산균이 Lactococcus lactis subsp. lactis의 한 종임 을 확인하고 Lactococcus lactis subsp. lactis YH-10이라 명명하고, 생산된 박테리오신을 lacticin YH-10으로 명명하였다. Lactococcus lactis subsp. lactis YH-10을 $25^{\circ}C$, 3$0^{\circ}C$와 37$^{\circ}C$에서 배양한 결과 $25^{\circ}C$에서 박테리오신을 생성하였다. Lacticin YH-10은 여러 가지 단백질 분해효소에 의해 항균활성을 소실하였으므로, 단백질로된 박테리오신임을 확인하였다. 또한 $\alpha$-amylase, $\beta$-amylase, glucoamylase의 처리에도 활성을 일부 소실하였으므로 박테리오신의 분류 중 classIV에 속함을 알 수 있었다 Ammonium sulfate정제한 후 SDS-PAGE를 통해 박테리오신의 분자량이 대략 14kDa임이 확인되었다. Lacticin YH-10은 단백질계 물질로서 인체 내에서 분해가 가능하기 때문에 일반 화학 보존제 보다 인체에 안정함을 알 수 있다. Lacticin YH-10은 낮은 pH와 높은 온도에서 항균활성을 가지고 있기 때문에 식품보존제로서 이용할 수 있다.