잔가시 모자반 추출물의 피부 노화 억제 효과를 확인하기 위하여 항산화 활성, tyrosinase 저해 활성, collagenase 저해활성을 측정하였다. 잔가시 모자반 에탄올 및 물 추출물의 폴리페놀 함량은 11.20 mg/g 및 11.70 mg/g으로 차이가 나지 않았다. DPPH radical 소거능에서는 잔가시 모자반 에탄올 및 물 추출물 모두 0.5 mg/ml 농도에서 83.68% 및 79%로 활성이 높게 나타났으며, 금속봉쇄력에서는 에탄올 추출물이 물 추출물보다 높게 나왔으나 대조구인 EDTA보다 활성이 낮게 나타났다. Tyrosinase 및 collagenase 저해 활성은 에탄올 추출물이 물 추출물보다 더 높은 것으로 나타났고, collagenase 저해 활성은 에탄올 추출물이 1 mg/ml 농도에서 80% 이상으로 높은 효소 저해능을 보였다. 따라서, 잔가시 모자반은 에탄올 추출물에서 항산화능, tyrosinase 및 collagenase 저해 활성이 더 높게 나타나 피부 노화 억제를 위한 소재로서 더 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
멜라닌 생성은 생체 내에서 모발, 눈 및 피부의 색소 침착과 관련이 있는 것으로 알려져있다. 자외선 뿐만아니라 ${\alpha}-MSH$, SCF/c-Kit, $Wnt/{\beta}-catenin$ 및 산화 질소 신호 전달 경로와 같은 다양한 외부 인자가 멜라닌 세포를 자극하여 microphthalmia-associated transcription factor (MITF)에 의하여 발현되는 tyrosinase, tyrosinase 관련 단백질 (TRP)-1 및 TRP-2에 의하여 멜라닌이 생성된다. 그러나 멜라닌 생성의 비정상적인 조절은 모발 백발화와 백반증과 같은 피부병 문제를 유발한다. 따라서, 멜라닌 생성을 촉진하는 활성제는 모발 백발화의 예방 및 저 색소증 치료에 매우 중요하다. 많은 멜라닌 생성 자극제가 합성 화합물 및 천연물질로부터 유래한 신규 약물의 개발을 위해 연구되어 왔다. 여기서는, 새로운 항 백발화제의 개발을 위한 백발화 및 백반증 과정의 melanogenesis에 공통적인 신호 경로에 대한 기술 뿐만 아니라 백반증의 치료를 위한 약제로 멜라닌합성을 촉진하는 천연 약초와 그 활성 성분에 대하여 기술한다. 특히, 약물의 부작용으로 melanogenesis에 자극 효과가 있는 Imatinib 및 Sugen와 같은 화합물에 대하여 소개한다. 뿐만 아니라, 민간의 전통약제로 널리 알려진 적하수오, 흑임자, 흑미, 서목태, 현미와 같은 천연 식물추출물에 대한 최근 연구에 대하여 기술한다.
This study describes the anti-inflammatory, anti-oxidant, and melanogenesis inhibition activities of methanol extract and various organic solvent fractions of Arecae Pericarpium. We examined the inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazine (DPPH) scavenging activity, mushroom tyrosinase inhibition activity and melanin contents. The study showed that, among all tested fractions, methylene chloride fraction showed the strongest inhibition of LPS-induced NO production in RAW 264.7 cells ($IC_{50}$ value $8.89{\mu}g/mL$) and DPPH radical scavenging activity ($EC_{50}$ value $21.39{\mu}g/mL$). Methylene chloride and ethyl acetate fractions similarly inhibited mushroom tyrosinase activity. Methanol extract exhibited strongest reduction of melanin content in B16F10 melanoma cells. Based on the bioactivity assay results, methylene chloride and ethyl acetate fractions were further separated. Eight phenolic compounds were isolated, which are dimeric syringol (1), catechol (2), 4-hydroxybenzaldehyde (3), vanillin (4), 4-hydroxyacetophenone (5), apocynin (6), protocatechuic acid (7) and 4-hydroxybenzoic acid (8). Among the isolated compounds tested, catechol showed the strongest inhibition of LPS-induced NO production in RAW 264.7 cells. Catechol also showed the concentration-dependent NF-${\kappa}B$ inhibition activity. Arecae Pericarpium might have potentials to be developed as anti-inflammatory agent or dermatological product for skin-whitening agent.
솔잎으로부터 프리 라디칼 소거 작용이 있는 물질을 분리하고, 여러 기기 분석 결과에 근거하여 4-hydroxy-5-methyl-3[2H]-furanone (HMF) 으로 동정하였다. 이 물질이 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl 프리 라디칼에 대한 소거 작용이 공지의 항산화 물질인 a-tocopherol, ascorbic acid와 유사하였다. HMF는 흰쥐 간 microsome분획에서 Fe(II)/ascorbate에 의해 유도된 지질 과산화를 억제하였으며, 배양 fibroblast 세포에서 자외선에 대한 보호효과를 나타내었다. 이 물질은 또한 tyrosine의 효소적 산화와 Dopa의 자동 산화를 억제하였을 뿐만 아니라 배양 murine melanoma 세포에서도 강력한 멜라닌 생성 억제 작용을 보였다. 피부 세포에서의 멜라닌 생성이 산화적 스트레스에 의해 유발되고 또 효소, 비효소적인 산화 반응을 통해 진행된다고 볼 때, HMF는 이러한 각 단계에서 항산화제로 작용하여 궁극적으로 세포에서의 멜라닌 생성을 막는 것으로 추론되었다.
Lee, Taek Hwan;Kang, Ji Hee;Seo, Jae Ok;Baek, So-Hyeon;Moh, Sang Hyun;Chae, Jae Kyoung;Park, Yong Un;Ko, Young Tag;Kim, Sun Yeou
Biomolecules & Therapeutics
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제24권1호
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pp.85-93
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2016
We already reported that genetically engineered resveratrol-enriched rice (RR) showed to down-regulate skin melanogenesis. To be developed to increase the bioactivity of RR using calli from plants, RR was adopted for mass production using plant tissue culture technologies. In addition, high-pressure homogenization (HPH) was used to increase the biocompatibility and penetration of the calli from RR into the skin. We aimed to develop anti-melanogenic agents incorporating calli of RR (cRR) and nanoparticles by high-pressure homogenization, examining the synergistic effects on the inhibition of UVB-induced hyperpigmentation. Depigmentation was observed following topical application of micro-cRR, nano-calli of normal rice (cNR), and nano-cRR to ultraviolet B (UVB)-stimulated hyperpigmented guinea pig dorsal skin. Colorimetric analysis, tyrosinase immunostaining, and Fontana-Masson staining for UVB-promoted melanin were performed. Nano-cRR inhibited changes in the melanin color index caused by UVB-promoted hyperpigmentation, and demonstrated stronger anti-melanogenic potential than micro-cRR. In epidermal skin, nano-cRR repressed UVB-promoted melanin granules, thereby suppressing hyperpigmentation. The UVB-enhanced, highly expressed tyrosinase in the basal layer of the epidermis was inhibited by nano-cRR more prominently than by micro-cRR and nano-cNR. The anti-melanogenic potency of nano-cRR also depended on pH and particle size. Nano-cRR shows promising potential to regulate skin pigmentation following UVB exposure.
소사나무(Carpinus turczaninowii, C. turczaninowii) 잎 추출물의 멜라닌 생성 억제활성을 B16F10 melanoma 세포를 이용하여 측정하였다. 그 결과, 에탄올 추출물($100{\mu}g/mL$)에서 72.2%의 생성 억제 효과를 확인하였으며, 동일 농도에서 MTT 세포독성은 거의 나타나지 않았다. 분획물(헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물)을 제조한 후 실험을 진행한 결과, 에틸아세테이트 분획에서 가장 우수한 활성이 관찰되었다. 에틸아세테이트 분획에서 활성성분을 규명하기 위하여 크로마토그라피를 진행하였으며, 4개의 화합물을 분리 동정하였다; ethyl gallate (1), quercetin rhamnose (2), kaempferol rhamnose (3), quercetin galloylrhamnose (4). 화합물의 구조규명은 핵자기공명분광기 등을 이용하여 이루어졌으며, 4개의 화합물 모두 소사나무 잎에서는 처음 분리된 물질이다. 분리된 화합물을 대상으로 멜라닌 생성 억제활성 실험을 진행한 결과, 화합물 4에서 세포독성 없이 농도의존적인 억제활성을 확인하였다. 또한, 화합물 4는 세포 내에서 티로시나제 발현양을 감소시키고 있음을 ELISA를 통하여 확인하였다. 이상의 결과를 바탕으로, 소사나무 잎 추출물이 화장품에서 미백제로 활용될 가능성이 있다고 판단된다.
Nuruk contributes to the unique characteristics of Korean alcoholic beverages. In this study, the effects of nuruk extracts (NE) on anti-oxidant characters, melanogenesis, and anti-photoaging activity were investigated. NEs were obtained from the 70% ethanol extracts of six types of nuruk, which have been used in brewing of fermented alcohol beverages in Korea. First, various antioxidant characteristics were identified in terms of 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiozoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radical scavenging activity, superoxide dismutase (SOD) expression, and inhibition of xanthine oxidase activity. NE#4 exhibited potent ABTS radical scavenging activity ($IC_{50}$ = 19.51 ${\mu}g$/mL). Compared with NE#4, relatively lower levels of activity were observed for NE#3 and NE#6, with $IC_{50}$ values of 90.99 and 76.88 ${\mu}g$/mL, respectively. According to results of western blot analysis for determination of SOD expression in $H_2O_2$-treated HepG2 cells, NE#5 and NE#6 induced a dramatic increase in the expression ratio of SOD, compared to the group treated with $H_2O_2$ only. Activity of xanthine oxidase, which converts xanthine into uric acid, generating superoxide ions, was inhibited by NE#4 and NE#6 in a dose-dependent manner. NE#4 induced significant inhibition of mushroom tyrosinase activity. A reduction in cellular melanin contents of 80% was observed in B16F1 melanocytes treated with NE#5 and NE#6; these effects were similar to those of arbutin at 100 ${\mu}M$. In addition, gelatin zymography and reverse transcription-PCR analysis were performed for assessment of anti-photoaging activity of Nuruk. Treatment with NE#6 resulted in dramatically inhibited activities of matrix metalloproteinase (MMP)-2/-9, suppressed expression of MMP-1, and increased expression of type-1 procollagen. Results of gelatin zymography for NE#4 and NE#5 were similar, to a slightly lesser degree. These results suggest the potential of NE#4 and NE#6 as natural ingredients for use in functional foods and cosmetics.
본 연구에서는 한방 발효주 주박의 피부 생리 기능 활성을 알아보기 위해 주박 추출물 및 분획물을 준비하고 항산화, 미백 및 주름 개선 효과를 조사하였다. 그 중 한방 발효주 주박의 에틸아세테이트 분획물(KSD E4-3)이 가장 우수한 항산화 효과를 나타내었으며 이는 다양한 약재의 발효에 의한 효과로 사료된다. KSD E4-3은 tyrosinase 활성 억제 및 tyrosine을 기질로 melanin이 형성되는 pathway에 관여하는 주요한 인자인 TRP-1과 TRP-2를 저해하는 작용 기전을 통해 피부 색소침착의 주요 원인 물질인 melanin 생합성을 농도 의존적으로 저해하는 것을 확인하였다. 또한 KSD E4-3은 피부의 keratinocyte가 생성, 분비하는 MMP-1, -2, -9의 발현을 억제하여 UV 조사에 의한 피부 광노화에 따른 피부 주름 생성을 억제할 수 있음을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하면 한방 발효주 주박에서 추출한 KSD E4-3은 피부 미백 및 주름 개선에 우수한 효과를 나타내고 있으므로 기능성 화장품의 주요한 소재로 이용 가치가 높을 것으로 사료된다.
자외선에 노출된 피부는 활성산소종을 형성한다. 이는 피부의 염증 반응을 야기시키며 콜라겐 생성 억제를 통해 피부 노화를 촉진시킨다. 본 연구에서는 2종류의 항산화성 미네랄 바이오 활성수1과 2(MIBA-W1, MIBA-W2)를 이용하여 항염증 및 항노화 기초 효능과 함께 미백효능을 측정하였다. 두 종류 MIBA-W 모두가 UV에 의해 증가된 TNF-${\alpha}$를 상당량 줄여주는 것으로 나타나 항염증 효능이 있는 것이 확인되었다. 한편 UVB에 의해 감소되는 콜라겐 합성량은 MIBA-W1에 의해 0.01 % 농도에서 대조군 수준으로 증가하였으나 MIBA-W2는 농도가 증가할수록 콜라겐 합성량이 증가하는 경향을 보였다. 한편 MIBA-W2는 ${\alpha}$-MSH로 처리된 B16-F1 melanoma 세포에서의 멜라닌 합성을 억제하는 것이 관찰되었다. MIBA-W2 의 경우 고형분 0.001 % (부피비 5 %)의 농도에서 ${\alpha}$-MSH에 의한 멜라닌의 합성을 ${\alpha}$-MSH positive control 대비 약 50 % 감소시키는 효과를 보였다. 종합하면 두 종류의 MIBA-W는 항염증 효능과 미백기능을 가지는 피부생리활성을 가지고 있는 것이 확인되었으며 따라서 기능성화장품 소재로 개발될 수 있는 가능성을 보였다.
Previously, a 50% aqueous methanol extract of Galla rhois was shown to be the most potent tyrosinase inhibition activity with an {TEX}$IC_{50}${/TEX}(the concentration causing 50% inhibition of tyrosinase activity) of 0.2mg/ml of 205 crude drug extracts. To isolate tyrosinase inhibitors, the methanol extract was evaporated to a small volume in vacuo, and then partitioned stepwise with benzene and ethyl acetate(EtOAc). the EtOAc fraction was solubilized in 10% MeOH solution, and then fractionated successively by Diaion HP-20 and Sephadex LH-20 column chromatography, and preparative HPLC. Three phenolic compounds were isolated, and characterized as gallic acid(GA), methyl gallate(MG) and 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-$\beta$-D-glucose(PGG) by UV, IR, {TEX}${1}^H${/TEX}-&{TEX}${13}^C${/TEX}-NMR, and FAB-MS spectroscopy, PGG({TEX}$IC_{50}${/TEX}=50$\mu\textrm{g}$/ml) showed a considerable inhibitory effect against mushroom tyrosinase, while GA({TEX}$IC_{50}${/TEX}=1.6mg/ml) and MG({TEX}$IC_{50}${/TEX}=234$\mu\textrm{g}$/ml) did not show an appreciable effect. Meanwhile, MG inhibited greatly melanogenesis in a murine melanocyte cell line, Mel-Ab. MG and PGG showed typical noncompetitive inhibition patterns against mushroom tyrosinase. These results suggest that PGG and MG may be potentially useful as either anti-browning or anti-melanogenic agents in foods and cosmetics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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