본 연구는 몽골 마유로부터 분리한 유산균 Enterococcus faecium SA5의 이화학 특성을 파악하고 유산균 E. faecium SA5의 ${\beta}$-glucosidase의 활성과 이를 통한 ginsenoside 전환을 확인하는 것을 목표로 진행되었다. E. faecium SA5는 내산성, 내담즙성을 나타내었으며 4종의 병원성 미생물(Salmonella typhimurium KCTC 3216, Listeria monocytogenes KCTC 3710, Bacillus cereus KCTC 1012, Staphylococcus aureus KCTC 1621)에 항균 활성을 가질 뿐만 아니라 항생물질 colistin, gentamycin, neomycin에 내성을 나타내었다. 또한, E. faecium SA5는 bile salt hydrolase 활성을 나타내어 혈액 내 콜레스테롤 수준 감소 효과가 있다고 사료되며 10% skim milk에서 배양하였을 때, pH가 감소하고 산도 및 생균수가 증가하는 것으로 보아 발효유 스타터로써의 활성을 갖는 것으로 판단되었다. 또한 E. faecium SA5의 ${\beta}$-glucosidase에 의해 ginsenoside $Rb_1$이 ginsenoside $Rg_3-s$와 $Rg_3-r$으로 전환되었음을 TLC 분석을 통해 확인하였다. 따라서 E. faecium SA5는 잠재적인 probiotics로 이를 이용하여 발효유 제조 및 ginsenoside 전환 관련 건강기능식품 개발에 응용할 수 있을 것으로 사료된다.
폐광지역으로부터 quinoline (2,3-benzopyridine)을 유일한 탄소원, 질소원, 그리고 에너지원으로 이용하는 세균 NFQ-1을 농화 배양기법을 통하여 분리하였다. 분리된 세균은 그람음성의 간균으로서 BIOLOG 시험을 통하여 Pseudomonas nitroreducens로 동정되었으며, 본 연구에서는 Pseudomonas sp. NFQ-1으로 명명하였다. Quinoline의 분해는 호기적 조건하의 B-배지에서 Pseudomonas sp. NFQ-1를 이용하여 실시되었다. 균주 NFQ-1 세균은 2.5 mM quinoline을 9시간 이내 완전히 분해하였다. 배양기간 동안 quinoline 분해의 중간대사산물인 2-hydroxyquinoline이 일시적으로 생성되었다가 배양기간 후반부에 사라졌다. 배양의 초기 pH 8.0은 6.8로 감소하다가 배양이 진행됨에 따라 7.0이 되었다. 대상 기질로서 quinoline의 농도가 증가함에 따라 생장곡선에서 유도기가 길어졌으며, 고농도의 quinoline (>15 mM)은 주어진 조건에서 균주의 생장과 quinoline의 분해를 억제하였다. 부가 질소원으로 7.6 mM $(\textrm{NH}_{4})_{2}\textrm{SO}_{4}$의 첨가조건하에서 Pseudomonas sp. NFQ-1은 2-hydroxyquinoline, p-coumaric acid, benzoic acid, p-cresol, p-hydroxybenzoate, protocatechuic acid, catechol 등의 다양한 화합물을 이용할 수 있었으나 일부 화합물들 (예, 6-hydroxyquinoline, 8-hydroxyquinoline, coumarin, indoline, pyridine, lepidine, quinaldine, 4-bydroxycournarin, benzene, salicylic acid, phenol, phthalate)은 탄소원으로 이용되지 못하였다. euinoline의 분해경로를 규명하기 위하여 catechol dioxygenases의 specific activity를 결정하였다. 그 값은 catechol 1,2-dioxygenase에서 약 184.7 U/mg, 그리고 catechol 1,2-dioxygenase에서 약 33.19 U/mg이었다. 그 결과 균주 NFQ-1은 quinoline를 분해하기 위하여 주로 ortho-분해경로를, 그리고 부분적으로 meta-분해경로를 이용하는 것을 보여주었다.
Objectives : This study was carried out to know the effects of Danggwisayeokgaohsuyusaenggang-tang(hereinafter referred to DST) on arthritis induced by collagen on DBA/1 OlaHsd mice. Methods : For this purpose, DST was orally administered to mouse with arthritis induced by collagen II. Cytotoxicity, high performance liquid chromatograph(HPLC) analysis, arthritis index, value of immunocyte in draining lymph node and paw joint, cytokine were measured in vivo. Results : 1. The cytotoxicity against human fibroblast cells(hFCs) was not measured in any concentration. 2. In HPLC analysis, There are high peak patterns at 8 minute(min), 12 min, 35 min, 45 min. 3. The arthritis index was decreased significantly. 4. The degree of arthritis induced damage of joint of DST group is slight compared with control group in histopathologic observation(Hematoxylin and eosin stain(H&E), Masson's trichrome(M-T) staining). 5. In total cell counts of draining lymph node(DLN) and paw joint, the cells in DLN decreased significantly on DST 200 mg/kg and the cells in paw joint decreased significantly on 200 mg/kg and 50 mg/kg. 6. In DLN, $CD4^+/CD25^+$, $CD3^+/CD69^+$, major histocompatibility complex(MHC), class-II/$CD11c^+$ cells decreased significantly on DST 200 mg/kg and 50 mg/kg $CD3^+/CD8^+$ cells decreased significantly on DST 200 200 mg/kg, $CD4^+$, $CD3^+/CD44^+$ cells decreased. 7. In paw joints, $CD4^+$, $CD11b^+/Gr-1^+$ cells decreased significantly on DST 200 mg/kg and 50 mg/kg. 8. In joints, levels of $IL-1{\beta}$, IL-6, $TNF-{\alpha}$, cyclo-oxygenase-2(COX-2), NOS-II were decreased on DST 200 mg/kg and DST 50 mg/kg. 9. In analysing of cytokine in CD3/CD28 activated spleen, IL-17 was decreased significantly, IL-4 was increased significantly $INF-{\gamma}$ was decreased on DST 200 mg/kg. 10. In analysing of cytokine in collagen activated spleen, IL-17 were decreased significantly, IL-4 was increased significantly. Conclusions : This results demonstrated that DST suppressed the inflammatory progression of collagen-induced arthritis(CIA) mice and supported further studies are required to survey continuously in looking for the effective substance and mechanism in the future.
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Yanghyuljanggeungunbo-tang(Yangxuezhuangjinjianbu-tang, YGKT) and electrical acupuncture treatment in spinal cord injury(SCI)-induced rats. Methods : The subjects were divided into 5 groups ; Normal, Control-no treatment after SCI, Experimental I(Exp. I)-taken with YGKT 500 mg/kg $0.5m{\ell}$ daily after SCI. Experimental II(Exp. II)-taken with electrical acupuncture after SCI and Experimental III(Exp. III)-taken with YGKT 500 mg/kg $0.5m{\ell}$ and electrical acupuncture after SCI. After each operation, the present author observed cytological changes, the motor behavior recovery and nerve regeneration by analysis of the motor behavior tests, EMG, hematological(AST, ALT, WBC), histological and immunological changes. Rats were tested by Motor behavior test at 1st, 3rd, 7th, 14th and 21st day. Results : 1. All the experimental groups were improved compared with control group in the motor behavior tests including Tarlov test, Basso-Beattle-Bresnahan locomotor rating scale, modified inclined plane test, open field test, grid walk test and narrow beam test. Especially Exp. III was significantly improved among other groups. 2. In EMG test, H and M wave were significantly increased in Exp. III. 3. All the experimental groups were significantly decreased compared with control group in AST, ALT and WBC. 4. NGF, BDNF and Trk B of spinal cord gray matter in all the experimental groups were increased compared with control group. Especially, Exp. III was more effective. 5. In histological observations, muscle contraction and denaturation of gastrocnemius muscle of all the experimental groups were inhibited. Especially, those of Exp. III was more effective. On the observations of liver and kidney, cell atrophy and apoptosis of all the experimental groups were decreased compared with control group. Especially, those of Exp. III was more effective. Conclusions : It can be suggested that YGKT and electrical acupuncture may improve motor behavior, EMG, hematological, histological and immunological findings in SCI-induced rats. Especially, combination of these two treatments will be somewhat better in spinal nerve recovery and motor function improvement.
본 논문에서는 먼저 음성과 데이터 트래픽의 혼합으로 해당 트래픽 채널간의 송/수신 전력 차이가 발생하게 되는 CDMA 순방향 링크 환경에 빠른 폐회로 전력제어 방식을 도입함으로써 발생하는 장단점을 분석하고, 시스템자원 할당 관점에서 기존의 빠른 전력제어 방식의 성능을 개선시킬 수 있는 Zone-based 전력제어 방식을 제안한다. 제안하는 Zone-based 전력제어 방식은 이동국의 위치 분포에 따라 데이터 트래픽의 전력과 전송률을 동시에 제어하는 메커니즘이다. 즉 제안하는 방식은 CDMA 시스템의 빠른 전력제어 방식에 기반을 두고 있으며 동시에 비실시간 데이터 트래픽의 전송률을 적응적으로 제어하여 전력 이득을 얻기 때문에 해당 채널에 소비되는 전력량 이득을 취할 수 있고 결과적으로는 간섭량 생성을 줄일 수 있는 방안이다. 제안하는 방식은 시스템에 유입되는 간섭량이 커지는 상황에서도 고속 트래픽의 서비스 영역을 셀의 전체 영역으로 확보해줌은 물론 저속 트래픽의 QoS도 지속적으로 유지해줄 수 있는 장점을 갖는다. 시뮬레이션을 통한 실험 결과들은 제안하는 방식이 기존 방식에 비하여 상당한 성능 개선이 있음을 보여주었다. 특별히 고속 데이터 트래픽의 수가 증가하는 상황에서 제안하는 전력제어 방식은 전력 소비량과 트래픽 처리율 관점에서 기존 전력제어 방식보다 훨씬 우수한 성능을 보였다.
Objectives : The present study was carried out to investigate the effect of Hyperici Japonici Herba on the proliferation and activation of eosinophils which were prepared from lung cells of asthma-induced mice by ovalbumin(OVA) treatment. Methods : C57BL/6 mouse was exposed to OVA three times a week for 6 weeks. The mouse lung tissues were dissected out, chopped and dessiciated with collagenase(1${\mu}g$/ml). Eosinophils were activated by rIL-3/rmIL-5 co-treatments. The lung cells were treated with extract of Hyperici Japonici Herba(EHH), incubated for 48 hr at $37^{\circ}C$, and analyzed by flow cytometer. ELBA, RT-PCR, immunocytochemistry stain. Results : The cell number ratio of granulocyte, $CD3e^-$/$CCR3^+$, $CD3e^+$/$CD69^+$, $CD4^+$, $CD23^+$/$B220^+$ cells was increased in rmIL-5/rIL-3 treated control group compared to the normal group. Cells numbers in the experimental animal group treated with EHH was all decreased. In ELISA analysis, IL-4, IL-5, IL-13 protein levels and histamine release level were greatly increased in the control group compared to the normal animal group, then significantly decreased in the experimental group with 100 ${\mu}g$/ml of EHH treatment. In RT-PCR analysis, the HT value of IL-4, IL-5, IL-13, CCR3, Eotaxin were increased in the control group compared to the normal animal group, then decreased in the experimental group with 100 ${\mu}g$/ml of EHH treatment. And eosinophil proliferation levels were 18847${\pm}$1527(cpm) in the control group, 4676${\pm}$972(cpm) in the positive control group, and 8675${\pm}$159(cpm), 11352${\pm}$1005(cpm), 14325${\pm}$677(cpm) in the experimental group with 100 ${\mu}g$/ml, 10 ${\mu}g$/ml, 1 ${\mu}g$/ml of EHH treatment. Conclusions : The present data suggested that Hyperici Japonici Herba may have an effects on the inhibition of parameters associated with asthma responses in eosinpophils, and thus implicate the possibility for the clinical application of EHH.
The maintenance of a viable pregnancy has long been viewed as an immunological paradox. The deveolping embryo and trophoblast are immunologically foreign to the maternal immune system due to their maternally inherited genes products and tissue-specific differentiation antigens (Hill & Anderson, 1988). Therefore, speculation has arisen that spontaneous abortion may be caused by impaired maternal immune tolerance to the semiallogenic conceptus (Hill, 1990). Loss of recall antigen has been reported in immunosuppressed transplant recipients and is associated with graft survival (Muluk et al., 1991; Schulik et al., 1994). Progesterone $(10^{-5}M)$ has immunosuppressive capabilities (Szekeres-Bartho et al., 1985). Previous study showed that fertile women, but not women with unexplained recurrent abortion (URA), lose their immune response to recall antigens when pregnant (Bermas & Hill, 1997). Therefore, we hypothesized that immunosuppressive doses of progesterone may affect proliferative response of lymphocytes to trophoblast antigen and alloantigen. Proliferative responses using $^3H$-thymidine ($^3H$-TdR) incorporation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) to the irradiated allogeneic periperal blood mononuclear cells as alloantigen, trophoblast extract and Flu as recall antigen, and PHA as mitogen were serially checked in 9 women who had experienced unexplained recurrent miscarriage. Progesterone vaginal suppositories (100mg b.i.d; Utrogestan, Organon) beginning 3 days after ovulation were given to 9 women with unexplained RSA who had prior evidence of Th1 immunity to trophoblast. We checked proliferation responses to conception cycle before and after progesterone supplementation once a week through the first 7 weeks of pregnancy. All patients of alloantigen and PHA had a positive proliferation response that occmed in the baseline phase. But 4 out of 9 patients (44.4%) of trophoblast antigen and Flu antigen had a positive proliferative response. The suppression of proliferation response to each antigen were started after proliferative phase and during pregnancy cycles. Our data demonstrated that since in vivo progesterone treated PBMCs suppressed more T-lymphocyte activation and $^3H$-TdR incorporation compare to PBMCs, which are not influenced by progesterone. This data suggested that it might be influenced by immunosuppressive effect of progesterone. In conclusion, progesterone may play an important immunological role in regulating local immune response in the fetal-placental unit. Furthermore, in the 9 women given progesterone during a conception cycle, Only two (22%) repeat pregnancy losses occured in these 9 women despite loss of antigen responsiveness (one chemical pregnancy loss and one loss at 8 weeks of growth which was karyotyped as a Trisomy 4). These finding suggested that pregnancy loss due to fetal aneuploidy is not associated with immunological phenomena.
신규 미백 소재 개발을 위하여 tyrosinase의 활성을 억제하는 천연물과, alpha-melanocyte stimulating hormone ($\alpha$-MSH)을 저해하는 펩타이드를 결합한 소재를 고체상 합성법으로 제조하였다[1,2]. Tyrosinase 활성 억제 효능이 있는 천연유래물질을 기존 연구를 바탕으로 선정하였으며, 이중에서 상업화 된 물질 17종에 대해 Mushroom Tyrosinase 활성 억제 효과를 측정하여, 그 중 caffeic acid, coumaric acid를 선별하였다. 펩타이드는 $\alpha$-MSH 분비를 억제하며, tyrosinase활성을 억제하는 것으로 알려진 melanostatin을 선정하였으며[3-5], PLG-$NH_2$ (Proline-Leucine-Glycine-$NH_2$) 중에서 유도체화 수율의 저하 원인으로 예상되는 Proline (Pro)의 서열을 다른 아미노산으로 변경하면서 선별된 천연물인 coumaric acid와 caffeic acid에 도입하였다. 또한 최종물질의 원가를 고려하여 acid-amide 형태를 acid형태로 전환한 유도체를 합성하였다. 이들 펩타이드 유도체들에 대해서 B16F1 melanoma cell에서의 멜라닌 생성 억제 효능을 평가하여 유도체화된 물질이 기존의 천연유래물질이나 펩타이드에 비하여 높은 저해효과를 가지는 것을 확인하였다.
Liver fibrosis is a prepathological state wherein damaged liver tissues in chronic liver diseases, such as hepatitis, are not repaired to normal tissues, but converted to fibrous tissue. 5-(2-Pyrazinyl)-4-methyl-1,2-dithiol-3-thione (oltipraz), a cancer chemopreventive agent, is effective against a wide variety of chemical carcinogens. Recently, we reported that oltipraz inhibits liver fibrogenesis (Kang et al., 2002). In the present study, the effects of oltipraz in combination with dimethyl-4,4'-dimethoxy-5,6,5',6'-dimethylene dioxybiphenyl-2,2'-dicarboxylate (DDb) on dimethylnitrosamine (DMN)-induced liver fibrogenesis were assessed in rats. Oltipraz (30 mg/kg body weight, po, 3 times per week for 4 weeks) was found to inhibit the increases in plasma ALT, AST and bilirubin by DMN, whereas DDB (30 mg/kg body weight, po, 3 times per week for 4 weeks) attenuated the increases in the plasma ALT and bilirubin. The lowered plasma protein and albumin contents in DMN-treated rats were completely restored by oltipraz, but not by DDB. DDB decreases liver cell injury and inflammation through inhibition of nuclear factor-kB. DMN increased the accumulation of liver collagen, as indicated by the increase in the 4-hydroxyproline content in liver homogenates, which was reduced by treatment with oltipraz, but not by DDB. Given the differential effect between oltipraz and DDB, the potential enhancement of antifibrotic efficacy by the drugs was assessed in the animal model. Despite the minimal effect of DDB on DMN-induced fibrogenesis, DDB (5-25 mg/kg), administered together with oltipraz (25-5 mg/kg), showed an additive protective effect against hepatotoxicity and fibrosis induced by DMN, which was shown by the blood chemistry parameters and histopathological analysis. The adequate composition ratio of oltipraz to DDB was 5:1. These results provide information on the pharmaceutical composition, comprising of oltipraz and DDB as the active components, for the treatment and/or prevention of liver fibrosis and cirrhosis.
Background: Although Korean Red Ginseng (KRG) has been traditionally used for a long time, its anti-inflammatory role and underlying molecular and cellular mechanisms have been poorly understood. In this study, the anti-inflammatory roles of KRG-derived components, namely, water extract (KRG-WE), saponin fraction (KRG-SF), and nonsaponin fraction (KRG-NSF), were investigated. Methods: To check saponin levels in the test fractions, KRG-WE, KRG-NSF, and KRG-SF were analyzed using high-performance liquid chromatography. The anti-inflammatory roles and underlying cellular and molecular mechanisms of these components were investigated using a macrophage-like cell line (RAW264.7 cells) and an acute gastritis model in mice. Results: Of the tested fractions, KGR-SF (but not KRG-NSF and KRG-WE) markedly inhibited the viability of RAW264.7 cells, and splenocytes at more than 500 mg/mL significantly suppressed NO production at $100{\mu}g/mL$, diminished mRNA expression of inflammatory genes such as inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, tumor necrosis factor-${\alpha}$, and interferon-${\beta}$ at $200{\mu}g/mL$, and completely blocked phagocytic uptake by RAW264.7 cells. All three fractions suppressed luciferase activity triggered by interferon regulatory factor 3 (IRF3), but not that triggered by activator protein-1 and nuclear factor-kappa B. Phospho-IRF3 and phospho-TBK1 were simultaneously decreased in KRG-SF. Interestingly, all these fractions, when orally administered, clearly ameliorated the symptoms of gastric ulcer in HCl/ethanol-induced gastritis mice. Conclusion: These results suggest that KRG-WE, KRG-NSF, and KRG-SF might have anti-inflammatory properties, mostly because of the suppression of the IRF3 pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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