To understand the ecological function of heterotrophic bacterial community in water column of large freshwater lakes in the permafrost zone, we investigated the structure and function of bacterial community in Lake Khuvsgul, Mongolia. Species composition of overall bacterial community was analyzed by denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) of 16S rRNA gene fragments, and bacteria that can be cultured at 10oC were isolated and characterized. Based on the depth profile of environmental parameters, thermocline and chemocline were recognized at the 5~10 m zone of the water column. The stratified DGGE profile indicated that the discontinuity of water properties might influence the structure of bacterial community: band profiles in the 0~5 m zone were diverse with large change by depth, but the profile was relatively stable at the $\geq$10 m zone, with predominance of the band identified as Acidovorax facilis. Bacterial cultures were screened for protease, cellulase, amylase and lipase activity, and 23 isolates were selected for high activity of the hydrolytic enzymes. The isolates were identified based on their 16S rRNA gene sequences. In the surface water (zero meter depth), Acidovorax defluvii and Sphingobacterium faecium with high cellulase activity were present. Flavobacterium succinicans, Mycoplana bullata and A. facilis were stably predominant isolates at 2 m, 5 m, and $\geq$10 m depths, respectively. F. succinicans isolates showed high protease activity while M. bullata isolates showed moderate levels of protease and celluase activity. A. facilis isolates showed either cellulase or lipase activity, exclusively to each other. According to the profile of growth rates of the isolates in the temperature range of $0\sim42^{\circ}C$, the surface-zone (0~5 m) isolates were facultative psychrophiles while isolates from $\geq$10 m depth were typical mesophiles. This stratification is believed to be due to stratified availability of organic materials to the bacterial decomposers. In the water column below the chemoline, the environment is extremely oligotrophic so that the trait of rapid growth in low temperature might not be demanded by deep-lake decomposers. The stratified distribution of community composition and decomposer activity in Lake Khuvsgul implies that ecological functions of bacterial community in lakes of cold region are sharply divided by water column stratification.
Ma, Yongxi;Li, Defa;Qiao, S.Y.;Huang, C.H.;Han, In K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.15
no.10
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pp.1482-1488
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2002
The aim of this study was to explore the effects of fiber sources on gut development and bacterial activity in the gastrointestinal tract of piglets. Eighteen crossbred (Duroc${\times}$Landrace${\times}$Yorkshire) barrows were fed a basal diet based on corn plus soybean meal or similar diets in which a portion of the corn and soybean was replaced by 5% wheat bran or 5% sugar beet pulp. The results indicate that pigs fed diets containing 5% wheat bran or 5% sugar beet pulp had lower liver weights than control pigs (p<0.01). The relative weight of the pancreas in pigs fed diets containing 5% sugar beet pulp was greater than that of control pigs or pigs fed diets containing 5% wheat bran (p<0.05). The pH of the ileal digesta of pigs fed the diet containing 5% wheat bran was higher than that of control pigs or pigs fed the diet containing 5% sugar beet pulp (p<0.05). The lipase activity in the distal jejunum, proximal, and distal ileum of pigs fed the control diet was higher than that of pigs fed the diets containing 5% wheat bran or 5% sugar beet pulp (p<0.05). The concentration of volatile fatty acids anterior to the caecum was greater for the pigs fed the diet containing 5% sugar beet pulp, while the concentration of volatile fatty acids posterior to the ileum was greater for the pigs fed the diet containing 5% wheat bran. This means that sugar beet pulp increased the bacterial fermentation precaecum, while wheat bran increased the bacterial fermentation post-ileum. The concentration of bacterial nitrogen and bacterial protein/total protein in ileal digesta of pigs fed the control diet was higher (p<0.05) than that of pigs fed the diets contained either fiber source. Bacterial protein/total protein in the feces of pigs fed the diet containing 5% sugar beet pulp was higher than that of pigs fed the control diet. This means that inclusion of 5% wheat bran or sugar beet pulp in diets influenced the development of the digestive tract of piglet. The mechanism by which dietary fiber reduced specific activity of lipase needs further consideration. Dietary fiber influenced the bacterial activity in the digestive tract of piglets, sugar beet pulp increased the fermentation in the upper gastrointestinal tract, and while wheat bran increased the fermentation in the lower gastrointestinal tract.
To construct an efficient Bacillus subtilis expression vector, strong promoters were isolated from the chromosomal DNA libraries of Clostridium acetobutylicum ATCC 4259, Thermoactinomyces sp. E79, and Bacillus thermoglucosidasius KCTC 3400. The $P_{C27}$ promoter cloned from the clostridial chromosmal DNA showed a 5-fold higher promoter strength than the $P_{SP02}$ promoter in the expression of the cat gene, and its sequence was estimated as an upstream region of the predicted hypothetical gene (tet-R family bacterial transcription regulator gene) in C. acetobutylicum. As a promoter element, $P_{C27}$ exhibited putative nucleotide sequences that can bind with bacterial RNAP and the 3'end of the 16S rRNA just upstream of the start codon. In addition, the promoter activity of $P_{C27}$ was distinctively repressed in the presence of glucose. Using $P_{C27}$ as the promoter element, a glucose controllable B. subtilis expression vector was constructed and the lipase gene from Staphylococcus haemolyticus KCTC 8957P was expressed in B. subtilis. When compared with the lipase expression by the T7 promoter induced by IPTG in E. coli, the $P_{C27}$ promoter showed about a 1.5-fold higher expression level in B. subtilis than that without induction.
To produce low salt fermented anchovy by an accelerated method with Asp. oryzae and Bacillus sp. koji, enzyme activity and variation of microflora during the 60 day fermentation were examined. Bacterial counts changed a little during the fermentation with the highest on day 40 for proteolytic and anaerobic bacteria and on day 20 for aerobic bacteria. Proteolytic, lipolytic, aerobic, and anaerobic bacteria counts were higher in the Bacillus sp. koji added anchovy paste than in others. The protease and lipase activities reached the highest point on day 20 and 30, respectively, and decreased gradually afterwards. The protease activity was higher in Asp. oryzae koji than in bacillus sp. koji, but the lipase activity was to the contrary.
Kim, Jieun;Mannaa, Mohamed;Kim, Namgyu;Lee, Chaeyeong;Kim, Juyun;Park, Jungwook;Lee, Hyun-Hee;Seo, Young-Su
The Plant Pathology Journal
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v.34
no.5
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pp.412-425
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2018
The Hfq protein is a global small RNA chaperone that interacts with regulatory bacterial small RNAs (sRNA) and plays a role in the post-transcriptional regulation of gene expression. The roles of Hfq in the virulence and pathogenicity of several infectious bacteria have been reported. This study was conducted to elucidate the functions of two hfq genes in Burkholderia glumae, a causal agent of rice grain rot. Therefore, mutant strains of the rice-pathogenic B. glumae BGR1, targeting each of the two hfq genes, as well as the double defective mutant were constructed and tested for several phenotypic characteristics. Bacterial swarming motility, toxoflavin production, virulence in rice, siderophore production, sensitivity to $H_2O_2$, and lipase production assays were conducted to compare the mutant strains with the wild-type B. glumae BGR1 and complementation strains. The hfq1 gene showed more influence on bacterial motility and toxoflavin production than the hfq2 gene. Both genes were involved in the full virulence of B. glumae in rice plants. Other biochemical characteristics such as siderophore production and sensitivity to $H_2O_2$ induced oxidative stress were also found to be regulated by the hfq1 gene. However, lipase activity was shown to be unassociated with both tested genes. To the best of our knowledge, this is the first study to elucidate the functions of two hfq genes in B. glumae. Identification of virulence-related factors in B. glumae will facilitate the development of efficient control measures.
Journal of the Korean Society of Groundwater Environment
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v.5
no.4
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pp.215-222
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1998
The objective of this study was to investigate the effects of physico-chemical environmental factors on the changes of bacterial population from two sites used for drinking water and eight sites polluted with various pollutant in Seoul city. In all the stations except for two sites used for drinking water, the concentrations of nitrate- nitrogen and ammonia were in excess of the criteria of groundwater quality by the result of analysis of 40 variations including physicochemical environmental factors, heavy metals, and bacterial populations. The numbers of total bacteria, heterotrophic bacteria and functional groups of bacteria were ranged from 5.1 to 41.4${\times}$10$\^$5/cells/ml and from 0.01 to 29.6${\times}$10$^4$cfu/ml, respectively. The activities of extracellular enzymes showed the ranges of 0.005∼11.3${\mu}$M/l/hr and its order to lipase, phophatase, ${\beta}$-glucosidase, cellulase, chitinase, amylase. The results of correspondence and multidimensional scaling analysis between bacterial populations and its physico-chemical environmental factors were explained the effects of physico-chemical environmental factors according to site characters and separated four group, which is accord with potential pollutants at wells.
Biochemical methods were selected to evaluate the role of exopolymeric substances in the stability of biofilms used in bioremediation processes. Biofilms of Thiomonas arsenivorans formed on pozzolana were thus treated with pronase (protein target), lectins (Con A or PNA), calcofluor or periodic acid (polysaccharides target), DNase (DNA target), and lipase (triglycerides target). Neither protease nor DNase treatments had any effect on bacterial adhesion. Lectins and calcofluor treatments mainly affected young biofilms. Lipase treatment had a noticeable effect on biofilm stability whatever the biofilm age. Results suggest that it would be an increased resistance of mature biofilms that protects them from external attacks.
The phospholipase B (PLB) families are enzymes sharing phospholipase (PL), lysophospholipase (LPL) and lysophospholipase-transacylase (LPTA) activities. In this study, we report the putative gene encoding phospholipase B (plbA) containing lipase motifs was cloned for the first time from the filamentous fungus, Aspergillus nidulans. plbA was isolated from A. nidulans genomic DNA library using a PCR-amplified probe, which is designed on the basis of sequence information derived from the conserved lipase regions of various PLBs. The deduced product of plbA is of 626 amino acids. From the assigned sequence, PlbA showed 72% identity with Penicillium notatum PLB but have low similarity with phospholipase A of other organisms.
The fellowing results are obtained by experiment on the variation of enzyme activity during pickling anchovy (Engraulis japenicus) in vinegar. 1) Protease activity increased during brine-salting. It decreased for a short time by tile addition of acetic acid and gradually changed at an invariable ratio during pickling. 2) Lipase activity decreased during brine salting but increased temporarily by the addition of vinegar, after this no fixed tendency could he observed during pickling whereas acid value abviously increased. 3) VBN (Volatile basic nitrogen) and NaCl content quickly increased during brine salting. During pickling VBN increased slowly while NaCl content scarcely varied. 4) The bacterial plate count decreased suddenly when the anchovy were placed in brine but it increased during brine salting and decreased again when anchovy were pickled and the number of count remained the same thereafter. 5) To maintain preservation effects, the acidity of the vinegar must be maintained more than $2\%$ in the muscle. 6) Based on this experimental condition, it transpires that 8 days of immersion In brine produces sufficient salt concentration in the muscles. From the results of VBN, acidity, amino nitrogen, lipase activity, and organoleptic tests, the quality of pickle was still preserved after 47 days and taste of the pickle seemed best on the thirty second day of the storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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