BACKGROUND: Towards achievement of sustainable agriculture, using microbial inoculants may present promising alternatives without adverse environmental effects; however, there are challenging issues that should be addressed in terms of effectiveness and ecology. Viability and stability of the bacterial inoculants would be one of the major issues in effectiveness of microbial pesticide uses, and the changes within the indigenous microbial communities by the inoculants would be an important factor influencing soil ecology. Here we investigated the stability of the introduced bacterial strains in the soils planted with barley and its effect on the diversity shifts of the rhizosphere soil bacteria. METHODS AND RESULTS: Two different types of bacterial strains of Bacillus thuringiensis and Shewanella oneidensis MR-1 were inoculated to the soils planted with barley. To monitor the stability of the inoculated bacterial strains, genes specific to the strains (XRE and mtrA) were quantified by qPCR. In addition, bacterial community analyses were performed using v3-v4 regions of 16S rRNA gene sequences from the barley rhizosphere soils, which were analyzed using Illumina MiSeq system and Mothur. Alpha- and beta-diversity analyses indicated that the inoculated rhizosphere soils were grouped apart from the uninoculated soil, and plant growth also may have affected the soil bacterial diversity. CONCLUSION: Regardless of the survival of the introduced non-native microbes, non-indigenous bacteria may influence the soil microbial community and diversity.
본 연구는 사일리지 발효 특성에 있어 미생물제제와 유기산제제의 처리효과를 분석하고 비교하기 위한 목적으로 수행되었다. 사일리지 pH, 젖산, 초산, L/A비율, 프로피온산, 낙산, WSC, CP, $NH_3-N$, NDF 및 ADF 등을 발효 특성항목으로 조사하였고, 메타분석기술을 이용하여 분석을 수행하였다. 총 14편의 연구논문들을 분석에 사용하였다. 미생물제제 처리는 대조구에 비하여 pH, 젖산, 초산, L/A 비율, 프로피온산 및 ADF 함량 향상시키는 것으로 나타났다 (p<0.01). 이와는 반대로 낙산, WSC, CP, $NH_3-N$ 및 NDF는 대조구에 비하여 감소하는 것으로 나타났다 (p<0.001). 유기산제제의 처리는 ADF 결과를 제외하고 모든 조사 항목에서 대조구에 비해 처리구에서 높은 결과를 갖는 것으로 나타났다 (p<0.001). 미생물제제와 유기산제제의 처리효과 비교에서 유의적인 차이는 낙산, WSC, CP 및 $NH_3-N$에서 나타났고 (p<0.05), 미생물제제 처리가 유기산제제 처리에 비하여 낙산, WSC, CP 및 $NH_3-N$ 함량을 낮추는 것으로 나타났다 (p<0.05).
Advances in silage technology, including precision chop forage harvesters, improved silos, polyethylene sheeting, shear cutting silo unloaders, and the introduction of total mixed rations, have made silage the principal method of forage preservation. A better understanding of the biochemistry and microbiology of the four phases of the ensiling process has also led to the development of numerous silage additives. Although acids and acid salts still are used to ensile low-DM forages in wet climates, bacterial inoculants have become the most widely used silage additives in the past decade. Commercial inoculants can assure a rapid and efficient fermentation phase; however, in the future, these products also must contribute to other areas of silage management, including the inhibition of enterobacteria, clostridia, and yeasts and molds. Nonprotein nitrogen additives have the problems of handling, application, and reduced preservation efficiency, which have limited their wide spread use. Aerobic deterioration in the feedout phase continues to be a serious problem, especially in high-DM silages. The introduction of competitive strains of propionic acid-producing bacteria, which could assure aerobically stable silages, would improve most commercial additives. New technologies are needed that would allow the farmer to assess the chemical and microbial status of the silage crop on a given day and then use the appropriate additive(s).
Young Ho Joo;Seung Min Jeong;Jiyoon Kim;Myeong Ji Seo;Chang Hyun Baeg;Seong Shin Lee;Byeong Sam Kang;Ye Yeong Lee;Jin Woo Kim;Sam-Churl Kim
한국초지조사료학회지
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제43권3호
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pp.148-155
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2023
This study was aimed to isolate bacterial inoculants producing chitinase and evaluate their application effects on corn silage. Four corn silages were collected from four beef cattle farms to serve as the sources of bacterial inoculants. All isolates were tested against Fusarium graminearum head blight fungus MHGNU F132 to confirm their antifungal effects. The enzyme activities (carboxylesterase and chitinase) were also measured to isolate the bacterial inoculant. Based on the activities of anti-head blight fungus, carboxylesterase, and chitinase, L. buchneri L11-1 and L. paracasei L9-3 were subjected to silage production. Corn forage (cv. Gwangpyeongok) was ensiled into a 10 L mini silo (5 kg) in quadruplication for 90 days. A 2 × 2 factorial design consists of F. graminearum contamination at 1.0104 cfu/g (UCT (no contamination) vs. CT (contamination)) and inoculant application at 2.1 × 105 cfu/g (CON (no inoculant) vs. INO (inoculant)) used in this study. After 90 days of ensiling, the contents of CP, NDF, and ADF increased (p<0.05) by F. graminearum contamination, while IVDMD, acetate, and aerobic stability decreased (p<0.05). Meanwhile, aerobic stability decreased (p<0.05) by inoculant application. There were interaction effects (p<0.05) on IVNDFD, NH3-N, LAB, and yeast, which were highest in UCT-INO, UCT-CON, CT-INO, and CT-CON & INO, respectively. In conclusion, this study found that mold contamination could negatively impact silage quality, but isolated inoculants had limited effects on IVNDFD and yeast.
This study examined the effects of bacterial inoculants on chemical composition and fermentation indices of barley silage. Barley forage (Youngyang) was harvested at 24% dry matter (DM) and wilted to 47.9% DM. The wilted barley forage was chopped to 3-5 cm length and applied with no inoculant (CON), L. plantarum ($1{\times}10^{10}cfu/g$, LP) or Effective Microorganisms ($0.5{\times}10^9cfu/g$, EM). Then the forages were ensiled in four replications for each treatment in 20 L mini silos and stored for 100 days. The contents of crude protein and ether extract were higher in CON silage ensiled for 100-d, while the contents of DM and crude ash were higher in EM silage (p<0.05). The contents of ADF, NDF and hemicellulose as well as the in vitro DM digestibility were not affected by microbial inoculation (p>0.05). The pH, ammonia-N concentration and lactate to acetate ratio were higher (p<0.05) in CON silage, while lactate concentrations were higher (p<0.05) in CON and LP silage. Acetate concentration and lactic acid bacteria was increased (p<0.05) by both inoculants (LP and EM), but propionate concentration and yeast was increased (p<0.05) by EM and LP, respectively. These results indicated that the fermentation quality of barley silage was improved by the application of bacterial inoculants.
Lee, Seong Shin;Joo, Young Ho;Choi, Jeong Seok;Jeong, Seung Min;Paradhipta, Dimas Hand Vidya;Noh, Hyeon Tak;Han, Ouk Kyu;Kim, Sam Churl
한국초지조사료학회지
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제41권4호
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pp.259-266
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2021
The present study was aimed to estimate the effect of ensiling period and bacterial inoculants on chemical compositions and fermentation characteristics on rye silage harvested at delayed stage. Rye (Secale cereale L.) was harvested after 20 days of heading stage (29.4% dry matter, DM). The harvested rye forage was applied with different inoculants following: applications of distilled water (CON), Lactobacillus brevis (LBB), Leuconostoc holzapfelii (LCH), or mixture of LBB and LCH at 1:1 ratio (MIX). Each forage was ensiled into 20 L mini bucket silo (5 kg) for 50 (E50D) and 100 (E100D) days in triplicates. The E50D silages had higher in vitro digestibilities of DM (IVDMD, p<0.001) and neutral detergent fiber (IVNDFD, p=0.013), and lactate (p=0.009), and acetate (p=0.011) than those of E100D, but lower pH, lactic acid bacteria (LAB), and yeast. By inoculant application, LCH had highest IVDMD and IVNDFD (p<0.05), while MIX had highest lactate and lowest pH (p<0.05). The CON and LCH in E50D had highest LAB and yeast (p<0.05), whereas LBB in E100D had lowest (p<0.05). Therefore, this study concluded that LCH application improved the nutrient digesbility (IVDMD and IVNDFD) of lignified rye silage, and longer ensiling period for 100 days enhanced the fermentation characteristics of silage compared to ensiling for 50 days.
Jalc, D.;Laukova, Andrea;Pogany Simonova, M.;Varadyova, Z.;Homolka, P.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제22권7호
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pp.977-983
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2009
The survival and effect of three new probiotic inoculants (Lactobacillus plantarum CCM 4000, L. fermentum LF2, and Enterococcus faecium CCM 4231) on the nutritive value and fermentation parameters of corn silage was studied under laboratory conditions. Whole corn plants (288.3 g/kg DM) were cut and ensiled at $21^{\circ}C$ for 105 days. The inoculants were applied at a concentration of $1.0{\times}10^{9}$ cfu/ml. Uninoculated silage was used as the control. The chopped corn was ensiled in 40 plastic jars (1 L) divided into four groups (4${\times}$10 per treatment). All corn silages had a low pH (below 3.55) and 83-85% of total silage acids comprised lactic acid after 105 days of ensiling. The probiotic inoculants in the corn silages affected corn silage characteristics in terms of significantly (p<0.05-0.001) higher pH, numerically lower crude protein content and ratio of lactic to acetic acid compared to control silage. However, the inoculants did not affect the concentration of total silage acids (acetic, propionic, lactic acids) as well as dry matter digestibility (IVDMD) of corn silages in vitro. In the corn silages with three probiotic inoculants, significantly (CCM 4231, CCM 4000) lower n-6/n-3 ratio of fatty acids was detected than in control silage. Significant decrease in the concentration of $C_{18:1}$, and significant increase in the concentration of $C_{18:2}$ and $C_{18:3}$ was mainly found in the corn silages inoculated with the strains E. faecium CCM 4231 and L. plantarum CCM 4000. At the end of ensiling, the inoculants were found at counts of less than 1.0 log10 cfu/g in corn silages.
Single or co-inoculation of phosphate solubilizing bacterial and fungal strains (Burkholderia anthina and Aspergillus awamori respectively) was performed separately to assess their synergistic and antagonistic interactions and the potential to be used as bio-inoculants. Co-inoculation was found to release the highest content of soluble phosphorus (1253 ${\mu}g\;ml^{-1}$) into the medium, followed by single inoculation of fungal strain (1214 ${\mu}g\;ml^{-1}$) and bacterial strain (997 ${\mu}g\;ml^{-1}$). However, there was no significant difference between single inoculation of fungal strain and co-inoculation of fungal and bacterial strain in terms of the phosphorous release. The highest pH reduction, organic acid production and glucose consumption were observed in the sole A. awamori inoculated culture medium. According to the plant growth promotion bioassays, co-inoculation of the microbial strains resulted in 21% and 43% higher shoot and root growth of the mung bean seedlings respectively as compared to the respective controls. Therefore, co-inoculation of B. anthina and A. awamori showed better performance in stimulating plant growth than that in inoculation of each strain alone. However, assessment period of the present study being short, we recommend in engaging further experimentation under field conditions in order to test the suitability of the strains to be used as bio-inoculants.
전 세계적으로 친환경 농업을 위해 식물생장촉진 근권세균을 이용한 미생물 비료에 대한 관심이 증가하고 있는데 투여하는 세균을 식물 근권에 보다 장기간 잔류시키기 위해 식물생장 촉진능이 있는 균주를 alginate bead에 고정화하여 식물생장을 조사하였다. 발아된 토마토 유묘에 Arthrobacter woluwensis ED를 $1{\times}10^6$ cells/g 로 처리하고 30일 재배 후 자라난 토마토의 shoot와 뿌리 길이 및 습윤과 건조중량을 측정한 결과 비접종 대조군과 비교하여 균주 현탁액 접종군은 각각 36.2, 59.0, 51.1과 37.5%씩 유의성 있게 증가하였으며 고정화 균주 접종군은 각각 42.0, 67.4, 62.5와 60.4%씩 유의성 있게 증가하였다. 고정화 균주 접종군은 균주 현탁액 접종군에 비하여 각각 6, 8, 11과 23% 증가하였다. 접종 균주가 식물 근권에서 유지되는 양상을 관찰하기 위해 denaturing gradient gel electrophoresis를 이용하여 토양세균 군집을 분석하였는데 균주 현탁액 접종군에서 ED 균주의 DNA band intensity는 접종일로부터 1주일까지 가장 높게 나타났으나 그 이후로 감소하여 접종 2주 후 비접종 대조군과 비슷한 band intensity를 나타내었다. 반면, 고정화 균주 접종군의 ED 균주 band intensity는 접종일로부터 초기에는 비접종 대조군과 비슷하였으나 이후 급격하게 증가하여 계속 높게 유지되어 3주까지 band intensity가 현탁액 접종군 보다 높았다. 따라서 alginate에 A. woluwensis ED를 고정하여 적용하는 방법이 현탁액 적용보다 식물 근권에 균주의 공급을 효과적으로 유지하면서 식물생장을 더욱 촉진하는 것으로 나타났다.
Young Sang Yu;Yan Fen Li;Xaysana Panyavong;Li Zhunang Wu;Jeong Ung Hwang;Li Li Wang;Hak Jin Kim;Won Jin Lee;Jong Geun Kim
한국초지조사료학회지
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제44권1호
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pp.50-57
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2024
Silage inoculants, crucial in modern silage production, comprise beneficial microorganisms, primarily lactic acid bacteria (LAB), strategically applied to forage material during ensiling. This study aimed to compare the effectiveness of various inoculants produced by different companies. Five treatments were evaluated, including a control group: T1 (Lactobacillus plantarum), T2 (Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus), T3 (Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus + Lactobacillus buchneri), T4 (Lactobacillus plantarum + Lactobacillus acidophilus + Lactobacillus bulgaricus), and T5 (Lactobacillus plantarum + Pediococcus pentosaceus + Enterococcus faecium). Italian ryegrass was harvested at the heading stage and treated with these silage inoculants. Samples were collected over a 60-day ensiling period. Co-inoculation with L. plantarum and P. pentosaceus (T2) resulted in significantly higher CP compared to the control group co-inoculation exhibited with resulted in Lactobacillus plantarum and Pediococcus pentosaceus in the T2 treatment exhibited higher CP content of 106.35 g/kg dry matter (DM). The T3 treatment, which included heterofermentative bacterial strains such as Lactobacillus buchneri, exhibited an increase in acetic acid concentration (11.15 g/kg DM). In the T4 treatment group, which utilized a mixed culture of Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus bulgaricus, the NH3-N/TN content was observed to be the lowest (20.52 g/kg DM). The T5 containing Enterococcus faecium had the highest RFV (123) after 60 days. Expanding upon these findings, the study underscores not only the beneficial effects of particular inoculant treatments on silage quality but also underscores the potential of customized inoculation strategies in maximizing nutrient retention and overall silage preservation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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