The objective of this study was to evaluate the efficiency of sperm cryosurvival in boar sperm separated by Percoll containing antioxidant enzymes. The boar semen was collected into a pre-warmed ($37^{\circ}C$) thermos bottle by gloved-hand method and was separated by 65% Percoll with superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione (GSH) before freezing. The frozen sperm was thawed at $38.5^{\circ}C$ for 45 sec in water-bath for sperm characteristic analysis. The sperm were estimated with SYBR14/PI double staining for viability, FITC-PNA/PI double staining for acrosome reaction, Rhodamine123/PI double staining for mitochondrial integrity and were analyzed using flow cytometry. In results, sperm viability, acrosome reaction and mitochondrial integrity were improved in separated sperm groups compared with unseparated sperm by Percoll (UP) group. Especially, viability was significantly higher in sperm separated by Percoll containing 400 IU CAT group compared with other groups (P<0.05). And acrosome reaction was decreased in sperm separated by Percoll with 300 IU SOD, 400 IU CAT and 0.5 mM GSH groups compared with other groups, however, there were no significantly difference mitochondrial integrity among sperm separated by Percoll with antioxidant enzymes. In conclusion, we suggest that use of Percoll containing antioxidant enzymes for sperm separation will be beneficial for sperm cryopreservation in pigs.
식물배양세포의 항산화기구 이해를 위하여 다양한 식물종에서 유도된 100종의 배양세포주를 대상으로 항산화효소 활성 및 저분자항산화물질을 분석하였다. 배양세포의 SOD와 POD 활성은 식물체에 비해 매우 높았으며, 특히 고구마와 카사바 배양세포는 각각 POD와 SOD 활성이 가장 높아, 항산화효소의 생산 및 항산화기구 해석에 좋은 소재임이 시사되었다. 배양세포의 평균 ascorbate 함량은 식물체에 비해 1/100 수준으로 낮았으며, glutathione 함량은 배양세포가 식물체보다 약 2-3배 높았다. 흥미롭게도 ascorbate와 glutathione의 환원형과 산화형의 비율은 식물종에 따라 큰 차이가 있음이 밝혀졌다. 결론적으로 식물배양세포는 높은 산화적인 스트레스에서 배양되는 것이 생화학적으로 확인되어 항산화물질 생산 및 항산화기구 연구에 좋은 소재임이 시사되었다.
The effect of salicylic acid(SA) on antioxidant system and protective mechanisms against UV-B induced oxidative stress was investigated in cucumber(Cucumis sativus L.) leaves. UV-B radiation and SA were applied separately or in combination to first leaves of cucumber seedlings, and dry matter accumulation, lipid peroxidation and activities of antioxidant enzymes were measured in both dose and time-dependant manner. UV-B exposure showed reduced levels of fresh weight and dry matter production, whereas SA treatment significantly increased them. SA noticeably recovered the UV-B induced inhibition of biomass production. UV-B stress also affected lipid peroxidation and antioxidant enzyme defense system. Malondialdehyde(MDA), a product of lipid peroxidation, was greatly increased under UV-B stress, showing a significant enhancement of a secondary metabolites, which may have antioxidative properties in cucumber leaves exposed to UV-B radiation. Combined application of UV-B and SA caused a moderate increase in lipid peroxidation. These results suggest that SA may mediate protection against oxidative stress. UV-B exposure significantly increased SOD, APX, and GR activity compared with untreated control plants. Those plants treated with 1.0 mM SA showed a similar pattern of changes in activities of antioxidant enzymes. SA-mediated induction of antioxidant enzyme activity may involve a protective accumulation of $H_2O_2$ against UV-B stress. Moreover, their activities were stimulated with a greater increase by UV-B+SA treatment. The UV-B+SA plants always presented higher values than UV-B and SA plants, considering the adverse effects of UV-B on the antioxidant cell system. ABA and JA, second messengers in signaling in response to stresses, showed similar mode of action in UV-B stress, supporting that they may be important in acquired stress tolerance. Based on these results, it can be suggested that SA may participates in the induction of protective mechanisms involved in tolerance to UV-B induced oxidative stress.
UV-B 처리가 봉선화 식물에 미치는 영향과 식물의 생화학적 방어반응을 조사하고자 3주간 UV-B (11.34 kJ $m^{-2}$) 조사 실험을 수행하였다. UV-B 처리에 의해 봉선화의 엽면적 및 건물중이 약 40% 정도 감소하였으며, MDA 함량은 50% 정도 증가한 것으로 나타났다. Glutathione 및 ascorbate acid 함량은 UV-B에 의해 산화형이 증가하고 환원형이 감소하였다. 봉선화 잎에는 주로 3종류의 polyamine이 존재하였으며, 3종류 모두 UV-B에 의해 증가하는 것으로 나타났다. 항산화효소인 SOD, AP, GR 및 GP의 활성이 UV-B 처리에 의해 크게 증가하였다. 이상의 결과로 볼 때 UV-B 증가는 식물체내 산화스트레스를 일으키며, 이에 대해 식물의 생화학적 방어반응이 작용하는 것으로 사료된다.
부추의 in viuo에서의 항산화 및 극-노화효과를 평가하기 위해 ICR 마우스에 2%, 5% 부추식이를 13개월간 급여하면서 항산화 시스템에 미치는 영향을 조사하였다. 간에서의 지질과 산화 정도를 TBARS 값으로 측정한 결과 연령 증가에 따라 지질과산화는 증가하였으나 각 군들간에 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 단백질 카르보닐 함량에 있어서는 대조군에 비해 부추식이군에서 유의적으로 낮은 값을 나타내어 부추식이는 조직 단백질 산화를 강력하게 억 제하였고 부추식이군 사이에서는 유의차가 나타나지 않았다 이로써 조직의 과산화를 측정하는데 TBARS보다 단백질 카르보닐 값이 더 예민한 방법임을 알 수 있었다. 간에서의 항산화 효소계 활성을 측정한 결과 SOD 활성은 대조군에서 5개월까지 증가하다가 이후로는 감소하였으나 부추식이군에서는 7개월까지 증가하는 경향을 나타내었는데 활성이 대조군에 비해 300% 이상 현저하게 높았다. GSH-Px 활성은 대조군의 경우 9개월까지 증가하다 감소하였으나 부추 첨가 식이군에서는 가령에 따라 계속 그 활성이 증가하였고 5% 부추첨가 식이군의 효소 활성이 가장 높아 대조군보다 약 200% 높은 활성을 나타내었다. Catalase 활성은 대조군의 경우 연령에 따라 활성의 변화가 없었고 부추 식이군에서 그 활성이 대조군에 비해 유의적으로 높았다. 간조직 내의 총 글루타치온 함량은 대조군에 비해 부추식 이군에서 유의적으로 높은 값을 나타내어 13개월령에서 대조군보다 118% 정도 증가하였다. 따라서 부추 속에 함유된 항산화 물질들과 함황 화합물들이 ICR 마우스의 가령에 따른 항산화 시스템을 적극적으로 보호함을 확인하였다.
맹종죽 추출물 코팅쌀 식이가 동맥경화 유발 토끼의 항산화 및 항동맥경화 효과에 미치는 영향을 평가하기 위해 NZW계 토끼에게 고콜레스테롤 식이에 대나무 코팅쌀을 첨가한 식이를 16주간 급여하면서 항산화 시스템에 미치는 영향을 조사하였다. 간, 비장, 신장 및 심장 조직에서의 지질과산화 정도를 TBARS 값으로 측정한 결과 간과 비장에서는 대조군에 비해 맹종죽 코팅쌀 첨가식이군에서 지질과산화가 효과적으로 억제되었고 신장과 심장에서는 대조군에 비해 대나무 코팅쌀 첨가 식이군에서 낮았으나 유의적인 차이는 관찰되지 않았다. 단백질 카르보닐 함량에 있어서도 대조군에 비해 맹종죽 코팅쌀 첨가 식이군에서 현저히 낮은 값을 나타내어 맹종죽 코팅쌀 첨가 식이는 조직 단백질 산화를 상당히 억제하였다. 간에서의 항산화 효소계 활성을 측정한 결과 total SOD, Cu$.$Zn-SOD 및 Mn-SOD 활성은 맹종죽 코팅쌀 첨가 식이군에서의 활성이 대조군에 비해 현저하게 높았으며 GSH-Px, catalase 활성 또한 같은 경향을 나타내었다. GR 활성은 대조군에 비해 대나무 코팅쌀 첨가 식이군에서 높았으나 유의적이 차이는 관찰되지 않았다. 간 조직 내의 총 글루타치온 함량은 대조군에 비해 대나무 코팅쌀 첨가 식이군에서 유의적으로 높은 값을 나타내어 대조군보다 27% 정도 증가하였다. 따라서, 맹종죽 코팅쌀 내에 함유된 항산화 물질들에 의해 동맥 경화 유발 토끼의 항산화 시스템을 적극적으로 보호함을 확인하였다.
Silymarin은 간 보호, 항산화, 항염, 항암 등 다양한 생리 활성을 나타내는 것으로 보고되었고, 본 연구에서는 산화 스트레스에 대한 항산화 잠재력과 그 기전을 세포 생존력 및 활성산소종 생성 분석과 Western blot 분석을 통해 RAW 264.7 세포에서 알아보고자 하였다. Silymarin은 세포 독성 없이 lipopolysaccharide(LPS)에 의해 자극된 세포 내 활성산소종을 농도 의존적으로 소거하였다. 그리고 항산화 효과를 보여주는 것으로 알려진 제2상 효소 중 하나인 heme oxygenase (HO)-1의 발현은 silymarin 처리에 의해 강하게 유도되었다. 또한 silymarin 처리는 항산화 효소의 전사인자인 nuclear factor-erythroid 2 p45-related factor (Nrf)-2의 발현을 유의미하게 유도하였고, 이는 HO-1 발현증가와 일치하였다. 세포내 산화와 환원 항상성 조절과 관련된 신호 전달물질인 mitogen activated protein kinase (MAPK)와 phosphoinositde 3-kinase (PI3K)의 인산화 정도 또한 Western blot으로 분석하였고, 그 결과 silymarin 은 p38 MAPK 인산화에 의해 HO-1 발현을 유도하는 것으로 나타났다. 그리고 tert-butyl hydroperoxide (t-BHP)를 이용하여 세포내 지질 과산화를 유도함으로써 silymarin에 의해 유도된 HO-1의 항산화 효과를 확인하였다. 그 결과 silymarin 처리에 의해 세포사멸이 유의적으로 억제되었고, p38의 선택적 저해제를 처리한 세포군에서는 t-BHP에 의해 유의적인 세포사멸이 발생하였다. 이 결과를 통해 silymarin은 Nrf-2/p38 MAPK 신호 전달 경로를 통해 HO-1의 발현을 유도하고, 이를 통해 항산화 효과를 높이는 것을 확인할 수 있었다.
N-nitrosoethylurea(NEU)에 의한 지질 과산화물의 함량 변화와 알데히드 대사효소 및 항산화효소의 활성변화를 쥐 간세포에서 측정하였다. 알데히드 대사효소로는 alcohol dehydrogenase와 aldehyde dehydrogenase가 사용되었고 항산화효소로는 glutathione transferase, superoxide dismutase, glutathione reductase와 catalase가 사용되었다. 쥐 간세포에 다양한 농도의 NEU를 처리한 후 지질 과산화물의 함량변화를 측정하였다. 그 결과 6.25mM NEU에 의하여 지질 과산화물의 함량이 최대 2.5배 증가하였다. Alcohol dehydrogenase의 활성은 NEU처리에 의하여 대조군보다 최대 2.3배 증가하였고 aldehyde dehydrogenase의 활성은 약 2배 증가하였다. 전암성 병변의 지표로 이용되는 glutathione transferase와 catalase의 경우 NEU처리에 의한 활성증가가 미미하였다. 그러나 superoxide dismutase의 활성은 최대 1.5배 증가하였고, glutathione reductase의 활성은 약 3배 증가하였다. 그러므로 superoxide dismutase와 g1utathione reductase의 활성증가가 NEU의 독성에 대한 세포내 항산화 방어과정에서 중요한 역할을 할 것으로 추측된다
This study was performed to examine the feeding effects of $Angelica$$keiskei$$Koidz$ (AK) and its processed products on serum, liver, and body fat content and the expression of antioxidant genes in rats fed a high fat diet. AK and its processed products were added at 3-5% to a high fat diet and fed to adult rats for 6 weeks. In experiment 1 (EXP 1), the rats were fed with one of six diets including a control diet (normal fat), high fat diet (HF), and HF + AK additives groups (four groups). In experiment 2 (EXP 2), the rats were separated into three groups of HF, HF + AK whole leaves, and HF + fermented juice (FS) + squeeze (SA). Body weight was not different among the groups in either experiment. The liver weight was lower in the FS and SA groups compared to that in the other groups (P<0.05). Serum luteolin was higher in the AK and processed products groups compared to that in the HF group (P<0.05). Gene expression of the antioxidative enzymes catalase and glutathione-s-reductase in the liver was higher in the AK processed products group than that in the other groups (P<0.05). The results suggest that the intake of AK and its processed products increased the expression of antioxidant enzymes in animals fed a high fat diet, reduced hepatic cholesterol content, and increased the effective absorption of luteolin.
Jeewanthi, Renda Kankanamge Chaturika;Kim, Myeong Hee;Lee, Na-Kyoung;Yoon, Yoh Chang;Paik, Hyun-Dong
한국축산식품학회지
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제37권1호
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pp.62-70
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2017
The aim of this study was identifying a suitable food grade enzymes to hydrolyze whey protein concentrates (WPCs), to give the highest bioactivity. WPCs from ultrafiltration retentate were adjusted to 35% protein (WPC-35) and hydrolyzed by enzymes, alcalase, ${\alpha}-chymotrypsin$, pepsin, protease M, protease S, and trypsin at different hydrolysis times (0, 0.5, 1, 2, 3, 4, and 5 h). These 36 types of hydrolysates were analyzed for their prominent peptides ${\beta}-lactoglobulin$ (${\beta}-Lg$) and ${\alpha}-lactalbumin$ (${\alpha}-La$), to identify the proteolytic activity of each enzyme. Protease S showed the highest proteolytic activity and angiotensin converting enzyme inhibitory activity of IC50, 0.099 mg/mL (91.55%) while trypsin showed the weakest effect. Antihypertensive and antioxidative peptides associated with ${\beta}-Lg$ hydrolysates were identified in WPC-35 hydrolysates (WPH-35) that hydrolyzed by the enzymes, trypsin and protease S. WPH-35 treated with protease S in 0.5 h, responded positively to usage as a bioactive component in different applications of pharmaceutical or related industries.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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