• 제목/요약/키워드: BL V

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Bacillus cereus ASK-202에서 cloning 된 agarase의 물리 ${\cdot}$ 화학적 특성

  • 황선희;하순득;김봉조;공재열
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2002년도 생물공학의 동향 (X)
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    • pp.534-537
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    • 2002
  • 본 연구에서는 기능성 식품 첨가물 소재 또는 의약품으로 사용 가능한 한천올리고당의 대량생산을 위하여 agarase 생산균주인 Bacillus cereus ASK202에 대해 유전자 cloning 방법을 이용하여 한천분해효소 고생산성 균주로의 개발을 시도하였다. 원균주의 chromosomal DNA를 무작위적으로 절단하여 agarase를 생산하는 gene 부위를 선별한 결과, 83,300 Da의 agarase(Eba1)를 생산하는 재조합 균주 E. coli BL21(DE3)/pEBA1를 얻을 수 있었다. E. coli BL21(DE3)/pEBAl에서 유도물질로 IPTG를 첨가한 후 induction 5시간 후에 agarase가 원균주에 비해 8배 증가한 양이 고발현되었다. 발현된 agarase는 Asx(Aspartic acid, Asparagine), Glycine와 같은 산성 아미노산의 함량과 Alanine과 같은 중성 아미노산의 함량이 높았으며, pH 5.6, $40^{\circ}C$에서 최적의 활성을 나타내었다. 최적 기질 agar에 대한 $K_m$$V_{max}$값은 0.068 mg/$m{\ell}$과 0.094mg/$m{\ell}{\cdot}min$으로 한천의 ${\beta}$-결합을 자르는 ${\beta}$-agarase로 판명되었다.

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마늘 잠복 바이러스의 면역학적 진단 (Immunological Detection of Garlic Latent Virus)

  • 최진남;송종태;송상익;안지훈;최양도;이종섭
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제38권1호
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    • pp.49-54
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    • 1995
  • 한국 마늘에 감염된 바이러스의 종류와 병 발생 메카니즘을 구명하기 위하여, 마늘 바이러스 cDNA clone들을 분리하였다. 24개 cDNA clone들의 부분적인 염기 서열을 결정하였고, 이 중 poly(A) tail을 가진 5개 clone들의 염기 서열을 결정하였다. 이를 이미 알려진 다른 식물 바이러스와 비교했을 때, clone V9은 일차구조가 carlavirus와 유사성을 보이므로 GLV cDNA clone으로 여겨진다. Northern blot 결과로부터 GLV genome의 크기는 8.5 knt이고, poly(A) tail을 가지고 있다는 것을 알 수 있었다. clone V9의 3' 말단부분에는 바이러스 복제과정에서 cis-acting element로 작용한다고 여겨지는 hexanucleotide motif(5'-ACCUAA)가 존재한다. 또한 carlavirus의 껍질 단백질 subgenomic RNA의 5' 말단에 보존되어 있는 5'-TTAGGT도 나타난다. 이들은 모두 carlavirus의 특징들이다. 껍질 단백질 유전자를 pRSET-A 발현 벡터에 재조합하고, E. coli BL21에서 발현시켰다. 발현된 껍질 단백질을 $Ni^{2+}$ NTA affinity chromatography에 의해 정제하였다. 껍질 단백질을 토끼에 주사하여 항체를 만든 후, immunoblot을 한 결과 GLV 껍질 단백질에 해당하는 24 kDa polypeptide가 인지되었다. 또한 다양한 마늘 품종에 대해서 immunoblot을 한 결과, GLV 껍질 단백질의 크기와 GLV의 감염정도가 마늘 품종에 따라서 차이가 있다는 것을 알 수 있었다.

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Expression of Lily mottle virus Coat Protein and Preparation of IgY Antibody against the Recombinant Coat Protein

  • Yoo, Ha Na;Jung, Yong-Tae
    • 원예과학기술지
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    • 제32권4호
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    • pp.544-549
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    • 2014
  • Lily symptomless virus (LSV), Lily mottle virus (LMoV), and Cucumber mosaic virus (CMV) are the most prevalent viruses infecting lilies in Korea. Leaf and bulb samples showing characteristic symptoms of virus infection were collected in 2012, and 80 field samples were analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The infection frequencies were 79% for LMoV, 5% for LSV, and 3% for CMV. The LMoV coat protein gene was amplified and cloned into the pET21d(+) expression vector to develop serological diagnostic tools to detect LMoV. The resulting carboxy-terminal His-tagged coat proteins were expressed in Escherichia coli strain BL21 (DE3) by induction with IPTG. The recombinant proteins were purified using Ni-NTA agarose beads and used as an antigen to produce polyclonal antibodies in laying hens. The resulting egg yolk immunoglobulin (IgY) specifically recognized LMoV from infected plant tissues in immunoblotting assays and had comparable sensitivity to that of a mammalian antibody. In addition, method of immunocapture RT-PCR using this IgY was developed for sensitive, efficient, and rapid detection of LMoV. Based on these results, large-scale bulb tests and detection of LMoV in epidemiological studies can be performed routinely using this IgY. This is the first report of production of a polyclonal IgY against a plant virus and its use for diagnosis.

Power IC용 저면적 Differential Paired eFuse OTP 메모리 설계 (Deign of Small-Area Differential Paired eFuse OTP Memory for Power ICs)

  • 박헌;이승훈;진교홍;하판봉;김영희
    • 한국정보전자통신기술학회논문지
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    • 제8권2호
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    • pp.107-115
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    • 2015
  • 본 논문에서는 Power IC용 저면적 32비트 differential paired eFuse OTP 메모리를 설계하였다. OTP 메모리 셀 어레이에서 행의 개수가 열의 개수보다 더 작은 경우 eFuse 링크의 프로그램 전류를 공급하는 SL (Source Line) 구동 라인을 열 방향으로 라우팅하는 대신 행 방향으로 라우팅하므로 레이아웃 면적을 많이 차지하는 SL 구동회로의 수를 줄이는 differential paired eFuse 셀 어레이 방식과 코어 회로를 제안하였다. 그리고 blowing되지 않은 eFuse 링크가 EM (Electro-Migration) 현상에 의해 blowing되는 불량을 해결하기 위해 RWL (Read Word-Line) 구동 회로와 BL (Bit-Line) 풀-업 부하회로에 V2V ($=2V{\pm}0.2V$)의 regulation된 전압을 사용하였다. 설계된 32비트 eFuse OTP 메모리의 레이아웃 면적은 $228.525{\mu}m{\times}105.435{\mu}m$으로 기존의 셀 어레이 라우팅을 이용한 IP 크기인 $197.485{\mu}m{\times}153.715{\mu}m$ 보다 20.7% 더 작은 것을 확인하였다.

방광(膀胱)과 위중(委中)의 중추신경로와의 연계성에 관한 연구 (Studies on the Relationship of the Central Neural Pathways to the Urinary Bladder and Wijung($BL_{40}$))

  • 이창현;김호;이광규;정한솔
    • 동의생리병리학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.805-817
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    • 2009
  • This study was to investigate central localization of neurons projecting to the urinary bladder and urinary bladder-related acupoints(Wijung, $BL_{40}$) and neurons of immunoreactive to hormones and hormone receptors regulating urinary bladder function by using peudorabies virus(PRV). In this experiment, Bartha's strain of pseudorabies virus was used in rats to trace central localization of urinary bladder-related neurons and urinary bladder-related acupoints($BL_{40}$) which can regulate urinary system. PRV was injected into the urinary bladder and acupoints($BL_{40}$) related urinary system. After six days survival of rats, mainly common labeled neurons projecting to the urinary bladder and urinary bladder-related acupoints were identified in spinal cord, medulla, pons and diencephalon by PRV immunohistochemical staining method. First-order PRV labeled neurons projecting to urinary bladder and urinary bladder-related acupoints were found in the cervical, thoracic, lumbar and sacral spinal cord. Commonly labeled preganglionic neurons were labeled in the lumbosacral spinal cord and thoracic spinal cord. They were found in the lateral horn area(sacral parasympathetic nucleus and intermediolateral nucleus), lamina V-X, intermediomedial nucleus and dorsal column area. The area of sensory neurons projecting to urinary bladder and Wijung($BL_{40}$) was L5-S2 spinal ganglia and T12-L1 spinal ganglia, respectively. In the brainstem, the neurons were labeled most evidently and consistently in the nucleus of tractus solitarius, area postrema, dorsal motor nucleus of vagus nerve, reticular nucleus, raphe nuclei(obscurus, magnus and pallidus), C3 adrenalin cells, parapyramidal area(lateral paragigantocellular nucleus), locus coeruleus, subcoeruleus nucleus, A5 cell group, Barrington's nucleus and periaqueductal gray matter. In the diencephalon, PRV labeled neurons were marked mostly in the paraventricular nucleus and a few ones were in the lateral hypothalamic nucleus, posterior hypothalamic nucleus, ventromedial hypothalamic nucleus, arcuate nucleus, median eminence, perifornical nucleus, periventricular nucleus and suprachiasmatic nucleus. In cerebral cortex, PRV labeled neurons were marked mostly in the frontal cortex, 1,2 area, hind limb area, agranular insular cortex. Immunoreactive neurons to Corticotropin releasiing factor(CRF), Corticotropin releasiing factor-receptor(CRF-R), c-fos and serotonin were a part of labeled areas among the virus-labeled neurons of urinary bladder and Wijung($BL_{40}$). The commonly labeled areas were nucleus tractus solitarius, area postrema, reticular nucleus, raphe nuclei(obscurus, magnus and pallidus), locus coeruleus, A5 cell group, Barrington,s nucleus, arcuate nucleus, paraventricular nucleus, frontal cortex 1, 2 area, hind limb, and perirhinal(agranular insular) cortex. These results suggest that overlapped CNS locations are related with autonomic nuclei which regulate the functions of urinary bladder-relate organs and it was revealed by tracing PRV labeled neurons projecting urinary bladder and urinary bladder-related acupoints. These commonly labeled areas often overlap with the neurons connected with hormones and hormone receptors related to urination.

PMIC용 넓은 동작전압 영역을 갖는 eFuse OTP 설계 (Design of eFuse OTP Memory with Wide Operating Voltage Range for PMICs)

  • 정우영;학문초;하판봉;김영희
    • 한국정보통신학회논문지
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    • 제18권1호
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    • pp.115-122
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    • 2014
  • 본 논문에서는 eFuse OTP 메모리가 넓은 동작전압 영역을 갖도록 하기 위해서 V2V($=2V{\pm}10%$)의 regulation된 전압을 이용한 RWL 구동회로와 BL 풀-업 부하회로를 제안하므로 수 십 $k{\Omega}$의 post-program 저항을 센싱하면서 OTP 셀의 blowing되지 않은 eFuse를 통해 흐르는 읽기 전류를 $100{\mu}A$ 이내로 억제하여 신뢰성을 확보하였다. 그리고 OTP 셀 어레이 사이즈를 1행 ${\times}$ 32열과 4행 ${\times}$ 8열의 경우에 대해 OTP IP 크기를 비교한 결과 32비트 eFuse OTP의 레이아웃 면적은 각각 $735.96{\mu}m{\times}61.605{\mu}m$ ($=0.04534mm^2$), $187.065{\mu}m{\times}94.525{\mu}m$ ($=0.01768mm^2$)로 4행 ${\times}$ 8열의 32비트 eFuse OTP 사이즈가 1행 ${\times}$ 32열의 32비트 eFuse OTP 사이즈보다 더 작은 것을 확인하였다.

Line Scan Sensor용 저면적 eFuse OTP 설계 (Design of Small-Area eFuse OTP Memory for Line Scan Sensors)

  • 학문초;허창원;김용호;하판봉;김영희
    • 한국정보통신학회논문지
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    • 제18권8호
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    • pp.1914-1924
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    • 2014
  • 본 논문에서는 행의 개수가 열의 개수보다 작은 4행 ${\times}$ 8열의 셀 어레이를 갖는 eFuse OTP IP 설계에서 eFuse의 프로그램 전류를 공급하는 SL 구동 라인을 열 방향으로 라우팅 하는 대신 행 방향으로 라우팅 하므로 레이아웃 면적을 많이 차지하는 SL 구동회로 수를 8개에서 4개로 줄이는 셀 어레이 방식과 코어 회로를 제안하였다. 제안된 셀 어레이 방식과 코어 회로는 32비트 eFuse OTP IP의 레이아웃 면적을 줄였다. 그리고 큰 read 전류에 의해 blowing 되지 않은 eFuse가 EM 현상에 의해 blowing되는 현상을 방지하기 위하여 RWL 구동회로와 BL 풀-업 부하회로에 필요한 V2V($=2V{\pm}10%$) 레귤레이터를 설계하였다. 설계된 4행 ${\times}$ 8열의 32비트 eFuse OTP IP의 레이아웃 면적은 $120.1{\mu}m{\times}127.51{\mu}m$ ($=0.01531mm^2$)로 기존의 eFuse OTP IP의 면적인 $187.065{\mu}m{\times}94.525{\mu}m$ ($=0.01768mm^2$)보다 13.4% 더 작은 것을 확인하였다.

래복자(萊?子)가 알러지성 천식(喘息) 동물모형(動物模型)에서 면역반응(免疫反應)에 미치는 영향(影響) (Effects of Raphani Semen on Immuno-response in the Mouse Model of allergi Asthma)

  • 박기철;박재영;박희수
    • 대한약침학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.135-151
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    • 2002
  • Objective: This study was eanied out to investigate the effects of Raphani Semen on immuno-response in the mouse model of allergic asthma. Methods: In this study, BALB/C mice were divided into 6 groups: Normal (Non-treated group), Control (Group with not treated after allergic sensitization and induction by ovalbumin), Treat I (Group with the oral administration of saline after allergic sensitization and induction by ovalbumin), Treat n (Allergic asthma group treated with acupuncture (BL 13)), Treat III (Allergic asthma group treated with the oral administration of Raphani Semen) and Treat lV (Allergic asthma group treated with the herbal-acupuncture of Raphani Semen (BL 13)). The effect on cytokine was assessed by measuring cytokine (lL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, IFN-r) in bronchoalveoar lavage fluid(ELISA). ResuJts : The results obtained as follows: 1. The production of Interleukin-2 was decreased significantly in Treat I group, Treat n group and Treat IV group as compared with Control group. 2. The production of Interleukin-4 was decreased significantly in Treat I group, Treat II group and Treat IV group as compared with Control group. Among them. the production of Interleukin-4 was decreased remarkably in Treat IV group as compared with other groups. 3. The production of Interleukin-5 was decreased significantly in Treat I group and Treat IV group as compared with Control group. 4. The production of Interleukin-10 was decreased significantly in Treat I group and Treat III group as compared with Control group. 5. The production of Interleukin-12 was all decreased significantly in Treat I group, Treat n group, Treat m group and Treat IV group as compared with Control group. 6. The production of Intelferon- showed no significant changes in Treat I group, Treat n group. Treat m group and Treat Ⅳ group as compared with Control group. Conclusion: These results show that the production of Interleukin-4, 5 was decreased significantly in aJlergic asthma group treated with the herbal-acupuncture of Raph Semen (BL 13), It is known that inactivity of Th2 cell constrained the revelation and controlled hypersenstive action. As to this mechanism, it is suggested that the herbal-acupuncture of Raphani Semen(BL 13) constrained the revelation of allergic asthma.

Essential Oil of Tridax procumbens L Induces Apoptosis and Suppresses Angiogenesis and Lung Metastasis of the B16F-10 Cell Line in C57BL/6 Mice

  • Manjamalai, A.;Kumar, M.J. Mahesh;Grace, V.M. Berlin
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제13권11호
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    • pp.5887-5895
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    • 2012
  • Background: To determine the effect of essential oil obtained from a traditionally used medicinal plant Tridax procumbens L, on lung metastasis developed by B16F-10 melanoma cells in C57BL/6 mice. Materials and Methods: Parameters studied were toxicity, lung tumor nodule count, histopathological features, tumor directed capillary vessel formation, apoptosis and expression levels of $P^{53}$ and caspase-3 proteins. Results: In vitro the MTT assay showed cytotoxicity was found to be high as 70.2% of cancer cell death within 24hrs for $50{\mu}g$. In vivo oil treatment significantly inhibited tumor nodule formation by 71.7% when compared with untreated mice. Formation of tumor directed new blood vessels was also found to be inhibited to about 39.5%. TUNEL assays also demonstrated a significant increase in the number of apoptotic positive cells after the treatment. $P^{53}$ and caspase-3 expression was also found to be greater in the essential oil treated group than the normal and cancer group. Conclusions: The present investigation showed significant effects of the essential oil of Tridax procumbens L in preventing lung metastasis by B16F-10 cell line in C57BL/6 mice. Its specific preventive effect on tumor directed angiogenesis and inducing effect on apoptosis warrant further studies at the molecular level to validate the significance of Tridax procumbens L for anticancer therapy.

유아의 분변으로부터 항리스테리아 활성의 Bifidobacterium 속 균주의 분리 및 동정 (Isolation and Identification of the Antilisterial Bifidobacterium Isolates from the Infants Fecal Samples)

  • 김송이;김기환;윤순용;윤성식
    • Journal of Dairy Science and Biotechnology
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    • 제24권1호
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    • pp.19-28
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    • 2006
  • 유아 분변으로부터 분리한 52 균주는 그람 양성균인 Listeria monocytogenes KCCM 40307$^T$에 대하여 항균활성이 있었고 그 중에서도 선별 균주 A24의 항균활성이 45% 이상으로 가장 높았다. Bifidobacterium longum A24의 생육 및 항균 물질 생산을 검토하였을 때 균체의 생육은 28시간 배양 시 최고에 도달하였고 항균 활성은 36시 간 배양 시 최고를 나타내었다. 선별균주 A24는 16S rRNA-based molecular typing 결과Bifidobacterium 속 균주임을 확인할 수 있었고 형태학적 ${\cdot}$ 생화학적인 방법으로 검토하여 보았을 때 Bifidobacterium longum으로 판단되었으며, 16s rDNA sequencing 결과 최종적으로 Bifidobacterium longum로 동정 되었으며 이것을 Bifidobacterium longum A24로 명명하였다. Bifidobacterium longum A24의 항균 활성 물질은 균체의 생육이 가장 좋은 28시간 배양에서가 아니라 그보다 늦은 36시간 배양에서 최고를 나타내었고 그 이후로는 활성이 감소하는 경향을 보였다. 이것은 Bifidobacterium longum A24이 생성하는 항균 활성 물질이 bacteriocin과 같은 2차 대사 산물임을 암시하는 결과로 해석된다.

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