A continuous enrichment culture procedure was used to isolate bacteria from various soil sources capable of suppressing large patch disease of turfgrass. Six isolates consistently suppressed large patch in turfgrass, and ranged in the spectrum of extracellular enzymes that they expressed. The best disease- suppressing isolate, TBM912, expressed protease, CMCase, and pectinase activity and inhibited the growth of Rhizectonin solani and Betrytis cinerea in vitro. Here we show that this strain also produces an antibiotic that was identified by TLC, SDS-PACE and HPLC analysis as lipopeptide.
Kim, Jin-Cheol;Park, Gyung-Ja;Kim, Hyun-Ju;Kim, Heung-Tae;Ahn, Jong-Woong;Cho, Kwang-Yun
The Plant Pathology Journal
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v.18
no.2
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pp.102-105
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2002
A strain of Acremonium strictum, the mycoparasite of Botrytis cinerea, showed strong antifungal activities both in vitro and in vivo against several phytopathogenic fungi. An antifungal substance was purified from the liquid cultures of A. strictum and identified as verlamelin by instrumental analyses. Verlamelin exhibited in vitro antifungal activity against some phytopathogenic fungi such as Magnaporthe grisea, Bipolaris maydis, and Botrytis cinerea, while it was net active against all the bacteria tested. In viva, verlamelin exhibited strong protective and curative activities, particularly against barley powdery mildew. At 100 μg/ml, it inhibited the development of barley powdery mildew with control values of more than 90% in 7-day protective and 2-day curative applications. This is the first report on the production of verlamelin by Acremonium species.
Papyriflavonol A (PapA), a prenylated flavonoid [5,7,3',4'-tetrahydroxy-6,5'-di-(${\gamma},{\gamma}$-dimethylallyl)-flavonol], was isolated from the root barks of Broussonetia papyrifera. Our previous study showed that PapA has a broad-spectrum antimicrobial activity against pathogenic bacteria and fungi. In this study, the mode of action of PapA against Candida albicans was investigated to evaluate PapA as an antifungal agent. The minimal inhibitory concentration (MIC) values were 10~25 ${\mu}g/ml$ for C. albicans and Saccharomyces cerevisiae, Gram-negative bacteria (Escherichia coli and Salmonella typhimurium), and Gram-positive bacteria (Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus). The kinetics of cell growth inhibition, scanning electron microscopy, and measurement of plasma membrane florescence anisotrophy revealed that the antifungal activity of PapA against C. albicans and S. cerevisiae is mediated by its ability to disrupt the cell membrane integrity. Compared with amphotericin B, a cell-membrane-disrupting polyene antibiotic, the hemolytic toxicity of PapA was negligible. At 10~25 ${\mu}g/ml$ of MIC levels for the tested strains, the hemolysis ratio of human erythrocytes was less than 5%. Our results suggest that PapA could be a therapeutic fungicidal agent having potential as a broad spectrum antimicrobial agent.
Trichoderma spp. are the aggressive causal agents for green mold disease on oyster mushroom (Pleurotus spp.) cultivation. Antifungal bacteria (KATB 99121, KATB 99122 and KATB 99123 strains) were isolated from the compost for Pleurotus ostreatus. Among these bacterial strains, KATB 99121 strain showed an excellent inhibitory activity to the pathogens for green molds such as T. harzianum, T. viride and T. hamatum and an animal pathogen, Candida albicans, but did not affect on the culture of Pleurotus ostreatus (2209, Chunchu 2 and Wonhyung strains). KATB 99121 strain secreted amylolytic, proteolytic and cellulolytic exoenzymes. KATB 99122 and KATB 99123 strains excreted amylolytic, proteolytic, cellulolytic, lipolytic exoenzymes and showed ${\beta}$-glucosidase activity. Further studies will be conducted on the development of microbial fungicides using the antagonistic bacteria for the control of green mold disease on Pleurotus spp.
Propolis has been used as a natural remedy in folk medicine worldwide. The antibacterial, antiviral, antifungal, and antiprotozoal aspects of its antimicrobial properties have been widely investigated. However, few studies focused on its applications in dentistry. Many dental diseases are related to various microorganisms in the oral cavity. In this study, we assessed the antimicrobial activity of Korean propolis extract, collected from 6 different regions, on oral pathogenic microorganisms. The propolis samples, collected from 6 different regions (P1: Uijeongbu, P2: Ansan, P3: Hongcheon, P4: Iksan, P5: Gwangju, and P6: Sangju), were dissolved in ethanol at two different concentrations (10 and 50 mg/ml). Three oral bacteria (Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus, and Enterococcus faecalis) and one fungus (Candida albicans) were activated in general broth for 24 hours. Microorganisms were diluted and spread onto agar plates, onto which sterilized 6 mm filter papers with or without each propolis sample were placed. After 24 hours of incubation, clear zones of inhibition were observed. All tests were performed in triplicate. The propolis samples showed significant antibacterial and antifungal activity on oral pathogenic microorganisms; in addition, low-concentration groups showed outstanding antimicrobial efficacy on the 4 different microorganisms. Among the samples, P6 had significantly higher antibacterial activity than that of the others against three different bacteria. In particular, a high concentration of P6 showed a significant antifungal effect. In conclusion, we confirmed that Korean propolis has an inhibitory effect on oral pathogenic bacteria and fungi. Therefore, we suggest the possibility of developing oral medicine and oral care products based on Korean propolis.
The aim of this study was to isolate a potential multifunctional biocontrol agent from bacteria for control of multiple plant diseases as an alternative to fungicides. A total of 201 strains were isolated from soil undamaged by repeated cultivation in Sunchang and their ability to produce antibiotics, siderophores and extracellular enzymes such as protease, cellulase and amylase was investigated. Selected strain SCS3 produced cellulose, protease and amylase. This strain also produced siderophores and showed excellent antifungal activity against various phytopathogens. SCS3 was identified as Bacillus subtilis using 16S rRNA sequencing, and named Bacillus subtilis SCS3. Finally, physiological and biochemical characteristics of B. subtilis SCS3 were examined. From the results, B. subtilis SCS3 was found to be a useful multifunctional biocontrol agent against various phytopathogens.
BACKGROUND: Chemical fungicides not only may pollute the ecosystem but also can be environmentally hazardous, as the chemicals accumulate in soil. Biological control is a frequently-used environment-friendly alternative to chemical pesticides in phytopathogen management. However, the use of microbial products as fungicides has limitations. This study isolated and characterized a three-antifungal-enzyme (chitinase, cellulase, and ${\beta}$-1,3-glucanase)-producing bacterium, and examined the conditions required to optimize the production of the antifungal enzymes. METHOD AND RESULTS: The antifungal enzymes chitinase, cellulase, and ${\beta}$-1,3-glucanase were produced by bacteria isolated from an sawmill in Korea. Based on the 16S ribosomal DNA sequence analysis, the bacterial strain AM50 was identical to Streptomyces sp. And their antifungal activity was optimized when Streptomyces sp. AM50 was grown aerobically in a medium composed of 0.4% chitin, 0.4% starch, 0.2% ammonium sulfate, 0.11% $Na_2HPO_4$, 0.07% $KH_2PO_4$, 0.0001% $MgSO_4$, and 0.0001% $MnSO_4$ at $30^{\circ}C$. A culture broth of Streptomyces sp. AM50 showed antifungal activity towards the hyphae of plant pathogenic fungi, including hyphae swelling and lysis in P. capsici, factors that may contribute to its suppression of plant pathogenic fungi. CONCLUSION(S): This study demonstrated the multiantifungal enzyme production by Streptomyces sp. AM50 for the biological control of major plant pathogens. Further studies will investigate the synergistic effect, to the growth regulations by biogenic amines and antifungal enzyme gene promoter.
Secondary metabolites in the culture filtrates of lactic acid bacteria offer varied chiral moieties, making them a valuable resource for drug design scaffolding. Our previous methodology included using a combination of anion exchange resins, Amberlite IRA-67 and Purolite A420S, to purify significant quantities of Lactobacillus plantarum LBP-K10 peptidyl compounds. However, current experimental evidence regarding the impact of native culture extracts and/or filtrates on pathogenic fungi in vivo/in vitro is insufficient. This study analyzed the antifungal properties of two different probiotic cultures: the CH2Cl2-extracted filtrate of Chinese cabbage kimchi (CH2Cl2-extracted CCKWLB and CH2Cl2-extracted CCKWOLB) and the non-extracted filtrate of Chinese cabbage kimchi (non-extracted CCKWLB and non-extracted CCKWOLB). The samples were divided into two groups: one group was inoculated with probiotics while the other group remained non-inoculated. Filtrates from both experimental groups were utilized for antifungal assays. The treatments employing CCKWLB, with an initial inoculation of Lb. plantarum LBP-K10 as a starter, demonstrated significant antifungal activity under various experimental conditions. Our study offers new perspectives on the antifungal properties of CH2Cl2-extracted kimchi filtrates, which are naturally produced by lactobacilli. The efficacy of antifungal compounds is supported by substantial evidence demonstrating their efficient uptake by cells and the antifungal properties exerted by metabolites.
This study was conducted to select the promising antifungal microoganisms for biological control of wet bubble, Mycogone perniciosa. Ninty one isolates of fungi, 342 isolates of bacteria, and 556 actinomycetes were isolated from mushroom composts and soils, were subjected to primary screening test on agar medium base for their antimicrobial spectra. Among them, 12 bacteria and 71 actinomycetes were selected. Among the antibiotic producing microoganisms, 5 cultures were selected on the basis their antibiotic activities on casing soil with Benlate nontolerence M. perniciosa. Finally, AJ-117, AJ-136 and AK-139 were selected as microoganism with antifungal activity against two strains of M. perniciosa.
This study was performed to investigate thermophilic bacteria from soil having broad antifungal spectrum against Rhizoctonia solani, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici, and Botrytis cinerea. One isolate selected could resist heat shock of $60^{\circ}C$ for one hour, and had broad antifungal activity in dual culture assay against all tested fungal pathogens and was identified as Bacillus amyloliquefaciens Y1 using 16S rRNA gene sequence. Further investigation for antifungal activity of bacterial culture filtrate (BCF) and butanol crude extract (BCE) of various concentrations showed broad spectrum antifungal activity and fungal growth inhibition significantly increased with increasing concentration with highest growth inhibition of 100% against R. solani with 50% BCF and 11 mm of zone of inhibition against R. solani with 4 mg BCE concentration. Treatment of butanol crude extract resulted in deformation, lysis or degradation of C. gloeosporioides and P. capsici hyphae. Furthermore, B. amyloliquefaciens Y1 produced volatile compounds inhibiting growth of R. solani (70%), C. gloeosporioides (65%) and P. capsici (65-70%) when tested in volatile assay. The results from the study suggest that B. amyloliquefaciens Y1 could be a biocontrol candidate to control fungal diseases in crops.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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