A competitive direct enzyme-linked immunosorbent assay (cdELISA) was developed for selective and rapid detection of a glycopeptide antibiotic, teicoplanin (TP). TP was conjugated to bovine serum albumin (BSA) for use as an immunogen. Repeated subcutaneous injections of 0.5 mg of the conjugate was effective in generating specific polyclonal antibody (PAb) toward TP in rabbits, as determined by cdELISA. TP-horseradish peroxidase conjugate (TP-HRP) was used as an enzyme marker. The cdELISA was developed based on a competition reaction between TP-BSA PAb and TP-HRP conjugate. The TP-BSA PAb was highly sensitive (detection limit, 0.3 ng/ml and specific toward teicoplanin, showing no cross-reactivity to other glycopeptide antibiotics including vancomycin. There were good correlations ($r^2$=0.84 and 0.76, respectively) between cdELISA and microbiological assay, and high-performance liquid chromatography. The cdELISA system developed in this work is expected to be useful not only for selective and rapid monitoring of TP but also for study of TP pharmacokinetics.
Staphylococcus aureus is a major pathogen for cattle, causing various forms of subclinical and clinical mastitis and could be a causative agent of food poisoning, it produces various superantigenic exotoxins which have a great public health significance. A total of 72 S. aureus clinical isolates from dairy farms located in Kyunggi Province Korea were examined for the species identification by biochemical method, and for the detection of $\beta$-lactamase, enterotoxin and other exotoxins genes by PCR. The results of species identification by biochemical method agreed with those of PCR done with species specific primer STA-AU. $\beta$-lactamase is an enzyme closely associated with the resistance to antibiotic penicillin, which is an important means of treatment of mastitis, all the isolates were positive for the presence of genes encoding $\beta$-lactamase, which were reproduced in penicillin susceptibility disc assay. Six types of toxin genes, Staphylococcal enterotoxin (SE)A, SEB, SEC, SEE, toxic shock syndrome toxin (TSST-1) and exfoliative toxin A (ET A) were detected in 72 isolates by PCR associated genotypic method in this study, none of the isolates carried the genes for enterotoxin D (SED) and exfoliative toxin B (ETB). The occurrence rate of exotoxin genes rated as 12.5%, and the precision of the PCR identification results has been confirmed using the reference strains.
Many bacteria monitor their population density and control the expression of specialized gene sets in response to bacterial cell density based on a mechanism referred to as quorum sensing. In all cases, quorum sensing involves the production and detection of extracellular signaling molecules, auto inducers, as which Gram-negative and Gram-positive bacteria use most prevalently acylated homoserine lactones and processed oligo-peptides, respectively. Through quorum-sensing communication circuits, bacteria regulate a diverse array of physiological functions, including virulence, symbiosis, competence, conjugation, antibiotic production, motility, sporulation, and biofilm formation. Many pathogens have evolved quorum-sensing mechanisms to mount population-density-dependent attacks to over-whelm the defense responses of plants, animals, and humans. Since these AHL-mediated signaling mechanisms are widespread and highly conserved in many pathogenic bacteria, the disruption of quorum-sensing system might be an attractive target for novel anti-infective therapy. To control AHL-mediated pathogenicity, several promising strategies to disrupt bacterial quorum sensing have been reported, and several chemicals and enzymes have been also investigated for years. These studies indicate that anti-quorum sensing strategies could be developed as possible alternatives of antibiotics.
This study was carried out to simultaneous determination of penicillin G and chloramphenicol in livestock products by HPLC. The results obstained were as follows; 1. Penicillin G and chloramphenicol were analyzed by HPLC on symmetry $C_{18}$ column with acetonitrile-0.1 M phosphate buffer containing 0.0157 M thiosulfate (25 : 75) as mobile phase at UV 325nm and 280nm, respectively. 2. Samples were applied to a SeP-Pak $C_{18}$ cartridge, from which eluted penicillin derivatized with 2 M 1,2,4-triazole containing 0.001 M mercuric chloride. 3. The average recovery rates of penicillin G and chloramphenicol were 81.8% and 80.3%, respectively, and the detection limits were 5 ppb (5$\mu\textrm{g}$/kg: 7.9IU/kg) for penicillin G and chloramphenicol in porcine and bovine muscle.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.24
no.4
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pp.813-822
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1997
Odontogenic maxillofacial space abscess in childeren was treated by the surgcal intervention combined with antiboitic therapy. Followings are the results after monitoring its progression. 1. Maxillofascial space abscess is mainly from the odontogenic infection and it may result in the severe states with the various fascial spaces and their relatives. So their early detection and treatment are needed. 2. The most common symptom in patients was the pain under palpation with painful swelling and the mouth floor elevation was observed in the sublingual space abscess. 3. In most cases, for its treatment, symptomatic therapy, antibiotic therapy, surgical incision and drainage were executed. If the infected tooth is possibly conserved, endodontic treatment is preferred, otherwise, it will be extracted as soon as possible.
Antimicrobial peptides are widely used in various organisms as a defense system against infection. The peptides are lethal towards bacteria and fungi, however have minimal toxicity in mammalian and plant cells. In this aspect, it is considered that antimicrobial peptides are new alternative materials for defensing against microbial infection. Here, we describe overall characteristics of antimicrobial peptides based on the mechanism of action, classification of the peptides, report detection/screening methods and chemical/biological production. It is expected that understanding of innate immune system based on antimicrobial peptides tends to develop novel natural antimicrobial agents, which might be applied for defensing pathogenic microorganisms resistant to conventional antibiotics.
Park, Sun-Hee;Park, Yeon-Kyoung;Hwang, In-Yeong;Park, Hye-Young;Sung, Gyung-Hye;Jo, Hyeon-Cheol
Journal of Environmental Health Sciences
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v.42
no.4
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pp.255-265
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2016
Objectives: Mobile phones have become one of the most essential accessories in daily life. However, they may act as reservoir of infectious pathogens if they are used without hygienic practices in their handling. Therefore, this study aimed to isolate food-borne pathogens from mobile phones and investigate the characteristics of toxin genes and antibiotic susceptibility patterns. Methods: A total of 146 mobile phones were collected from 83 middle- and 63 high-school students in Busan. The surfaces of the mobile phones were aseptically swabbed. Results: Among the food-borne pathogens, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus and Escherichia coli were detected in 26 (17.8%), 20 (13.7%) and four (2.7%) samples, respectively. There were no statistically significant differences according to school level, gender or phone type. None of four E. coli strains had pathogenic toxic genes. All of the B. cereus strains carried at least three different toxin genes among the nine enterotoxin and emetic toxin genes. Three out of 20 B. cereus strains (15%) possessed emetic toxin genes, which are rarely detected in food-poisoning cases in Korea. Among the 26 strains of S. aureus, the detection rate of staphylococcal enterotoxin genes, toxic shock syndrome toxin (tsst) and factors essential for methicillin resistance (femA) were 84.6%, 7.7% and 100%, respectively. In the antibiotic susceptibility test, there was no methicillin-resistant S. aureus (MRSA) or vancomycin-resistant S. aureus (VRSA). Conclusion: The results show that students' mobile phones in Busan were contaminated by food-borne pathogens which carried various toxic genes. Therefore, regular phone disinfection and hand hygiene is important in order to reduce cross-contamination.
Plasmids are covalently closed circular molecules of DNA that are stably inherited and replicate somewhat independently of the bacterial chromosome. Genes carried on plasmids can mediate a wide variety of important functions, including antibiotics (R plasmids) and heavy metals resistance, toxins production, cell penetration, iron chelation, complement resistance, and metabolic characteristics such as sucrose and lactose fermentation. Fifty strains of lactobacilli were isolated from 26 staters and 29 fermented milk products. They were classified 27 strains as Lactobacillus paracasei subsp paracasei, 11 stains as Lactococcus lactis subsp cremoris, 6 strains as L delbrueckii subsp lactis, 4 strains as L acidophius, and 2 strains as L delbrueckii subsp bulgaricus. All of these strains were examined for drug resistance and transferability of R plasmids. All of the isolates were sensitive to Am, C, CF, E, NB, P, T, and Te. But resistant to SXT 94% (47 strains), K 66% (33 strains), S 56% (28 strains), ENR 50% (25 strains), NOR 38% (19 strains) CIP 38% (19 strains), GM 16% (8 strains), and N 14% (7 strains), in order. And 32 different resistant patterns were found. The most frequently encountered patterns were CIP-ENR-K-NOR-S-SXT (5 strains). In vitro R plasmids transfer experiment, 57 antibiotic resistant strains which were not transfer to the recipient 2 Escherichia coli strains by conjugation, These results indicate that Lactobacillus in internal trade market' stater recognize R factor but transmissible R plasmid is not existed.
This paper deals with the isolation of Salmonella on 3 herds during the period from May 1984 to May 1985. Isolated Salmonella were examined for serotypes, adhesive fimbriae, antibiotic susceptibility and detection of R plasmid. The results were as follows; Of total 1505 cattle, 24 Salmonella were isolated from 18 cattle (1.2%) and their serotypes were S. enteritidis (9 strains), S. derby(4 strains), S. infantis (1 strain), $C_1$ group(8 strains), $C_2$ group(1 strain) and untypable(1 strain). Twelve strains of Salmonella were isolated from 227 cattle with diarrhea and their serotypes were S. enteritidis(4 strains), S. derby(3 strains), S. infantis(1 strain), $C_1$ group(3 strains) and untypable(1 strain). The isolation rate of Salmonella in cattle varied from 1.6 to 0.9% in 3 herds, it was higher in summer and autumn and lower with the age. Of total 24 strains, 23 were adhesive type 1 fimbriae. Antibiotic susceptibility test of Salmonella isolated was performed by the agar dilution method, using 9 antibiotics as follows: ampicillin(Am), chloramphenicol(Cm), gentamicin(Gm), kanamycin(Km), nalidixic acid(Na), rifampicin(Rf), streptomycin(Sm), sulfadimethoxine(Su) and tetracycline(Tc). All the strains tested were susceptible to Am, Cm, Gm, Km, Na, Rf and Tc. Of total 24 strains, 23(95.8%) were resistant to Su and 14(58.3%) to Sm. Of the 23 resistant Salmonella strains, all the strains were found to carry R plasmid. Among them, two strains which had the R plasmid conferring SmSu resistance was transferable at $25^{\circ}C$ only.
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