최근 extended-spectrum $\beta-lactamase$ 생산 임상 균주의 급속한 증가와 확산은 매우 심각한 문제를 야기하고 있다. 이에 국내에서 extended-spectrum $\beta-lactamase$ 생산 임상 균주의 발생율을 파악하고자 국내 한 대학병원에 입원한 환자로부터 대장균을 분리하여 항생제 감수성 검사를 실시하였다. 충 233균주 중 184균주 $(78.9\%)$가 ampicillin에 대해 내성을 나타냈으며, 80균주$(34.3\%)$가 cephalothin에, 93균주$(39.9\%)$가 gentamicin에, 64균주$(27.5\%)$가 norfloxacin에 대해 내성을 나타내었다. 이중 17균주$(7.3\%)$가 double disk synergy test에 의해 양성반응을 나타낸 것으로 확인되었고, 이들에 대해서 6가지 항생제에 대한 최소 억제 농도를 추가적으로 시험한 결과, 13 균주가 4가지 이상의 다른 계열의 항생제에 대한 다중 약제 내성인 것으로 나타났다. Isoelectric focusing gel electrophoresis에 의한 pI값과 DNA 염기서열을 분석한 결과 5균주가 TEM-1,1균주가 TEM-15,1 균주가 TEM-20,4균주가 TEM-52,2균주가 TEM-1과 AmpC, 1균주가 TEM-1과 OXA-30,1 균주가 TEM-1과 OXA-33,1 균주가 TEM-1, CTX-M-3, AmpC, 그리 고 1 균주가 AmpC를 생산하는 것으로 나타났으며, SHV를 생산하는 균주는 없었다. 이들의 항생제내성 유전자가 전달되는지 확인한 결과 동물로부터 분리된 대장균 (CCARM No.1203)에 extended-spectrum $\beta-lactamase$생산 유전자가 전달되는 것을 확인하였다. Random amplified polymorphic DNA와 pulsed field gel electrophoresis분석을 사용하여 genomic DNA에 대한 유전형을 분석한 결과 균주간의 유전적 연관성은 매우 낮은 것으로 나타나 한 병원에서 발견되는 균주는 clonal spread에 의한 것이라는 일반적인 보고와 다른 결과를 얻었다.
본 연구에서는 국내 자생 해조류인 모자반의 항균활성을 조사하기 위하여 paper disc법과 MIC(Minimum Inhibitory Concentration) test를 이용하여 식품의 부패 및 식중독 관련 미생물 16종에 대한 항균활성을 조사하였다. 그 결과 물추출물에서는 항균효과를 나타내지 않았으나 에탄올 추출물은 4 mg/mL 농도에서 실험에 사용된 모든 그람 양성균, Saccharomyces cerevisiae와 Candida tropicalis에 대해 항균활성을 나타내었는데, 특히 Bacillus subtilis, Clostridium perfringens, Listeria inoccua 및 Listeria monocytogenes 및 C. tropicalis에 대하여 높은 항균활성을 보였다. 그러나 그람 음성균, Candida albicans 및 곰팡이 2종에는 항균 효과가 나타나지 않았다. 모자반 에탄올 조추출물에 대한 MIC test를 실시한 결과, 0.0063% 농도에서 C. perfringens와 C. tropicalis의 생육을 억제하였으며, 0.0125% 농도에서 L. monocytogenes의 생육을 억제하였다. 또한 0.025% 농도에서 B. subtilis, L. inoccua 및 Lactobacillus plantarum의 생육을 효과적으로 억제하였다. 열 및 pH 안정성 실험결과, $121^{\circ}C$에서 15분간 열처리와 pH 2-10 처리에도 항균활성이 감소하지 않는 것으로 보아 모자반 에탄올 추출물은 열과 pH에 비교적 안정하다고 사료된다.
본 연구는 소나무 부위별 추출물을 피부염 유발 균주에 적용함으로써 항균 및 항진균 활성을 측정하고 그 결과를 보고하고자 하였다. 먼저 paper disc 법을 이용하여 항균 및 항진균 실험에서 송엽, 송절 및 송화 에탄올 추출물은 대부분의 피부염 균주에 대하여 항균활성을 나타내었으나, 물 추출물은 모든 피부염 균주에 대하여 항균활성을 나타내지 않았다. 송엽 및 송절 70% 에탄올 추출물이 T. rubrum을 제외한 모든 피부염 균주에 대하여 항균활성을 나타내었으며, 송화 70% 에탄올 추출물은 C. tropicalis와 P. acens에 대해서만 항균활성을 보였다. 소나무 essential oil의 항균 및 항진균 활성을 측정한 결과, C. albicans, C. tropicalis, T. rubrum에 대해 1.5~3 mm 정도의 생육저해환을 형성하여 높은 항진균 활성을 나타내었다. 이러한 결과를 바탕으로 소나무 부위별 70% 에탄올 추출물에 활성을 나타내었던 피부염 관련 균주 6종에 대한 최소생육 저해 농도를 측정한 결과, 송엽 70% 에탄올 추출물은 C. tropicalis 및 P. acnes에 대하여 0.002%와 0.0063%의 낮은 농도에서 항균효과가 나타났고 송절 70% 에탄올 추출물은 0.003% 농도에서 P. acnes의 생육을 억제하여 뛰어난 효과를 보였다. 소나무 essential oil의 최소생육 저해 농도를 측정한 결과, 0.025% 농도에서 C. albicans와 C. tropicalis의 생육을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다. 송엽 essential oil은 C. albicans, C. tropicalis, T. rubrum에 대해 항진균 효과가 있는 것으로 확인되었다. 이상의 결과를 통해 소나무 부위 중 송엽과 송절 70% 에탄올 추출물에서 항균 및 항진균 효과가 뛰어났으며, 특히, 송절 70% 에탄올 추출물이 S. aureus, S. epidermidis, P. acnes에 대해 더 높은 항균 효과를 나타내었다. 따라서, 소나무 송절과 송엽 에탄올 추출물과 essential oil은 Candida 속과 P. acnes에 대한 억제효과가 크게 나타나 이와 관련한 피부질환 개선에 효과가 클 것으로 사료된다.
Shiga toxin (Stx)-producing Escherichia coli (STEC) strains can cause broad spectrum of human disease, including diarrhea, hemorrhagic colitis, and the life-threatening hemolytic uremic colitis (HUS). We examined 868 samples was taken from bovine feces and carcass from January to December 2008 in Seoul. Twenty two (9.5%) shiga toxin -producing Escherichia coli were isolated from the 230 of bovine feces, and two (0.31%) were isolated from the 638 of carcasses. Serotype of E. coli isolates were O157 (10, 41.6%), O26 (10, 41.6%), O111 (1, 4.2%) and UT (3, 12.6%). In PCR, the isolates displayed three different stx gene combination (stx1 [2, 8.4%]), stx2 [3, 12.6%] and stx1 and stx2 [19,87.5%]). The eaeA and hlyA gene were found in 11 (45.8%) of the 24 strains. Saa gene was present only one strains (4.2%). Toxin typing using reverse passive latex agglutination test showed the same result in VT 1. But it showed different result in VT 2. In antimicrobial susceptibility test, all isolates were sensitive to amikacin, amoxicillin/clavulanic acid, ciprofloxacin and colistin. Eighteen strains (75.0%) of 24 isolates showed the multi-resistant patterns with over 3 drugs. PFGE was performed after the genomic DNA of twenty four isolates was digested with Xba I. the 24 isolates showed 7 (A~G) PFGE type.
본 연구는 고삼, 정향 및 neem 추출물에 대한 항균 항충력을 규명하여 벼 친환경 재배 포장에서 병해충 방제제로의 이용가능성을 검토하고자 수행하였다. 식물추출물에 대한 잿빛곰팡이균에 대한 항균력 실험결과 정향추출물이 가장 높은 활성을 나타내었으며, 벼멸구에 대한 살충력은 고삼추출물이 가장 높은 효과를 보였는데, 고삼추출물의 300배 희석용액에서도 100%의 살충 방제가를 나타내었다. 정향과 고삼추출물에 각각 목초액(10%)과 유화전착제(10%)를 혼합하여 친환경 벼 재배포장에 살포하고 병해충 발생률을 조사한 결과, 정향추출물 처리구의 병해 방제가는 무처리구(100%) 대비 50.8%, 해충 발생은 70.6%를 나타내었고, 고삼추출물 처리구는 무처리(100%) 대비 병해 방제가는 43.1%, 해충 방제가는 79.1%로 나타났다. 결론적으로, 고삼 및 정향 추출물은 벼 친환경 재배 시 병해는 약 50%, 충해는 약 70%를 감소시킬 수 있어서 친환경농자재로의 활용 가능성을 확인하였다.
Objectives : Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has a cephalosporin and beta-lactam antibiotic-resistant strains. MRSA is one of the major pathogens causing hospital infection and the isolation ratio of MRSA has gradually increased. Consequently, increased resistance to antibiotics is causing serious problems in the world. Therefore, there is a need to develop alternative antimicrobial drugs for the treatment of infectious diseases. Methods : The antibacterial activities of Ipyo-san were evaluated against 2 strains of MRSA and 1 standard Methicillin-susceptible staphylococcus aureus (MSSA) strain by using the disc diffusion method, minimal inhibitory concentrations (MIC) assay, colorimetric assay using MTT test, checkerboard dilution test and time-kill assay performed under dark. Results : The MIC of Ipyo-san water extract against S. aureus strains ranged from 1000 to $2,000{\mu}g/ml$, so we confirmed that it had a strong antibacterial effect. Also, the combinations of Ipyo-san water extract and conventional antibiotics exhibited improved inhibition of MRSA with synergy effect. We suggest that Ipyo-san water extract against MRSA has antibacterial activity so it has potential as alternatives to antibiotic agents. For the combination test, we used Triton X-100 (TX) and DCCD for measurement of membrane permeability and inhibitor of ATPase. As a result, antimicrobial activity of Ipyo-san water extract was affected by the cell membrane. Conclusions : We suggest that the Ipyo-san water extract lead the treatment of bacterial infection to solve the resistance and remaining side-effect problems that are the major weak points of traditional antibiotics.
Objectives In this study, we investigated the antimicrobial activity of a 70% ethanol extract of Maneung-hwan (MEH), which is prescribed by practitioners of oriental medicine for use against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Methods The antibacterial activity of MEH against MRSA strains was evaluated using the disc diffusion method, broth microdilution method (minimal inhibitory concentration, MIC), checkerboard dilution test, and time-kill test. The mechanism of action of MEH was investigated by bacteriolysis using detergents or ATPase inhibitors Additionally, mRNA and protein expression were investigated by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot assay, respectively. Results The MIC of MEH was 25~1,600 ㎍/mL against all the tested bacterial strains. We showed that MEH extract exerts strong antibacterial activity. In the checkerboard dilution test, the fractional inhibitory concentration index of MEH in combination with antibiotics indicated synergism or partial synergism against S. aureus. The time-kill study indicated that the growth of the tested bacteria was considerably inhibited after a 24-h treatment with MEH and selected antibiotics. To measure the cell membrane permeability, MEH (3.9 ㎍/mL) was combined with Triton X-100 (TX) at various concentrations N,N-dicyclohexylcarbodimide (DCCD) was also tested as an ATPase inhibitor. TX and DCCD cooperation against S. aureus exhibited synergistic action. Accordingly, the antimicrobial activity of MEH in the context of cell membrane rupture and ATPase inhibition was assessed. Additionally, the expression of genes and proteins associated with resistance was reduced after exposing MRSA to MEH. Conclusions These results suggest that MEH possesses antibacterial activity and acts as a potential natural antibiotic against MRSA.
Disk method에 의한 예비 실험 결과 Listeria monocytogenes ATCC 19111, 19112, 19113, 19114 및 15313에 대하여 성장억제 효과가 있었던 방기 및 감초의 75% ethanol 추출물을 농도별로 tryptic soy broth에 첨가하고 각 균주를 증식, 그 저해 정도를 비교하였다. 방기는 실험대상 균주 중 L. monocytogenes ATCC 19111 및 19114에 부분적으로 효과가 있었고 첨가 농도에 따라 그 증식 저해 정도는 비례하였다. 감초 추출물은 실험 대상 5균주 모두에 강한 항균성을 보였으며 대부분 100ppm 첨가에서도 $12{\sim}48$시간 동안 완전히 증식을 억제 하였으며 500ppm 첨가 수준에서는 모든 균에 대하여 완전 증식 억제 현상을 보여 우수한 증식 억제제로 확인되었다. 특히 L. monocytogenes ATCC 19113의 경우 100ppm 첨가에서도 48시간 까지 완전 성장 억제가 가능하였다.
Objectives The objective of this study is to determine the antimicrobial effect of Daehwanggyeonu-san(Dahwangqianniu-san,DGE) and synergistic effects with antibiotics oxacillin, ampicillin, and gentamicin against Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus(MRSA). Methods The antibacterial activity of DGE extract was evaluated againest MRSA strains by using the Disc diffusion method, broth microdilution method(minimal inhibitory concentration; MIC), checkerboard dilution test. The checkerboard dilution test was used to examined synergetic effect of oxacillin, ampicillin, gentamicin, ciprofloxacin with DGE extract. Results DGE showed antimicrobial activity against MRSA with an MIC value of $125{\sim}250{\mu}g/mL$. In the checkerboard test, the interation of DGE with all tested antibiotics produced almost synergy or partial synergy against MRSA. Conclusions This study shows that DGE reduced the MICs of several antibiotics tested, and a remarkable antibacterial effect of DGE, with membrane permeability enhancers and ATP synthase inhibitors. This study can be a valuable source for the development of a new drug with low MRSA resistance.
Methicillin resistance Staphylococcus aureus (MRSA) is a gram-positive bacterium, the most commonly isolated bacterial human pathogen. JiYu-san is one of the natural products used to treat diseases in the folk recipe. In this study, we investigated the antimicrobial activity of EtOH 70% extracts of JiYu-san (JYS) against MRSA. The antibacterial activity of JYS against MRSA strain was evaluated using minimum inhibitory concentration (MIC), checkerboard dilution test, and time-kill assay. The effect of JYS on the immune mechanism of MRSA was confirmed through cell membrane permeability tests and energy metabolism tests, and the antibacterial activity mechanism was performed using qRT-PCR and western blot. As a result, in the antibacterial test of JYS, the MIC was measured to be 1.9~1000 ㎍/mL, and synergistic or showed a partial synergistic effect. In addition, JYS showed antibacterial activity in a combination test with DCCD or TX-100. In a study on the mechanism of action of antibacterial activity, it was found that JYS suppressed MRSA resistance genes and proteins. These results suggest that JYS has antibacterial activity and provides great potential as a natural antibiotic by modulating the immune mechanism against MRSA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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