Newcastle disease virus (NDV) 감염된 baby hamster kidney (BHK) 세포에서 합포체 형성은 세포막 표면으로의 수송된 바이러스 당단백질 hemagglutinin-neuramidase (HN)에 의해 일어난다. HAU 값은 추출물의 농도가 25.0과 $3.2{\mu}g/mL$ 사이에서는 현저하게 감소하였으나, NDV 감염된 HAD (%)는 $25.0{\mu}g/mL$ 농도에서 광범위한 흡착능의 감소를 나타내 바이러스 당단백질의 세포내 생합성은 저해되지 않았다. 그러므로, 약용식물인 빈랑 메탄올 추출물이 바이러스 당단백질의 세포막으로의 수송과 함께 합포체 형성을 저해하여 항바이러스 작용을 하였다. 또한 빈랑 추출물의 저해활성을 조사한 결과 ${\alpha}$-glucosidase에 대한 추출물의 $IC_{50}$은 $10.0{\mu}g/mL$이었으며, ${\alpha}$-mannosidase, ${\beta}$-glucosidase, ${\beta}$-mannosidase에 대한 빈랑 추출물의 $IC_{50}$은 각각 20.0, 40.0, $80.0{\mu}g/mL$로 나타나 ${\beta}$-type glycosidases 보다 ${\alpha}$-type glycosidases에 대한 효소활성 저해능이 우수하였다. 따라서 $IC_{50}$농도에서는 세포내에서 당단백질 생합성은 저해되지 않으며 당단백질의 수송을 저해하는 것으로 판단되었으며 향후 항바이러스 관련 작용기작의 연구가 필요하다고 판단된다.
Objective: To find biological functions such as antibacterial and antioxidant activities in several tropical plants and to investigate the possibility of antibiotic substitute agents to prevent and treat diseases caused by pathogenic bacteria. Methods: Plants such as Poncirus trifoliata fruit (Makrut), Zingiber officinale Rosc (Khing), Areca catechu L. (Mak), Solanum melongena L. I (Makkhuayao), and Solanum melongena L. II (Makhurapro) were extracted by methanol, n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. The free radical scavenging activities were measured using 2-diphenyl-2-picryl hydrazyl photometric assay. Antibacterial activities with a minimum inhibitory concentration (MIC) were observed by agar diffusion assay against pathogenic strains of Escherichia coli, Burkholderia sp., Haemopilus somnus, Haemopilus parasuis, Clostridium perfringens, and Pantoea agglomerans. Results: Poncirus trifoliata fruit methanol extract showed antibacterial activities against gram-negative and gram-positive pathogens. Additionally, this showed the strongest antibacterial activity against Burkholderia sp. and Haemopilus somnus with MIC $131{\mu}g/mL$, respectively. Areca catechu L. water extract showed antibacterial activities against Burkholderia sp., Haemopilus somnus, and Haemopilus parasuis. The MIC value for Haemopilus parasuis was $105{\mu}g/mL$ in this. Antioxidant activity of Zingiber officinale Rosc n-hexane extract showed 2.23 mg/mL effective concentration 50% ($EC_{50}$) value was the highest activity among tropical plants extracts. Total polyphenol content in Zingiber officinale Rosc methanol extract was $48.4{\mu}g/mL$ and flavonoid content was $22.1{\mu}g/mL$ showed the highest values among tested plants extracts. Conclusion: Taken together, these results suggest that tropical plants used in this study may have a potential benefit as an alternative antibiotics agent through their antibacterial and antioxidant activities.
Urease plays an important role in the urea metabolism and the effect of urease activity on human and environment is enormous. For instance, urease acts as a virulence factor of the urinary and gastrointestinal tracts infections in human and animal, being involved in kidney stone formation, catheter encrusatation, pyelonephritis, ammonia encephalopathy, hepatic coma, and urinary tract infections. Widespread urease activity in soil induces a plant damage due to ammonia toxicity and pH increase. Therefore, urease activity regulation through urease inhibitors would lead to an enhanced efficiency of urea nitrogen uptake in plants and to the improved therapeutic strategies for ureolytic bacterial infections. To search for new inhibitory compounds on urease activity from herbs, MeOH extracts of herbs were screened. Among of them, the MeOH extracts of Areca catechu exhibited an excellent inhibitory effect on urease activity. Two compounds were isolated from the ethyl acetate fraction by the activity guided fractionation. Their chemical structures were identified as (+)-catechin(compound I) and allantoin(compound II) by spectroscopic evidence, respectively. Compound I showed a stronger inhibitory effect on urease activity than compound II.
One hundred and seventy crude drugs were screened for prolyl endopeptidase (PEP) inhibitors. Among them, 80% methanolic extract of 18 medicinal plants such as Polygonum cuspi data, Sanguisorba officinalis, Eugenia caryophyllata, Rubus coreanus, Cinnamomum cassia (Cassiae Cortex and Cinammomi Ramulus), Rheum palmatum, Ulmus pumila, Sorbus commixta, Areca catechu, Uncaria sinensis, Terminalia chebula, Caesalpinia sappan, Nelumbo nucifera, Machilus thunbergii, Paeonia moutan, Elscholtzia patrini and Cynomorium coccineum inhibited more than 70% of PEP activity at a concentration of 40 ppm. The active principles of P. moutan, M. thunbergii, T chebula, A. catechu, S. commixta, R. palmatum, R. coreanus, E. caryophyllata and P. cuspidata were transferred into organic solvents, which showed more than 75% inhibition at 5 ppm.
To confirm the effects of binlang(Areca catechu L.) and tansen(Salvia miltriorrhiza bung) on the mutagenicity induced by hydrogen peroxide, SOS Chromotest with Escherichia coli PQ37 and Ames test with Salmonella typhimurium TA104 were perlormed. Methanol-soluble parts of their water extracts showed high inhibitory effect against the mutagenicity of hydrogen peroxide in two bacterial mutation assays. Step-wise fractionation of methanol-soluble part from tansen was done using ethyl acetate, butanol and water. Among these fraction was further partitioned by Sephadex LH-20 column chromtography, and 6 subfractions were obtained. The fraction III showed the strongest inhibitory effects against the mutagenic activities induced by hydrogen peroxide. The inhibition rates of fraction III at concentration of 500$\mu\textrm{g}$/assay were 28%, 30% and 15% against 4-NQO, MNNG and B(a)P, respectively. But the mutagenic potency of AFB1 was increased.
본 연구는 우리나라의 작물 재배지에서 문제가 되고 있는 뿌리혹선충의 환경친화적 방제를 위하여 30종의 약용식물(32 시료)을 선발하여 당근뿌리혹선충 2령충과 알에 대한 살선충 효과와 난 부화억제 효과를 검정하였다. 약용식물 추출물들 중 원화(Daphne genkwa), 건강(Zingiber officinale), 정향(Eugenia caryophyllata), 사군자(Quisqualis indica) 등이 1,000 ppm 농도에서 당근뿌리혹선충 J2 유충에 대하여 80%이상의 살선충 활성을 보였다. 이들 중 원화와 사군자는 125 ppm에서도 91 %와 99%의 살선충 활성을 보였다. 추출방법(메탄올 또는 헥산, 온수추출, 냉수 추출)에 따라 살선충 효과에 차이를 보였는데 건강과 사군자는 1,000 ppm 온수추출물 처리 시 각각 99%의 살선충 효과를 보였고, 냉수추출물에서는 36%와 98%의 살선충 효과를 보였다. 사군자는 모든 추출물 처리에서 높은 살선충 활성을 보였다. 빈랑(Areca catechu)과 원화, 청주항(Desmodium caudatum), 흑축(Pharbitis nil), 사군자, 건강 추출물을 이용하여 당근뿌리혹선충 알의 부화억제 효과를 조사한 결과 1,000 ppm 농도에서 원화와 흑축, 사군자 처리는 처리 7, 14, 21 일째까지 낮은 부화 수를 나타내었다. Pot와 인삼 밭에서 1,000 ppm 농도의 사군자 메탄올 추출물 처리 시 토양 중의 당근뿌리혹선충 밀도를 유의하게 감소시켰다. 따라서 사군자 추출물은 당근뿌리혹선충의 환경친화적 방제에 활용 가능할 것으로 판단된다.
This study was to evaluate the single dose toxicity of Arecae Semen (AS) in male and female ICR mice. Aqueous extracts of AS (Yield = 13.15%) were administered as an oral dose of 2,000, 1,000 and 500 mg/kg (body weight) according to the recommendation of Korea Food and Drug Administration (KFDA) guidelines. Animals were monitored for the mortality and changes in body weight, clinical signs and gross observation during 14 days after dosing, upon necropsy; organ weight and histopathology of 12 principle organs were examined. We could not find any mortality, clinical signs, and changes in the body and organ weight except for diarrhea. Diarrhea were observed in all three different dosage groups of male mice, and in 2000 mg/kg groups of female mice within 48hrs after administration. In addition, no AS extract related abnormal gross findings and changes in histopathology of principle organs were detected except for some sporadic accidental findings. Although the 50% lethal dose and approximate lethal dose of AS aqueous extracts in female and male mice were detected as over 2,000 mg/kg - the limited highest dosage recommended by KFDA guidelines. It should be carefully used in clinics because AS may be induced severe digestive tract disorders.
The seeds of Areca catechu L. has been used for the treatment of the diseases caused by parasites in East Asia. As a part of a research for standardization of crude drugs, we have determined the content of arecoline in the seeds of Arecae Semen purchased from various regions of Korea. The HPLC method for quantitative analysis of arecoline in Arecae Semen was established and reproducible results and chromatographic isolation of arecoline was accomplished successively. It suggested that the content of arecoline in Arecae Semen was $0.2726\;{\pm}\;0.05532%$.
Ras proteins play an important role in intracellular signal transduction pathways involved in cell growth and the mutated twas genes have been found in thirty percent of human cancers. Ras proteins (H-, K- and N-Ras) are small guanine nucleotide binding proteins that undergo a series of posttranslational modifications including the farnesylation onto cysteine 186 at C-terminal of Ras by farnesyl protein transferase (FPTase). This is a mandatory process for retention of transforming ability. Therefore, inhibitors of FPTase have a promising to be effective antitumor agents. In our screening program for FPTase inhibitors, the methanol extracts of 193 plants were screened for the inhibitory activity against FPTase partially purified from the rat brain. Extracts of 7species plants including Areca catechu, Saururus chinensis, Curcuma longa, Artemisa princeps, Paeonia suffruticosa, Spatholobus suberectus, Cinnamomum cassia, Cinnamomum japonicum inhibited more than 60% of FPTase activity at a concentration of $100\;{\mu}g/ml$.
In order to evaluate anti -oxidant activities and protective effect against oxidatve damage, DPPH radical scavenging activity and lipid peroxidation inhibitory activity were measured among methanol extracts prepared from natural medicinal plants. Fourteen natural medicinal plants which were reported to have anti -oxidative or anti-inflammatory effects were selected based on our previous report. In addition to the total methanol extracts, n-hexane, dichloromethane, ethylacetate, n-butanol and water fractions were prepared from each total extract. DPPH radical scavenging assay was performed against 14 total extracts and all samples showed dose-dependent activities in various extent. Among those, 6 samples, methanol extracts of Euryale ferox, paeonia suffruticosa, Areca catechu var. dulcissima, Cinnamomun cassia, Alpinia katsumadai and Betula platyphlla var. japonica showed IC$\sub$50/ value lower than 6.0 $\mu\textrm{g}$/ml. The highest DPPH radical scavenging activity was found in ethylacetate fraction of paeonia suffruticosa with IC$\sub$50/ value of 1.1 $\mu\textrm{g}$/ml. Analysis of lipid peroxidation inhibitory activity on hydrogen peroxide-induced oxidative damage in Chinese hamster lung fibroblast (V79-4) cells revealed that the highest inhibitory effect was observed in methanol extract of Betula platyhpylla var. japonica. Lipid peroxidation inhibitory activity was observed as a dose-dependent manner in all samples used in this study. Among fraction samples, ethylacetate fraction of Alpinia katsumadai had the strongest inhibitory activity with IC$\sub$50/ value of 0.9 $\mu\textrm{g}$/ml.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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