In July, 2009, proso millet (Panicum miliaceum), which showing the bacterial brown stripes on leaf sheaths, was collected in Miryang in Korea. Symptoms were systemic brown necrotic stripe lesions on the leaf sheaths and stems, and these symptoms were found in the entire field. The causal agent isolated from symptomatic plants was identified as an Acidovorax avenae subsp. avenae, based on its biochemical and physiological characteristics and also confirmed by the Biolog data and 16S rRNA gene sequence analysis. Also it caused hypersensitive response (HR) when it was inoculated onto the tobacco and tomato. It caused similar symptoms when inoculated onto proso millet. This is the first report of A. avenae subsp. avenae, the causal agent of bacterial brown stripe of the proso millet in Korea.
Paenibacillus polymyxa is a plant growth-promoting rhizobacterium (PGPR) which can be used for biological control of plant diseases. Several bacterial strains were isolated from rotten roots of Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) that were in storage. These strains were identified as P. polymyxa, based on a RAPD analysis using a P. polymyxa-specific primer, cultural and physiological characteristics, an analysis utilizing the Biolog system, gas chromatography of fatty acid methyl esters (GC-FAME), and the 16S rDNA sequence analysis. These strains were found to cause the rot in stored ginseng roots. Twenty-six P. polymyxa strains, including twenty GBR strains, were phylogenetically classified into two groups according to the ERIC and BOX-PCR analyses and 16S rDNA sequencing, and the resulting groupings systematized to the degrees of virulence of each strain in causing root rot. In particular, highly virulent GBR strains clustered together, and this group may be considered as subspecies or biovar. The virulence of the strains seemed to be related to their starch hydrolysis enzyme activity, but not their cellulase or hemicellulase activity, since strains with reduced or no starch-hydrolytic activity showed little or no virulence. Artificial inoculation of the highly virulent strain GBR-1 onto the root surfaces of Korean ginseng resulted in small brown lesions which were sunken and confined to the outer portion of the root. Ginseng root discs inoculated in vitro or two-year-old roots grown in soil drenched with the inoculum developed significant rot only when the inoculum density was $10^{6}-10^{7}$ or more colony-forming units (CFU) per ml. These results suggest that P. polymyxa might induce ginseng root rot if their population levels are high. Based on these results, it is recommended that the concentration of P. polymyxa should be monitored, when it is used as a biocontrol agent of ginseng, especially in the treatment of stored roots.
Kim, Man-Chul;Jang, Tae-Won;Harikrishnan, Ramasamy;Jang, Ik-Soo;Yeo, In-Kyu;Jeong, Joon-Bum;Heo, Moon-Soo
Korean Journal of Microbiology
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v.45
no.1
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pp.58-62
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2009
From the course of screening of useful enzyme producing microorganism from marine sedimentary layer, we isolated 2 lipase producing strains and their lipase producing activities were tested. 16S rDNA sequence analysis showed that they were Gram-positive bacteria grouped on Janibacter sp. An excellent lipase producing strain, Janibacter sp. LI-68 and J. sp. LI-80 identified by 16S rDNA analysis and biochemical methods (BIOLOG), was further studied its lipase producing characteristics. The optimum initial pH, temperature and the optimum cultral time for the enzyme production on MA medium were 8, $30{\sim}40^{\circ}C$ and 96 h, respectively.
Kim Hye-Ryun;Baek Seung-Hee;Seo Min-Jae;Ahn Byung-Hak
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.34
no.3
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pp.244-249
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2006
In order to select the best strains to have the feasibility of Cheonghju brewing, 10 wild type yeast strains from 300 different types of Nuruk were investigated on their ethanol resistance, resistance to glucose and flocculation. The amounts of alcohol, organic acids, and volatile compounds, Brix, pH were also examined for the alcoholic beverages made with the 10 selected strains. Almost all strains showed alcohol production activities in the medium containing 18%(v/v) ethanol and 29%(w/v) glucose. The strains 90-2 showed a higher flocculation activity than other strains. Strains 54-3, 90-2 and 91-5 produced more alcohol than control strain (7.42%(w/w)) when fermented with wild type yeast strains. In addition, alcoholic beverages containing low acetic acid also showed low levels of total acidity. GC/MS analysis of the product showed 4 alcohols, 11 esters and 1 acid as volatile compounds. Selected strains were tentatively identified as Phichia sydowiorum (91-5), Zygosaccharomyces cidri (192-2 and 271-4), and as Saccharomyces cerevisiae (18-2, 54-3, 90-2, 91-2, 98-2, 99-5 and 272-7) by BIIOLOG method.
Chun Jae-Woo;Ma Chae-Woo;Lee Sang-Hyun;Oh Kye-Heon
KSBB Journal
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v.20
no.2
s.91
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pp.116-122
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2005
The feasibility of using bacterial cultures with the ultimate aim for the marine environmental clean-up was explored. The present study reports on the bacterial elimination of nitrogens and phosphorus by strains CK-10 and CK-13 isolated from shrimp farming pond. The strains were identified as genus Bacillus on the basis of BIOLOG test, and designated as Bacillus sp. CK-10 and Bacillus sp. CK-13, respectively. Removal of nitrogens $(NH_4^+,\;NO_2^-,\;or\;NO_3^-)$ or phosphorus $(PO_4^{-3})$ as single N or P source was studied with single cultures under aerobic conditions. Complete elimination of all nitrogens in the concentration range of $100-400{\mu}M$ was achieved in single cultures as well as co-cultures within the given incubation period. Similar results were obtained from the test cultures containing $125-599{\mu}M\;PO_4^{3-}$. Simultaneous removal of all N/P was monitored in the co-cultures. As the results, $400{\mu}M\;NH_4^+\;and\;NO_2^-$ were eliminated within 12hrs and $400{\mu}M\;NO_3^-\;and\;500{\mu}M\;PO_4^{-3}$ were completely disappeared within 36 hrs from the media. The work demonstrated that co-cultures improved the concurrent removal of N/P from the media.
The bacterium NFQ-1 capable of utilizing quinoline (2,3-benzopyridine) as the sole source of carbon, nitrogen and energy was enriched and isolated from soil samples of dead coal pit areas. Strain NFQ-1 was identified as Pseudomonas nitroreducens NFQ-1 by BIOLOG system, and assigned to Pseudomonas sp. NFO-1. Pseudomonas sp. NFQ-1 was used with the concentration range of 1 to 10 mM quinoline. Strain NFQ-1 could degrade 2.5 mM quinoline within 9 hours of incubation. Initial pH 8.0 in the culture was reduced to 6.8, and eventually 7.0 as the incubation was proceeding. 2-Hydroxyquinoline, the first intermediate of the degradative pathway, accumulated transiently in the growth medium. The highest concentration of quinoline (15 mM) in this work inhibited cell growth and quinoline degradation. Pseudomonas sp. NFQ-1 was able to utilize various quinoline derivatives and aromatic compounds including 2-hydroxyquinoline, p-comaric acid, benzoic acid, p-cresol, p-hydroxybenzoate, protocatechuic acid, and catechol. The specific activity of catechol oxygenases was determined to approximately 184.7 unit/㎎ for catechol 1.2-dioxygenase and 33.19 unit/㎎ for catechol 2,3-dioxygenase, respectively. As the result, it showed that strain NFQ-1 degraded quinoline via mainly orthp-cleavage pathway, and in partial meta-cleavage pathway.
The purpose of this work was to investigate the antibacterial activity derived from a lactic acid bacterium, Lactococcus lactis HK-9, isolated from the feces of a 2-day newborn infant. We characterized the physiological and biochemical properties of this strain. Both the BIOLOG system and phylogenetic analysis using 16S rRNA sequencing were utilized for identification, and the strain was assigned to the Lactococcus lactis species, designated as L. lactis HK-9, and registered in GenBank as [GU936712]. We monitored growth rate, production of lactic acid and acetic acid as metabolites, and pH during growth. The maximum concentrations of lactic acid and acetic acid reached 495.6 mM and 104.3 mM, respectively, and the initial pH of the cultures decreased from 7.0 to 4.1 after incubating for 60 h. HPLC was used to confirm the production of lactic acid and acetic acid. Significant antibacterial activity of the concentrated supernatant was demonstrated against Gram-positive (e.g., Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Listeria monocytogenes, MRSA) and Gram-negative (e.g., Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Shigella sonnei) bacteria by the plate diffusion method. The antibacterial activity was sensitive to protease, and the molecular weight of the presumed bacteriocin molecule was estimated to be about 4 kDa by tricine-SDS-PAGE.
The purpose of this work was to investigate the physiological characteristics of Lactobacillus sp. JK-8 isolated from a shrimp aquaculture pond. The strain JK-8 was grown on MRS media, and morphological and physiological characteristics of the strain were examined. The bacterium was identified as a strain of the genus Lactobacillus on the basis of BIOLOG test. Strain JK-8 produced both lactic acid and acetic acid, which were responsible for the pH decrease during growth. Concentrations of lactic acid and acetic acid increased to 192.8 mM and 43.6 mM, respectively, and the initial pH 7.0 of the cultures decreased to 3.8 at the end of incubaction. The bacteriocidal effect against eight target bacteria was examined with 5-fold concentrated culture supernatants. All bacteria tested in this work were completely killed within 3 hrs after treatment with the culture supernatant. The bacteriocidal effects were clearly observed, only when the pH of the culture supernatants were not adjusted. HPLC was used to reslove lactic acid and acetic acid in the culture solution, and GC-MS was used to verify the metabolites.
Auxin-producing antagonistic bacterium K11, which can inhibit Phytophtora capsici, was isolated from a local red-pepper field soil in Gyeong-buk. In order to check for additional PGPR(plant growth promoting rhizobacterium) functions of the strain K11, we confirmed siderophore and cellulase productions by CAS (chrome azurol S) blue agar and CMC plate with congo red, respectively. The strain K11 was identified as Bacillus licheniformis with 98% similarity on 16s rDNA comparison and Biolog analyses. B. licheniformis K11 promoted mung bean adventitious root induction and enhanced root growth of mung bean (160%), pea (150%), and Chinese cabbage (130%), Also, B. licheniformis K11 was able to effectively suppress (63%) P. capsici causing red-pepper blight in the pot in vivo test. Therefore, we could select a triple-functional PGPR which has auxin, siderophore, and cellulase producing ability for effective crops production in organic farming.
A previously unreported bacterial disease on chili pepper (Capsicum annuum L.) seedlings affecting as many as 4% of seedlings was observed in greenhouses in Chihuahua, Mexico (Delicias and Meoqui counties). Initial lesions appeared as irregular small spots on leaves and brown necrosis at margins tips were observed. Later, the spots became necrotic with a chlorotic halo. Advanced disease was associated with defoliation. A Gram negative, rod-shaped bacterium was isolated from diseased chili pepper seedlings. Three inoculation methods revealed that isolated strains produce foliage symptoms, similar to those observed in naturally infected seedlings. Pathogenic strains that caused symptoms in inoculated seedlings were re-isolated and identified to fulfill koch's postulate. Polyphasic approaches for identification including biochemical assays (API 20E and 50CH), carbon source utilization profiling (Biolog) and 16S rDNA, hsp60 and rpoB sequence analysis were done. Enterobacter cloacae was identified as the causal agent of this outbreak on chili pepper seedlings.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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