• 한국식품과학회지
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• 제35권6호
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• pp.1143-1149
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• 2003

본 연구는 Streptococcus mutans를 특이적으로 용균하는 효소를 탐색하고 효소생산 균주의 동정을 수행하였다. 토양으로부터 5,000여주의 알칼리 내성 판주를 선별하였으며 그중 용균활성이 있는 22주를 선별하였으며 가장 용균활성이 높은 균주 1주를 선별하여 Strain No. 4830이라 명명한 후 효소의 생산 조건 및 효소의 특성을 확인한 결과 pH 5에서부터 pH 11에서 안정하였으며 pH 7.0 이상에서 Streptococcus mutans에 대하여 용균활성이 나타났다. 또한 $30^{\circ}C$ 이상에서 효소의 활성을 확인할 수 있었으며 $50^{\circ}C$에서 최대효소활성을 확인하였다. 효소의 열안정성은 $40^{\circ}C$ 이하에서는 안정한 것으로 확인되었다. 균주의 특성을 검토한 결과 균체의 지방산 조성은 중성 조건에서 생장하는 Bacillus계열과는 달리 16-C계열의 지방산함량이 상당히 높은 것을 확인하였으며 Obligate alkalophilic의 특성으로 알려진 branched 15-C 지방산인 $iso-C_{15:0}$와 $anteiso-C_{15:0}$의 함량이 매우 높은 것을 확인할 수 있었다. 또한 생화학적 특성으로 Bacillus 계열로 추정이 가능하였으며 다양한 종류의 당류에 대하여 acid를 형성하지 않은 것으로 확인되어 Strain No. 4830은 Obligate alkalophilic의 특성을 나타내었다. 또한 15% NaCl의 농도에서도 생장하는 것으로 보여 염에 대하여 내성을 갖는 것으로 나타났다. 16S rRNA 분석결과 Bacillus alcalophilus 균주와 94%의 유사성을 나타내었으나 생화학적 및 이화학적인 특성 등에서 Bacillus alcalophilus와 다른 균주로 동정되었다.

• Journal of Microbiology
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• 제40권1호
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• pp.26-32
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• 2002

From the culture supernatant of the psychrotrophic strain of Bacillus amyloliquefaciens an extracellular serine protease was purified to apparent homogeneity by successive purification steps using QAE-Sephadex, SP-Sephadex and Sephacryl S-100 column chromatography. The pretense is monomeric, with a relative molecular mass of 23,000. It is inhibited by the serine protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride, but not by EDTA. The enzyme is most active at pH 9-10 and at $45^{\circ}C$, although it is unstable at $60^{\circ}C$.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권12호
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• pp.1868-1873
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• 2006

A novel microorganism that could degrade high molecular weight gellan was screened and isolated from soil. On gellan plate, the microorganism grew well and completely liquefied the plate. The gellan-degrading microorganism was isolated by pure culture on glucose and nutrient agar medium afterwards. The 16S rDNA sequence analysis and biochemical tests using an API 50CHB/20E kit revealed that the strain belonged to Bacillus sp. The isolate, named as Bacillus sp. YJ-1, showed optimum gellan-degrading activity in 0.5% gellan medium at pH 7.5 and 37$^{\circ}C$. The activity was measured and evaluated by the thiobarbituric acid and thin-layer chromatography method. Mass spectrometry revealed that the major gellan.. depolymerized product was an unsaturated tetrasaccharide consisting of $\Delta$4,5-glucuronic acid-(1$\rightarrow$4 )-$\beta$-D-glucose-(1$\rightarrow$4)- $\alpha$-L-rhamnose-(1$\rightarrow$3)-$\beta$-D-glucose, which is a dehydrated repeating unit of gellan, thus the enzyme was identified as gellan lyase. When the gellan was present in the medium, the gellan-degrading activity was much higher than that in glucose-grown cells. These results indicate that in the presence of gellan, Bacillus sp. YJ-1 is able to metabolize the gellan by inducing gellan-degrading enzymes that can degrade gellan into small molecular weight oligosaccharides, and then the gellan. depolymerized products are taken up by the cells and utilized by intracellular enzymes.

• 한국식품영양과학회지
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• 제25권5호
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• pp.878-884
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• 1996

BailIus sp. IJ-3 균주는 균체외 효소로 대두단백 응고효소를 생산하고, 이 박테리아의 최적 효소생산에 대한 배지조성 및 배양조건을 검토하였다. 최대의 대두단백 응고효소를 생산하는 배지조성은 soymilk 20%(w/v), glucose 2.0%, yeast extract 5.0%, peptone 4.0% 및 potassium Phosphate, monobasic 1.0%였다. 초기 pH는 6.0이었고, $35^{\circ}C$ 배양에서 최대 효소활성을 보였다. 조정된 배지 조성에서 72시간 배양에 최대 효소활성을 나타내었으며, 기존배지 활성의 약 5.3배의 효소활성의 증가를 보였다. BaCilIus sp. IJ-3 균주효소는 7S globu1in에 대해 특이성을 갖고 있는 것으로 사료된다.

• 미생물학회지
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• 제49권1호
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• pp.38-45
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• 2013

본 연구에서는 연안갯벌 갯지렁이(Perinereis aibuhitensis)에서 분리한 광염성 미생물, Bacillus sp. EBW4의 특성과 다양한 환경조건에서 유기물 분해능을 분석하였다. 16S rRNA 염기서열에 기초하여 동정한 결과, 균주 EBW4는 Bacillus hemicentroti $JSM076093^T$와 98.3%, Bacillus hwajinponensis SW-$72^T$와 97.96% 그리고 Bacillus algicoa $KMM3737^T$와 96.28%의 상동성을 보였다. EBW4의 생장 가능한 온도 범위는 $4-40^{\circ}C$, 염분도 범위는 0-17%, pH 범위는 5-9로 나타나 EBW4는 광염성 균주로 밝혀졌다. EBW4의 세포막을 구성하는 주요 지방산으로는 anteiso $C_{15:0}$, iso $C_{16:0}$, anteiso $C_{17:0}$, iso $C_{14:0}$ 등으로 각각 48.2, 12.1, 11.6, 9.4% 비율로 나타났다. EBW4는 탄수화물, 단백질, 지방 등 다양한 고분자 유기물을 분해할 수 있는 DNase, amylase, protease, lipase 등의 효소 활성뿐만 아니라, alkaline phosphatase, esterase (C4), leucine arylamidase 그리고 ${\alpha}$-chymotrypsin 효소활성도 가지고 있었다. 다양한 염분 농도 조건에서 합성폐수를 이용한 실험에서 EBW4은 조사한 모든 범위의 염분 조건에서도 유기물 분해능이 우수하였다.

• 한국수산과학회지
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• 제42권5호
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• pp.461-467
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• 2009

A bacterial strain was screened and identified from sea sediments in Tongyeong coastal area in order to obtain proteases or peptidase cleaving C-terminal of glutamic acid. Strain TS0611, which showed the highest activity from 5 isolated protease producing strains, was selected and its properties investigated. Strain TS0611 was a gram-positive rod, $1.2\;{\mu}m$ in cell length, catalase positive, motility-positive, melanin-negative and grew at 15~$50^{\circ}C$, and hydrolyzed gelatin and casein. This strain was identified as Bacillus thuringiensis or Bacillus cereus based on results from the API system(API 50 CHB) which examined saccharides properties, fatty acid composition of cell wall, and 16S rRNA gene sequence.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권1호
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• pp.63-69
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• 2006

핀란드의 Lappeenranta 지역에 위치하는 Saimaa 호수가의 토양시료로부터 분리된 Bacillus sp. KMU-1011를 이용하여 많은 작물에 잿빛 곰팡이병을 유발하는 Botrytis cinerea KACC 40573에 대한 항진균 활성을 위한 배양조건을 조사하였다. 항진균 물질의 생산을 위한 기본배지로 nutrient broth를 사용하였으며 탄소원으로 1.0% glucose와 질소원으로 1.0% polypeptone를 첨가하였을 때 가장 높은 항진균 활성을 나타내었다. 배양조건으로는 $24^{\circ}C$, 180 rpm, 48시간 배양하였을 때 가장 높은 항진균 활성을 나타내었다. Ammonium sulfate를 $30{\sim}60%$ 첨가하여 항진균 물질을 회수하였을 때 가장 양호한 항진균 활성을 나타내었으며, chloroform을 이용하여 배양액 중에 존재하는 항진균 물질을 회수하여 다양한 작물병원성 곰팡이에 대한 spectrum을 조사한 결과, 잿빛곰팡이병, 고추 탄저병, 참외 탄저병, 수박등의 박과작물의 덩굴마름병, 토마토 시들음병, 글라디올러스 마른썩음병, 토마토 질병, 수박 덩굴쪼김병. 수박 질병, 사과나무 역병, 벼 잎집무늬마름병, 참외 줄기썩음병, 그리고 고추 균핵병에 대하여 양호한 항진균 활성을 나타내는 것으로 조사되었다.

• 한국안광학회지
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• 제18권1호
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• pp.67-73
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• 2013

목적: 최근 시력 교정용 기구 및 주변용품들에 대한 미생물의 오염이 안과 질병요인으로 지목됨에 따라 시력 교정용 안경에 대한 세균의 오염 실태를 조사하였다. 방법: 초등학생 36명, 중학생 37명, 고등학생 30명, 대학생 10명, 노인 32명으로 총 145명의 안경으로부터 세균을 채취하여 분리 배양한 후 동정하였다. 결과: 시력 교정용 안경으로부터 검출된 세균은 총 17종으로 Bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Bacillus sp., CNS, Enterococcus, Escherichia coli, Proteus sp., Pseudomonas sp., Serretia sp., Streptococcus sp., Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus hemolyticus, Acinetobacter, Enterobacter cloacae, GNR, Pseudomonas aeruginosa이었다. 안과질환과 관련한 세균류는 각막염을 유발하는 Enterobacter cloacae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus epidermidis, 각막궤양을 유발하는 Pseudomonas sp., Staphylococcus aureus, 급성누낭염, 안와봉소염, 망막정맥주위염, 눈꺼풀테염을 유발하는 Staphylococcus aureus와 급성결막염 등을 유발하는 Streptococcus hemolyticus가 포함되었다. 결론: 시력 교정용 안경에서 고위험군 기회감염성 균류들이 다량으로 존재하는 것을 확인하였으며 이를 통한 감염에 따른 질병의 유발이 예측되므로 안경의 청결관리를 위한 대안이 필요하다고 사료된다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제21권6호
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• pp.627-636
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• 2011

A commercially important alkaline protease, produced by Bacillus sp. RRM1 isolated from the red seaweed Kappaphycus alvarezii (Doty) Doty ex Silva, was first recognized and characterized in the present study. Identification of the isolated bacterium was done using both biochemical characterization as well as 16S rRNA gene sequencing. The bacterial strain, Bacillus sp. RRM1, produced a high level of protease using easily available, inexpensive agricultural residues solid-state fermentation (SSF). Among them, wheat bran was found to be the best substrate. Influences of process parameters such as moistening agents, moisture level, temperature, inoculum concentration, and co-carbon and co-nitrogen sources on the fermentation were also evaluated. Under optimized conditions, maximum protease production (i.e., 2081 U/g) was obtained from wheat bran, which is about 2-fold greater than the initial conditions. The protease enzyme was stable over a temperature range of 30-$60^{\circ}C$ and pH 6-12, with maximum activity at $50^{\circ}C$ and pH 9.0. Whereas the metal ions $Na^+$, $Ca^{2+}$, and $K^+$ enhanced the activity of the enzyme, others such as $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, $Fe^{2+}$, $Co^{2+}$, and $Zn^{2+}$ had rendered negative effects. The activity of the enzyme was inhibited by EDTA and enhanced by $Cu^{2+}$ ions, thus indicating the nature of the enzyme as a metalloprotease. The enzyme showed extreme stability and activity even in the presence of detergents, surfactants, and organic solvents. Moreover, the present findings opened new vistas in the utilization of wheat bran, a cheap, abundantly available, and effective waste as a substrate for SSF.

• 한국식품과학회지
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• 제38권1호
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• pp.82-87
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• 2006

전통 청국장에서 protease 활성이 우수한 21개 균주를 ISP 배지를 이용하여 선발하였다. 선발된 21개 균주로 각각 청국장을 제조 후 관능 평가를 통해 청국장 특유의 이취와 비슷한 향을 생성하는 8균주를 선발 및 49개 탄소원의 이용성을 조사하여 Bacillus subtilis MB4와 B. amyloliquefaciens A1, A2, B1, MC1, SB2, SC1, SD1로 명명하였다. 최종적으로 우수한 균주로 선정된 MB4, A2와 SB2는 PCR sequencing(16S rDNA)에 의한 상동성을 비교하여 B. subtilis MB4, B. amyloliquefaciens A2, B. amyloliquefaciens SB2로 각각 동정되었다. B. subtilis MB4 및 B. amyloliquefaciens SB2로 제조한 청국장의 protease 활성은 179.6(Unit/mL/min)과 201.9(Unit/mL/min)로, 대조구의 97.0(U nit/mL/min)보다 우수했으며, 관능 평가는 B. subtilis MB4로 제조한 청국장이 3.6점의 평점을 얻어 전통 청국장과 가장 비슷한 향을 가진 것으로 평가 되었다. 겉보기 점도는 B. amyloliquefaciens SB2, MC1, B1, A1, SD1, A2, SC1로 제조한 청국장은 각각 0.010-0.013 Pa s (404/s)에서 0.008-0.006 Pa s(1001/s)로 감소하는 추세를 보였다. Bacillus subtilis MB4로 제조된 청국장과 대조구인 전통 청국장의 경우 각각 0.0008, 0.0006 Pa s(404/s)에서 0.0007, 0.0002 Pa s (1001/s)로 거의 변화가 없었으며, 이러한 결과는 B. subtilis MB4로 제조된 청국장과 대조구인 전통 청국장이 매우 유사한 물성을 가지는 것으로 판단된다.